血清视锥蛋白样蛋白1和CXC型趋化因子配体16及抗心磷脂抗体水平与急性脑梗死患者病情及预后的关系研究

陈圣君，李波，陈国柱，杨丹

急性脑梗死主要因脑部动脉粥样硬化和血栓造成局部脑组织区域血液供应障碍，导致脑组织急性缺血缺氧性病变坏死，进而产生对应的神经功能缺失表现［1］。据统计，急性脑梗死发病率约占临床脑血管疾病的80%，是人类常见死亡原因之一，严重威胁人们的生命健康与生活质量［2］。研究提示，对急性脑梗死患者实施超早期及急性治疗是减缓脑组织损伤的有效措施，而及时诊断与准确评估患者病情是早期干预的前提，对患者的康复及预后至关重要［3］。因此，为急性脑梗死临床诊断寻求科学灵敏的血清学指标具有重要研究价值。视锥蛋白样蛋白1（VILIP-1）可与钙离子结合，参与维持脑部神经功能正常运行，已有研究表明，VILIP-1指标可用于评估老年早期脑萎缩程度［4］。CXC型趋化因子配体16（CXCL16）属于趋化因子CXC家族，当其表达量高于参考范围时，能够激活机体免疫反应并加速动脉粥样硬化形成［5］。另外，近年来研究发现，脑血管缺血性疾病的发生通常伴随抗心磷脂抗体（ACA）水平的升高［6］，由此认为该指标可在一定程度上反映血管内皮损伤程度。基于此，本研究探讨了血清VILIP-1、CXCL16及ACA水平与急性脑梗死患者病情及预后的相关性，以期为临床急性脑梗死的早期诊断提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年6月—2020年8月杭州市富阳区第一人民医院收治的急性脑梗死患者（急性脑梗死组，n=116），以及同期在本院健康体检者（对照组，n=60）作为研究对象。急性脑梗死组患者根据神经功能损伤程度分为轻、中、重度损伤亚组（n=36、48、32），根据颅脑电子计算机断层扫描（CT）检查的脑梗死面积分为大、中、小面积梗死亚组（n=30、55、31），根据改良Rankin量表（mRS）分为预后良好、预后不良亚组（n=70、46）。

对照组中男32例、女28例，年龄35～75岁，平均年龄（64.5±10.8）岁，体质指数（BMI）18～27 kg/m2，平均BMI（23.6±2.4）kg/m2；急性脑梗死组中男66例、女50例，年龄38～77岁，平均年龄（65.7±11.5）岁，BMI 18～28 kg/m2，平均 BMI（23.8±2.6）kg/m2，合并高血压68例、糖尿病40例、高脂血症34例、饮酒史39例。两组性别、年龄、BMI比较，差异无统计学意义（χ2=0.203，t=0.678，t=0.496，P均>0.05）。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》［7］中有关急性脑梗死患者的诊断标准；初次发病，既往无急性脑梗死史；发病至入院间隔时间<24 h；经CT、MRI等影像学检查确诊；临床资料完整。排除标准：合并恶性肿瘤、全身性感染疾病、自身免疫性疾病；脑部曾有外科手术史；心肝肾等重要器官功能严重损伤；脑出血；近期使用过抗凝药物。

1.3 检测方法 抽取研究对象外周静脉血5 ml，以3 000 r/min离心15 min（离心半径为13.5 cm）后收集上清液，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清VILIP-1、ACA水平，检测试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司；采用化学发光法检测血清CXCL16水平，检测试剂盒购自北京冬歌博业生物科技有限公司。所有操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 分组标准 梗死面积：采用CT测定脑梗死面积，脑梗死灶最大层面直径<1.5 cm为小面积梗死，1.5～5.0 cm为中面积梗死，>5.0 cm为大面积梗死。

神经功能损伤程度：根据美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分评价急性脑梗死组患者神经功能损伤程度［8］，NIHSS评分0～15分为轻度损伤，16～30分为中度损伤，31～45分为重度损伤。

2 结果

2.1 两组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较 急性脑梗死组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.0.5），见表1。

表1 两组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较（±s）Table 1 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA between acute cerebral infarction patients and healthy examinees

表1 两组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较（±s）Table 1 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA between acute cerebral infarction patients and healthy examinees

