彩色多普勒超声联合血清glactin-3，HMGB-1和TSGF水平检测在甲状腺腺瘤诊断中的临床意义

赵白信，于慧娟，焦方杰，邢丽丽，黄 蕾，姚辉梅

（郑州市第七人民医院功能科，郑州 450000）

甲状腺癌（thyroid carcinoma，TC）是临床常见恶性肿瘤，其发病率在头颈部肿瘤中已跃居首位[1-2]。由于该病早期症状隐匿且无特异性，易与甲状腺肿、甲状腺腺瘤等混淆，误诊率、漏诊率高[3]。因此，探寻更为准确的TC 诊断方式广受临床关注。目前彩色多普勒超声是诊断TC 的常用方式，既可定位肿瘤位置，也能定性肿瘤，整体效果满意，但TC 表现的复杂性及多样性使得其单独应用受到一定限制。近年来血清标志物诊断肿瘤疾病的价值逐渐被挖掘。半乳糖血凝素-3（galactose hemagglutinin-3，glactin-3）、高迁移率族蛋白B-1（high mobility group box B-1，HMGB-1）和肿瘤特异性生长因子（tumor specific growthFanctor，TSGF）异常表达于小细胞肺癌、骨癌、TC 等多种恶性肿瘤[4-6]，提示上述因子与肿瘤发生、发展相关，但目前鲜有关于三者与彩色多普勒超声联合诊断TC 价值的研究。本研究以156 例高度怀疑为TC的甲状腺腺瘤患者为研究对象，评价彩色多普勒超声联合血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 检测诊断TC 的价值。详述如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 从2017年7月～2019年7月本院高度怀疑为TC 的甲状腺腺瘤患者中抽取156 例，男性51 例，女性105 例，年龄35～71 岁，平均年龄52.17±7.26 岁；体质量指数（body mass index，BMI）18.01～28.12 kg/m2，平均23.05±1.13kg/m2。另从同期本院体检人群中随机抽取73 例设为健康组，男性18 例，女性55 例，年龄32～74 岁，平均年龄51.96±7.04 岁；BMI 18.12～27.64 kg/m2，平均23.34±1.38kg/m2。纳入标准：156 例患者经影像学检查证实存在甲状腺腺瘤，且至少符合以下1 项：①女性；②高辐射环境暴露史；③碘摄入量过多；④恶性肿瘤家族史。健康组经体检甲状腺各项指标正常；所有受试者沟通与理解能力均正常。排除标准：①已被确诊为甲状腺癌；②具有头颈部放疗史或（和）相关治疗史；③肝、肾等主要器官功能异常；④其他恶性肿瘤发生转移的患者；⑤妊娠期、哺乳期女性。该研究获得医院伦理委员会批准，受试者签署研究知情同意书。

1.2 仪器与试剂 glactin-3，HMGB-1 和TSGF酶联免疫吸附法（enzyme linked immunoserbent assay，ELISA）试剂盒由德国SIEMENS 股份公司提供；ACUSON Oxana Series 彩色多普勒超声诊断仪由德国SIEMENS 股份公司提供；AMR-100 全自动酶标分析仪由江苏盛蓝仪器制造有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 彩色多普勒超声诊断：选用彩色多普勒超声诊断仪，探头频率9～13 MHz。受试者保持仰卧体位，颈后放垫以垫高颈部，涂抹耦合剂于颈部皮肤，选用凸形探头，直接接触皮肤并将其置于甲状腺位置。顺甲状腺行横切、纵切十字交叉位检查，再行左右纵向扫查，观察结节回声，仔细记录结节位置、体积、数量、形态，并测量其收缩期峰值流速（peak systolic velocity，PSV）、阻力系数（resistance index，RI），观察其周围及内部血流分布。血流分级：病灶周围或内部未显示血流信号为0 级；病灶周围血流信号分布≤1/3 病灶周长或病灶内部血流信号分布≤1/3 病灶面积为I 级；病灶周围血流信号分布＞1/3 病灶周长或病灶内部血流信号分布＞1/3病灶面积为II 级；病灶周围信号基本占据全部周长或病灶内部血流信号极为丰富为III 级。由2 位具备相关资质的超声诊断医师评价检查结果。阳性判断标准：以钙化灶，RI ＞0.70，血流分级≥II 级[9]。

