血清微小RNA-21、颗粒体蛋白前体对无创机械通气早产儿呼吸窘迫综合征预后的预测价值

郭中林

河南省林州市妇幼保健院儿科 456550

早产儿呼吸窘迫综合征(Respiratory distress syndrome，RDS)是指28周左右的胎儿，由于肺还未发育完整，肺泡表面缺少肺泡表面活性物质，导致肺泡张不开，不能吸入氧气进行血氧交换而引起的呼吸困难与急促[1]。该病胎龄越小得病率越高，起病急、进展迅速且病死率较高。临床常采取无创机械通气治疗本病，能在一定程度上缓解疾病症状，辅助肺部气体交换，改善通气状况和缺氧状态。目前，关于RDS的发病及进展机制尚不明确。有学者表明RDS的致病因素与炎性因子失衡密切相关。血清微小RNA(microRNAs，miRNAs)是一类具有调控功能的内源性非编码单链小RNA分子，可参与炎症反应的调控过程，且有研究表示miRNA-21与RDS炎症中炎性因子表达密切相关[2]。颗粒体蛋白前体(Progranulin，PGRN)是组织中分布广泛、功能多样的一个生长因子家族，是体内一种自分泌抗炎蛋白，具有调节炎症反应的作用[3]。因此，本研究对行无创机械通气的呼吸窘迫综合征早产儿进行miRNA-21及PGRN检测，以探究其对该病的预后预测价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月—2020年3月收入我院的行无创机械通气的早产儿RDS 130例为观察组，男74例，女56例；胎龄28～35周，平均胎龄(31.08±3.14)周；出生时体重1.09～3.24kg，平均出生时体重(1.93±0.64)kg；出生时阿氏(Apgar)评分5～9分，平均Apgar评分(7.05±1.21)分；妊娠方式：剖宫产112例，阴道分娩18例；纳入标准：(1)符合欧洲2019年颁布的“新生儿呼吸窘迫综合征防治指南”[4]中早产儿RDS的相关诊断标准；(2)经影像学检查及血气分析等检查确诊为早产儿RDS；(3)28周<胎龄<35周出生早产儿；(4)72h内出现了呼吸加快等RDS典型症状。排除标准：(1)由心力衰竭或其他原因导致的呼吸窘迫综合征；(2)出生时体重<1kg；(3)存在先天呼吸系统畸形或先天性心脏病；(4)伴有自身免疫系统障碍或重度感染；(5)存在宫内窒息。将同期住院的83例非RDS早产儿作为对照组，男49例，女34例；胎龄28～35周，平均胎龄(31.12±3.18)周；出生时体重1.11～3.27kg，平均出生时体重(1.96±0.69)kg；出生时Apgar评分5～9分，平均Apgar评分(7.13±1.28)分；妊娠方式：剖宫产69例，阴道分娩14例；纳入标准：(1)经病史及超声辅助检查确诊为早产儿；(2)28周<胎龄<35周出生早产儿。排除标准：(1)无自主呼吸或自主呼吸不强；(2)出生时体重<1kg；(3)有出生窒息史或先天心肺发育不良；(4)多胎妊娠。比较两组患者一般资料无意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院医学伦理会审核并通过，患儿家属知情并签署同意书。

1.2 方法 两组患儿均给予心电监护、保暖、预防感染、保持呼吸道通畅、氧疗及补液等对症治疗。观察组在此基础上给予无创机械通气辅助呼吸，采用婴儿型专用定压呼吸机(SLE2000)并根据患儿实际情况，选择合适的鼻罩或面罩，连接通路进行通气治疗。呼吸机参数：氧浓度(FiO2)40%～60%，呼吸频率(RR)40次/min，呼气末正压(PEEP)4cmH2O(1cmH2O=0.098kPa)，峰值吸气压(PIP)12.5cmH2O。

1.3 观察指标 两组患儿均于入院时抽取空腹外周血液样本3ml，送至检验科离心分层，取血清，保存备用。采用酶联免疫法检测miRNA-21及PGRN水平，试剂盒由Abcam公司提供，所有操作均严格按照说明书步骤进行。根据早产儿RDS预后情况分为存活组与死亡组，并收集两组患儿的临床资料，包括性别、胎龄、出生体重、呼吸急迫出现时间、分娩方式、胎膜早破、氧合指数(PaO2/FiO2)、miRNA-21及PGRN水平等，进行分析比较、评估。

2 结果

2.1 治疗前观察组与对照组miRNA-21及PGRN水平比较 观察组治疗前miRNA-21及PGRN水平均高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 治疗前观察组与对照组miRNA-21及PGRN水平比较