注：VILIP-1=视锥蛋白样蛋白1，CXCL16=CXC型趋化因子配体16，ACA=抗心磷脂抗体

ACA（mg/L）对照组 60 1.25±0.33 1.45±0.42 0.33±0.10急性脑梗死组 116 8.53±2.84 2.47±0.83 1.17±0.38 t值 -19.760 -8.937 -16.803 P值 <0.001 <0.001 <0.001组别 例数 VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）

2.2 轻、中、重度损伤亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较 轻、中、重度损伤亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）。其中中、重度损伤亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于轻度损伤亚组，差异有统计学意义（P<0.05）；重度损伤亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于中度损伤亚组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2 轻、中、重度损伤亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in mild，moderate and severe neurological impairment subgroups

表2 轻、中、重度损伤亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in mild，moderate and severe neurological impairment subgroups

注：与轻度损伤亚组比较，aP<0.05；与中度损伤亚组比较，bP<0.05

ACA（mg/L）组别 例数 VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）轻度损伤亚组 36 6.27±1.73 1.90±0.54 0.84±0.27中度损伤亚组 48 8.55±2.28a 2.46±0.65a 1.26±0.29a重度损伤亚组 32 11.03±2.51ab 3.12±0.87ab 1.42±0.36ab F值 39.951 26.733 34.258 P值 <0.001 <0.001 <0.001

2.3 大、中、小面积梗死亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较 大、中、小面积梗死亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）。其中中、大面积梗死亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于小面积梗死亚组，差异有统计学意义（P<0.05）；大面积梗死亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于中面积梗死亚组，差异有统计学意义（P<0.05），见表3。

表3 大、中、小面积梗死亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较（±s）Table 3 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in small，medium and large infarction subgroups

表3 大、中、小面积梗死亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较（±s）Table 3 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in small，medium and large infarction subgroups

注：与小面积梗死亚组比较，aP<0.05；与中面积梗死亚组比较，bP<0.05

ACA（mg/L）小面积梗死亚组 31 6.68±1.82 1.96±0.54 0.92±0.36中面积梗死亚组 55 8.19±2.49a 2.36±0.70a 1.19±0.34a大面积梗死亚组 30 11.05±2.58ab 3.19±0.80ab 1.40±0.35ab F值 27.172 25.471 14.376 P值 <0.001 <0.001 <0.001组别 例数 VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）

2.4 预后良好、预后不良亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较 预后不良亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于预后良好亚组，差异有统计学意义（P<0.05），见表4。

表4 预后良好、预后不良亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较（±s）Table 4 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in good and poor prognosis subgroups

表4 预后良好、预后不良亚组血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比较（±s）Table 4 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in good and poor prognosis subgroups

ACA（mg/L）预后良好亚组 70 7.21±2.29 2.11±0.62 1.02±0.34预后不良亚组 46 10.53±2.42 3.01±0.81 1.40±0.33 t值 7.468 6.805 5.856 P值 <0.001 <0.001 <0.001组别 例数 VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）

2.5 血清VILIP-1、CXCL16、ACA预测急性脑梗死预后分析 绘制血清VILIP-1、CXCL16、ACA预测急性脑梗死预后的ROC曲线，结果显示，血清VILIP-1、CXCL16、ACA预测急性脑梗死预后的AUC分别为0.848、0.820、0.784（表5、图1）。

图1 血清VILIP-1、CXCL16、ACA预测急性脑梗死预后的ROC曲线Figure 1 ROC curve analysis of serum VILIP-1，CXCL16 and ACA in predicting the prognosis of acute cerebral infarction

表5 血清VILIP-1、CXCL16、ACA预测急性脑梗死预后的AUC、灵敏度、特异度Table 5 The AUC，sensitivity and specificity of serum VILIP-1，CXCL16 and ACA in predicting the prognosis of acute cerebral infarction

3 讨论

急性脑梗死具有起病急、发病率高、致残率高、病死率高等特点，严重威胁患者的生命安全，也给患者家庭带来了沉重的负担。因此，寻找准确且有效的检测指标，及时干预治疗对于急性脑梗死的临床防治工作意义重大。ACA是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂为靶抗原的自身抗体，可与内皮细胞上的磷脂结合蛋白相互结合，使得细胞膜磷脂成分减少，前列腺素合成量降低，同时介导花生四烯酸大量释放，引起血管内皮损伤，且随着局部血管收缩，血小板聚合效果增强，影响机体的抗凝作用，进而导致血栓形成风险增加［10-11］。本研究结果显示，急性脑梗死组血清ACA水平高于对照组，提示ACA指标在脑梗死发病过程发挥了一定的作用。急性脑梗死可由动脉硬化发展而来，患者发病过程中内皮细胞受到损伤导致细胞膜上的磷脂成分暴露，并刺激机体产生ACA，进一步诱发血栓形成，从而引发恶性循环［12-13］。