1.3.2 血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 水平测定:晨起空腹抽取受试者静脉血4 ml，采用ELISA法检测血清glactin-3，HMGB-1，TSGF 水平，检测步骤完全依照试剂盒说明书进行。采用全自动酶标分析仪测定450 nm 位置吸光光度值，重复测定3 次取平均值。血清指标阳性判断标准：glactin-3＞16.03 ng/ml，HMGB-1 ＞11.00 ng/ml，TSGF ＞71.00 U/ml。彩色多普勒超声联合血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 检测采用平行检测方式，即≥1项为阳性则整体结果判定为阳性。

1.3.3 病理诊断:156 例高度怀疑为TC 的甲状腺腺瘤患者均经腔镜手术切除，其中腔镜下甲状腺腺瘤切除术74 例，甲状腺腺叶切除术41 例，甲状腺腺叶次全切除术22 例，双侧甲状腺次全切除术19 例。于手术过程中规范化采集病灶组织块（体积为2.0 cm×2.0 cm×0.3 cm），尽快置入液体固定剂中固定；采用乙醇脱水后将石蜡浸入组织中，后置入融化石蜡中完成包埋；石蜡切片，厚度4～6μm，经HE 染色后观察病理结果。以《甲状腺·甲状旁腺外科学》为诊断依据[8]，术后对肿瘤标本进行病理诊断，固定染色后以胞浆或胞核中显示淡黄色、黄色或棕褐色颗粒为阳性判断标准。

1.4 统计学分析 采用SPSS 26.0 统计学软件分析数据，计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用单因素方差分析行多样本计量资料检验，采用LSD-t检验进一步两两比较；计数资料以率（%）表示，采用χ2检验；通过Med Calc 9.3.0 绘制受试者工作曲线（receiver operating curve，ROC），基于曲线下面积（area under curve，AUC）判断该模型诊断甲状腺腺瘤的价值，AUC ＞0.5 提示该模型有诊断价值。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病理诊断结果156 例高度怀疑为TC 的甲状腺腺瘤患者经病理诊断，64 例确诊为TC，占41.03%，其中32 例为乳头状癌，14 例为滤泡状癌，9 例为髓样癌，6 例为未分化癌，3 例为混合癌。

2.2 三组彩色多普勒超声诊断结果比较 见表1。114 例为单发结节，42 例为多发结节；54 例为实质性结节，且内部回声减低；49 例病灶边缘模糊，形态不规则，内部存在砂砾样钙化灶；42 例结节存在明显毛刺状不规则边界；18 例颈部发现淋巴结转移。51 例综合确诊为TC，占32.69%。三组PSV，RI 及血流分级0～I 级，Ⅱ～Ⅲ级构成比比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；TC 组PSV，RI及血流分级Ⅱ～Ⅲ级构成比均大于良性组（t=5.487，8.684，χ2=45.271）、健康组（t=11.095，12.384，χ2=89.290），良性组上述指标均大于健康组（t=5.869，6.790，χ2=19.173），差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

表1 三组彩色多普勒超声诊断结果比较

2.3 三组血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 水平比较 见表2。三组血清glactin-3，HMGB-1和TSGF 水平比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；TC 组上述指标水平高于良性组（t=11.509，7.761，8.999）、健康组（t=22.346，26.979，15.220，P＜0.001），良性组上述指标均高于健康组（t=15.979，25.145，7.042，P＜0.001），差异均有统计学意义。

表2 三组血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 水平比较（±s）

表2 三组血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 水平比较（±s）

项 目TC 组（n=64）良性组（n=92）健康组（n=73）F 值P 值glactin-3（ng/ml）26.47±4.9119.05±3.1411.83±2.52287.767＜0.001 HMGB-1（ng/ml）14.97±2.8611.92±2.055.37±0.97395.316＜0.001 TSGF（U/ml）79.56±9.0366.97±8.4058.16±7.42114.259＜0.001

2.4 彩色多普勒超声、血清glactin-3，HMGB-1，TSGF 单独及联合诊断TC 的效能 见表3，图1。ROC 结果显示，血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF诊断甲状腺腺癌的最佳截断点分别为22.15 ng/ml，13.62 ng/ml，73.46 U/ml，彩色多普勒超声、血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 单独诊断的AUC 分别为7.843，6.953，7.210，7.433，联合诊断的AUC为8.126。

