HPLC法测定2-氨基-3,5-二溴苯甲醛的含量

李运婵 何庆国 李晓

摘要：目的 建立HPLC法测定2-氨基-3，5-二溴苯甲醛（简称SM）含量的方法。方法 色谱柱：C18柱，柱温：40℃，流动相：磷酸盐缓冲液（pH7.00）：乙腈=55：45，流速1.0ml/min，检测波长：245nm。结果 SM线性范围为0.1996～19.9598 μg/ml，线性良好（r=0.9999），平均回收率为100.4%，RSD为0.50%。结论 该方法灵敏，快速，结果准确，可用于SM的质量控制。

Abstract： Objective To establish an HPLC method for the assay of 2-amino-3，5-dibromobenzaldehyde（SM）. Method Chromatographic column： C18 column， column temperature：40℃，Mobile phase： phosphate buffer（pH7.00）： acetonitrile =55：45，flow rate：1.0ml/min， Detection wavelength：245nm. Results The linear range of SM was 0.1996～19.9598 μg/ml. The linearity was good （r=0.9999）， the average recovery was 100.4%， and the RSD was 0.50%. Conclusion The method is sensitive， rapid and accurate， and can be used for the quality control of SM

【中图分类号】R4             【文献标识码】A             【文章编号】2107-2306（2021）05-139-01

2-氨基-3，5-二溴苯甲醛为类白色或浅黄色固体粉末，分子式C7H5Br2NO，分子量278.9，CAS号：50910-55-9，在药物合成中应用广泛。它是合成盐酸氨溴索和盐酸溴己新的重要中间体，本文主要建立了SM含量测定的高效液相色谱法，该方法简便、准确、专属性强。

1 仪器与试药

Waters高效液相色谱仪;梅特勒电子天平。

2-氨基-3，5-二溴苯甲醛（自制），甲醇、乙腈为色谱纯。

2方法学验证

2.1 色谱条件

色谱柱：C18柱（4.6×250mm，5μm）;流动相：磷酸盐缓冲液（pH7.00）：乙腈=55：45;检测波长：245nm;柱温：40℃;流速：1.0ml/min;进样量：10μl。

2.2 线性关系 精密称取SM 10.27mg置10ml量瓶中，用甲醇分别稀释成0.2、1.0、2.0、4.0、10.0、20.0 μg/ml的溶液，各精密量取10μl注入液相色谱仪，进样测定峰面积。以色谱峰峰面积（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线并进行线性回归，得回归方程：A=28454C-3718.74，r = 0.9999，结果表明盐酸溴己新在0.1996～19.9598 μg/ml范围内线性关系良好。

2.3 最低检测限 按峰高为噪音的3倍计算，SM的最低检测浓度为0.0603μg/ml。

2.4 重复性试验 取同一批SM，分别精密称取6份50.25、50.18、50.18、50.15、50.14、50.12mg置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，并按上述色谱条件进行测定，计算含量分别为99.87%、99.90%、99.92%、99.89%、99.90%、99.95，RSD为0.02%，结果表明该起始原料制备方法重复性良好。

2.5 精密度試验 不同时间不同实验人员采用不同仪器取同一批SM，分别精密称取6份50.55、50.25、50.36、50.30、50.18、50.29mg置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，并按上述色谱条件进行测定，结果6份RSD为0.21%，表明精密度良好。

2.6 稳定性试验 取“2.2”项下浓度20μg/ml的SM溶液，分别于制备后的0、2、4、6、12、16、24h进样，按上述色谱条件测定，峰面积的RSD为0.35%，表明溶液在24h内稳定性良好。

2.7 含量测定 分别取3批不同SM约40mg，置于50ml量瓶中，依法溶解、稀释，摇匀，按上述色谱条件进行测定，结果见表1。

3 讨论

3.1 本实验对SM的含量测定进行了考察，得到了液相图谱，发现SM在0.1996～19.9598μg/ml浓度范围内线性良好（r=0.9999），平均回收率为100.4%，RSD为0.50%。

3.2 同时对自制3批样品按高效液相色谱法进行含量测定，结果符合规定，本方法测定SM的含量，回收率高，线性良好，符合定量分析要求。

参考文献：

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