刘力铭
河南省平顶山市第一人民医院 467000
自身免疫性溶血性贫血(Autoimmune hemolytic anemia,AIHA)由体内免疫功能调节紊乱引起,患者体内产生的自身抗体和(或)补体吸附于红细胞表面,通过抗原抗体反应加速红细胞破坏,最终引起溶血性贫血[1]。AIHA可对患者多种组织器官造成损伤,主要表现为头晕、高热等,积极给予贫血严重者输血治疗,对控制疾病进展、改善患者临床症状至关重要[2]。抗体筛查、血型鉴定、交叉配血为输血治疗的必要环节,但AIHA可增加血型鉴定、抗体筛查和交叉配血难度,已成为输血科面临的棘手问题之一,严重影响需进行输血治疗AIHA患者的输血安全性和治疗效果[3]。本文尝试对我院输血科152例AIHA患者不规则抗体筛查结果进行综合分析,旨在为临床提供参考,报道如下。
1.1 一般资料 选取2018年1月—2020年1月我院收治的152例AIHA患者作为观察对象,其中女68例,男84例;年龄18~60岁,平均年龄(38.94±9.85)岁;体质量指数19.5~27.5 ,平均体质量指数24.73±1.35;病程1~5年,平均病程(3.04±0.85)年。
1.2 选择标准 纳入标准:(1)符合AIHA诊断标准[4];(2)年龄18~60岁;(3)自主行为能力良好;(4)无沟通交流障碍;(5)患者及家属知晓本研究,已签署同意书。排除标准:(1)精神疾病患者;(2)其他类型贫血患者;(3)严重心脑血管疾病患者;(4)肺、肝、肾等脏器严重病变者;(5)伴有其他免疫性疾病者;(6)传染性疾病患者;(7)妊娠期、月经期或哺乳期女性。
1.3 仪器和方法
1.3.1 检测试剂及仪器:不规则抗体检测试剂购自长春博迅生物技术有限责任公司[批准文号:国食药监械(准)字2013第3401839号;规格:每盒有OⅠ、OⅡ、OⅢ红细胞各1瓶,5ml/瓶,浓度4%],全自动血型分析仪购自苏州长光华医生物医学工程有限公司[批准文号:国食药监械(准)字2013第3401314号;规格:SA-80型],抗人球蛋白检测卡购自长春博迅生物技术有限责任公司[批准文号:国食药监械(准)字2010第3400983号;规格:48卡/盒],医用离心机购自上海利鑫坚离心机有限公司[批准文号:沪食药监械(准)字2012第1410199号;规格:H-1600型]。
1.3.2 检测方法:采集所有患者入院当天空腹静脉血5ml,均按1∶9的比例加入109mmol/L的枸橼酸钠,随后置于医用离心机上,以3 500r/min转速、10cm离心半径处理5min,取血浆,置于-20 ℃冷藏室内待检。采用盐水法、微柱凝胶间接抗人球蛋白法进行不规则抗体筛查。采用试管法进行AOB血型鉴定,进行正反定型。采用经典间接抗人球蛋白试验(Indirect antiglobulin test,IAT)、试管LISS-IAT法进行交叉配血。以上操作均由专业人员严格按照相关说明书完成。
1.4 观察指标 (1)统计分析不规则抗体筛查结果。(2)统计分析AOB血型正反定型结果。(3)根据筛查结果进行交叉配血,统计交叉配血结果。
1.5 统计学方法 数据处理采用SPSS22.0软件,计数资料以[n(%)]描述。
2.1 不规则抗体筛查结果 不规则抗体筛查结果显示:温抗体124例,占比81.58%(124/152);冷抗体10例,占比6.58%(10/152);混合型抗体18例,占比11.84%(18/152)。124例温抗体AIHA患者中,有特异性自身抗体者20例,无特异性自身抗体者88例,自身抗体+同种抗体者16例,具体分布情况见表1。10例冷抗体AIHA患者中,有特异性自身抗体者3例,无特异性自身抗体者7例,具体分布情况见表2。18例混合型抗体AIHA患者中,无特异性自身抗体者15例,自身抗体+同种抗体者3例,具体分布情况见表3。