表3 四者单独、联合诊断TC 的效能（%）

图1 彩色多普勒超声、血清glactin-3，HMGB-1，TSGF单独及联合诊断TC 的ROC 曲线

3 讨论

TC 为高发甲状腺恶性肿瘤，其发病率随年龄增长而持续上升[9]，且女性患者多于男性。研究显示[10]，内分泌紊乱、碘摄入量、良性疾病病变及遗传因素等均为TC 发生的危险因素。该病早期可通过触诊发现甲状腺中表面不平、质地坚硬的肿块，晚期则可出现呼吸及吞咽障碍、声音嘶哑等症状，且部分患者可发生远处转移或腺内扩散，严重威胁其生命安全。早期确诊对TC 患者尽早开展手术切除、延长其生存期限至关重要。目前临床触诊、CT检查、磁共振及穿刺活检等TC 诊断技术均有一定缺陷，如准确度不足、创伤大、不具有重复性等[11]。因此，探究有效、安全、操作简便的诊断方式是医学领域重点研究课题。

本研究显示，TC 组、良性组和健康组PSV，RI 及血流分级II～III 级构成比依次降低，提示TC患者PSV，RI 及血流分级II～III 级构成比异常升高。彩色多普勒超声可显示出甲状腺内部微小病灶，并可反映病灶边界及内部钙化、血流特征，进而辅助判断肿瘤性质。恶性肿瘤的持续生长对新生血管生成依赖性极强，故TC 病灶中血管丰富、血流速度快，树枝状、网状血管分布紊乱，而良性肿瘤通常由宿主为其提供血液，血流大部分为抱球样，且速度较慢、走向规律，因此PSV，RI 及血流分级可作为鉴别良恶性的参考依据。本研究还显示，TC组、良性组和健康组血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 水平依次降低，提示TC 患者血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 水平异常升高。glactin-3 在正常组织、肿瘤细胞中均有分布，经非经典途径分泌至细胞外，根据所处生理、病理条件发挥对应生物学功能，以调节细胞生长、分化为主要作用，广泛参与肿瘤细胞黏附、增殖及迁移过程。HMGB-1 属于非组蛋白染色质蛋白，通常存在于细胞核参与调控基因转录，并可维持染色质结构与功能的稳定[12]。其可与纤溶酶原系统结合，增强基质金属蛋白酶活性，促进肿瘤进展、转移。研究认为[13-14]，宫颈癌、非小细胞肺癌血清HMGB-1 水平均显著高于正常群体，提示该因子可作为恶性肿瘤诊断的参考指标之一。TSGF 与多种肿瘤的增殖、侵袭等生物学活动有关[15-17]，对肿瘤生长及周边血管增生有促进作用，且随肿瘤细胞的分化被持续释放入血液，导致血清水平异常升高。

本研究通过绘制ROC 曲线发现，彩色多普勒超声和血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 单独诊断TC 的AUC 分别为7.843，6.953，7.210，7.433，联合诊断的AUC 为8.126，表明四者联合诊断TC的价值高于单独诊断。甲状腺腺瘤可在一定条件下发生癌变，多个腺瘤患者的每个腺瘤生长状态均存在差异，因此甲状腺腺瘤并发TC 在临床较为常见[18-19]。彩色多普勒超声对单独甲状腺腺瘤或TC 诊断准确率较高，但两者并发时常发生误诊或漏诊问题。血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 检测操作简单，患者接受度高，但在2 型糖尿病并发脑梗死、宫颈癌、原发性肝癌等其他恶性肿瘤中同样异常表达[14，20-21]，单独检测特异度不足，且不能反映出腺体自身形态学及血流动力学的变化，故需与彩色多普勒超声联用，相互弥补，促进TC诊断效能的提升。

综上所述，彩色多普勒超声联合血清glactin-3，HMGB-1 和TSGF 检测可作为TC 的有效诊断方式。本研究尚有不足，如受客观条件限制所选病例数较少、未对良性甲状腺腺瘤患者继续随访等，在今后研究中需针对性改进。