VILIP-1属于小分子胞质蛋白，主要表达于脑部神经元，具有较高的神经系统特异性；其可通过结合钙离子并调控钙平衡发挥相关生物学作用。本研究结果显示，急性脑梗死组血清VILIP-1水平高于对照组，表明VILIP-1指标一定程度上可评估脑梗死发病情况。已有研究表明，VILIP-1能够驱动脑脊液中的tau蛋白，使其聚集并对神经元产生毒性，导致微管蛋白失效，从而引起神经功能衰退［14-15］。由此可见，VILIP-1水平与脑损伤疾病进展均有一定的相关性，可作为脑部损伤的敏感标志物。而急性脑梗死患者脑组织因缺血缺氧，致使脑部神经元受损，进而使胞内的VILIP-1大量释放到细胞外，并进入外周血，因此血清VILIP-1水平呈升高表现［16］。

本研究结果显示，急性脑梗死组血清CXCL16水平高于对照组。有关研究结果表明，炎性反应是脑梗死发生后进一步诱发脑损伤进展的关键病理过程，是导致血管内皮与神经功能损伤恶化的重要因素［17］。CXCL16属于趋化因子，可在细胞区及淋巴结中表达，通过参与炎性反应和新生血管形成维持机体免疫系统的自我稳定；而当组织发生病变时，CXCL16作为血管源性因子在诱导血管生成的同时也易导致斑块不稳定性增加，引发出血及破裂［18-19］。XING等［20］研究显示，CXCL16水平与急性冠脉综合征病情及炎症严重程度呈正相关，对脑损伤疾病进展有促进作用。发生脑梗死后，激活的胶质细胞将释放肿瘤坏死因子、白介素等炎性因子，随着促炎信号的增强，内皮细胞趋化因子及其受体水平上调，趋化功能逐渐加强，导致CXCL16从细胞表面脱落而参与淋巴细胞群的迁移，血清CXCL16表达量增加。

NIHSS评分是评价脑血管疾病后神经功能损伤程度的重要标准，可综合评估脑梗死患者的脑损伤严重程度；此外，可通过脑部影像学检查评判患者脑梗死面积，梗死面积越大意味着患者动脉供血区脑组织坏死和软化情况越严重。本研究将急性脑梗死患者按NIHSS评分、梗死面积及预后情况分亚组并进行分析，结果发现，血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平随着急性脑梗死患者NIHSS评分的升高、梗死面积的增大呈逐渐上升趋势，提示血清VILIP-1、CXCL16、ACA参与神经功能损伤过程，是评估脑梗死患者病情严重程度的敏感指标。脑梗死面积指脑组织坏死、软化区域大小，其与神经功能损伤是急性脑梗死发生发展过程中两个同时存在且相互影响的病理生理特征。随着脑梗死斑块的扩大，大量ACA被刺激形成，促使血小板聚合，且可在一定程度上推动局部炎性反应发生。此外，随着脑梗死病情不断发展，患者脑组织神经元发生变性甚至凋亡，即神经元损伤，使得其中的VILIP-1因子表达失常并进入血液循环系统，引发血清VILIP-1水平上升；且神经元损伤可促进促炎性信号释放，从而导致趋化因子CXCL16发生高表达。另外，本研究结果显示，预后不良的急性脑梗死患者血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于预后良好者，且血清VILIP-1、CXCL16、ACA预测急性脑梗死预后情况的AUC分别为0.848、0.820、0.784，说明VILIP-1、CXCL16及ACA指标对于脑梗死患者预后情况具有较好的诊断作用及预测价值。

综上所述，急性脑梗死患者机体血清VILIP-1、CXCL16及ACA水平较健康人群明显上升，且各指标的表达与脑梗死损伤程度分型及临床预后密切相关，可作为预测急性脑梗死预后情况的有效指标。

作者贡献：陈圣君进行文章构思与设计、统计学结果分析、撰写论文；李波、陈国柱进行研究实施、资料收集整理、质量控制与文章修订；杨丹进行文章审校，并对文章整体负责。

本文无利益冲突。