2.2 存活组与死亡组临床资料单因素比较 死亡组出生体重低于存活组(P<0.05)，miRNA-21及PGRN水平均高于存活组(P<0.05)；而其余各指标比较无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 存活组与死亡组临床资料单因素比较

2.3 早产儿RDS发生死亡的Logistic回归分析 将表2中具有统计学意义的相关因素进行Logistic回归分析，得到出生体重、miRNA-21及PGRN水平是早产儿RDS发生死亡的独立危险因素(P<0.05)。见表3。

表3 早产儿RDS发生死亡的Logistic回归分析

2.4 miRNA-21及PGRN预测早产儿RDS死亡的ROC曲线分析 经ROC曲线分析，得到miRNA-21联合PGRN预测的ROC曲线下面积、敏感度及特异度均高于miRNA-21和PGRN单独预测面积、敏感度及特异度(P<0.05)。见表4、图1。

图1 miRNA-21及PGRN预测早产儿RDS死亡的ROC曲线

表4 miRNA-21及PGRN预测早产儿RDS死亡的ROC曲线分析

3 讨论

RDS是新生儿最常见的疾病之一，其中早产儿最为多见，该病主要以尽快恢复正常通气为治疗原则，尽管早期积极使用无创机械通气改善呼吸减低死亡率，但早产儿RDS的总体死亡率仍较高[5]。目前临床关于早产儿RDS预后尚无统一指标，故寻找灵敏度和特异度较高的标志物来评估判断早产儿RDS预后具有重要作用。

miRNA-21是一种靶向作用于mRNA，使mRNA沉默或抑制翻译的转录后调节微小RNA，近年来，多数研究学者将其作为生物标志物，广泛研究其在RDS发生发展中的靶向调节作用[6]。PGRN是一种多功能生长因子，可参与损伤修复、肿瘤进展及神经退行性病变等，在疾病炎症过程中发挥重要作用，不同的组织和不同的炎症PGRN能通过不同的信号通路，发挥抗炎或促炎作用[7]。近期有学者表示，PGRN能减轻诱导实验鼠肺损伤，抑制细胞凋亡，说明PGRN可作为治疗RDS的重要研究方向[8]。本研究结果显示，观察组治疗前miRNA-21及PGRN水平均高于对照组，提示miRNA-21及PGRN水平的高表达与早产儿RDS的发生发展具有一定关系。

RDS可引起肺纤维化，从而加重病情。有研究表示，RDS血液中miRNA-21高水平表达，可促进肺纤维化，导致病情加重[2]。miRNA-21水平升高后可调控炎性因子，并激活炎性反应，进一步损伤肺组织，导致肺功能及气体交换受损，出现呼吸困难或呼吸衰竭的症状。有学者表示，PGRN高表达水平时可调节和诱导慢阻肺患者上皮细胞凋亡，慢阻肺患者PGRN越高其肺功能越低，有可能作为预测慢阻肺预后的指标之一[9]。本研究结果显示，死亡组出生体重低于存活组，miRNA-21及PGRN水平均高于存活组，说明出生体重轻且miRNA-21及PGRN高水平表达患儿的预后较差。本研究结果显示，经Logistic回归分析，得到出生体重、miRNA-21及PGRN水平是早产儿RDS发生死亡的独立危险因素，说明低体重出生儿及高水平miRNA-21及PGRN是早产儿RDS发生死亡的危险因素。但出生体重对于影像学和血气分析等检查较为局限，精准度不高，故不纳入曲线分析。

早产儿心肌细胞对缺氧缺血极度敏感。早产儿RDS肺循环阻力增大、缺氧及炎症反应等均可造成心肌细胞微循环障碍和代谢异常，导致心肌细胞通透性增加，且由于受损的心肌细胞膜外渗导致血液中miRNA-21及PGRN水平升高[10]。有学者表示，可通过检测miRNA-21评估RDS的预后情况[11]。也有学者表示，PGRN参与了早产儿RDS的发生发展，且与疾病的预后密切相关，具有一定的检测价值。鉴于单一的指标预测能力仍存在不足，本研究将两种指标联合进行检测，结果显示，经ROC曲线分析，得到miRNA-21联合PGRN预测的ROC曲线下面积、敏感度及特异度均高于miRNA-21和PGRN单独预测面积、敏感度及特异度，提示miRNA-21及PGRN联合预测能力较高，将其应用于临床，能有效提高临床决策能力。

综上所述，miRNA-21及PGRN水平在早产儿呼吸窘迫综合征中显著增高，是引起该类患儿死亡的独立危险因素，且两者联合检测能显著提高预测能力，对评估早产儿呼吸窘迫综合征预后具有较高的临床价值。