表1 温抗体AIHA患者筛查、鉴定结果[n(%)]
表2 冷抗体AIHA患者筛查、鉴定结果[n(%)]
表3 混合型抗体AIHA患者筛查、鉴定结果[n(%)]
2.2 AOB血型正反定型结果 AOB血型正反定型结果显示,14例温抗体AIHA患者存在正定型干扰,8例冷抗体AIHA患者存在正定型干扰,17例混合型抗体AIHA患者存在正定型干扰;10例冷抗体AIHA患者存在反定型干扰,18例混合型抗体AIHA患者存在反定型干扰。具体分布情况见表4。
表4 AOB血型正反定型结果[n(%)]
2.3 交叉配血结果 温抗体AIHA患者:有特异性自身抗体者采用试管LISS-IAT法进行交叉配血,相合者11例;无特异性自身抗体者采用经典IAT进行交叉配血,相合者40例;自身抗体+同种抗体者采用经典IAT进行交叉配血,全部相合。冷抗体AIHA患者:采用经典IAT进行交叉配血,全部相合。混合型抗体AIHA患者:无特异性自身抗体采用经典IAT进行交叉配血,相合者13例,自身抗体+同种抗体者采用经典IAT进行交叉配血,全部相合。具体结果见表5。
表5 交叉配血结果[n(%)]
AIHA的发病机制尚未明确,已知其与遗传、免疫功能紊乱、红细胞膜蛋白成分异常等因素有关,其治疗重点在于对原发病的控制,一般情况下无须输血治疗,但对于贫血严重而危及生命者,不得不给予输血治疗,部分患者甚至需要反复输血[5-6]。临床大量研究[7-8]指出,AIHA自身抗体包括温抗体、冷抗体及混合型抗体,此类抗体的存在可凝集自身红细胞,且会对输血红细胞产生凝集作用,同时会干扰AIHA患者的输血前鉴定试验。
本文通过不规则抗体筛查发现,AIHA患者中温抗体占比最高,为81.58%,其次为混合型抗体、冷抗体。与国内多项文献报道[9-10]结果一致。提示大多数AIHA患者的自身抗体在35~40 ℃与红细胞发生反应。本文结果发现,AIHA患者主要为无特异性自身抗体,温抗体AIHA患者中有特异性自身抗体占16.13%,自身抗体+同种抗体占12.90%,冷抗体AIHA患者有特异性自身抗体占30.00%,混合型抗体AIHA患者中自身抗体+同种抗体占比16.67%。提示AIHA患者抗体类型复杂多样,筛查难度较高。AOB血型正反定型结果显示,39例患者存在AOB血型正定型干扰,温抗体、冷抗体、混合型抗体患者均有分布,28例患者存在AOB血型反定型干扰,其中冷抗体患者10例,混合型抗体患者18例。提示温抗体一般不会干扰AOB血型反定型,部分患者可能对AOB血型正定型产生干扰,将试管法改为血型卡后干扰现象消失。冷抗体对AOB血型正反定型均存在一定干扰,采用温盐水洗涤可避免正定型干扰,通过37 ℃孵育及自身红细胞吸收后再做反定型可减少干扰。交叉配血是输血治疗前最关键的环节[11]。本文124例温抗体中有特异性自身抗体者采用试管LISS-IAT法交叉配血,相合率最大,为55.00%,无特异性自身抗体采用经典IAT交叉配血相合率为45.45%,而自身抗体+同种抗体采用经典IAT交叉配血全部相合。因此温抗体AIHA患者交叉配血可采取经典IAT或试管LISS-IAT法,具有较高成功率。10例冷抗体患者采用经典IAT交叉配血全部相合,18例混合型抗体中无特异性自身抗体采用经典IAT交叉配血相合率为86.67%,自身抗体+同种抗体采用经典IAT交叉配血全部相合,与鲍瑞玲等[12]研究结果一致。提示对于冷抗体、混合型抗体AIHA患者,应首选经典IAT进行交叉配血。
综上可知,AIHA患者不规则抗体筛查结果主要为温抗体,少数患者为冷抗体或混合型抗体,上述抗体的存在可影响血型鉴定、交叉配血结果,临床应给予高度重视,需根据筛查结果合理选择交叉配血方案,以提高需输血治疗AIHA患者的输血安全性。