苦柏坐浴颗粒药效学研究

赵小梅 杨志军 袁文珺

痔疮是常见的肛肠科疾病,在成人中的发病率约为58.4%,占肛肠疾病的87.2 %［1］。临床主要表现为肛周附近皮肤红肿、疼痛、灼热、有异物感并且坐立不安等症状。由于当今不健康生活方式的影响,痔疮病患人数日益增多［2］。中药熏蒸及坐浴是中医治疗痔疮的一种外治方法,使药物透过皮肤吸收,直接作用于患病部位,亦可改善创面局部血液循环,抑制局部炎症、促进水肿吸收,松弛紧张的括约肌,增加创面营养,减轻疼痛出血,加速促进新生肉芽组织生长,从而减轻患者痛苦,加快伤口愈合速度,与西药相比具有更为理想的效果。中医治疗痔疮的非手术疗法有着西医无可比拟的优势、丰富的经验及显著的疗效。苦柏坐浴颗粒由苦参、黄柏等十一味药物组成,具有清热燥湿、消肿止痛、凉血止血的功效。主要用于湿热之毒壅遏大肠之混合痔、内痔、外痔、肛瘘、便血及肛周疾病术后。处方来源于本院肛肠科的协定方,因其临床疗效确切,在医院临床得到了广泛使用。处方一直以汤剂的形式应用于临床,为方便患者使用,将其开发为苦柏坐浴颗粒剂［3］,属于外用洗剂的范畴。为进一步验证苦柏坐浴颗粒的药效学机制,本研究通过建立各种药效作用模型［4］,探讨苦柏坐浴颗粒在抗炎、消肿及促进溃疡面愈合等方面的作用［5］,现将实验结果报告如下。

1 材料与仪器

1.1 实验动物 昆明种小鼠36 只,6～8周龄,雌雄各半,体重22～25 g；SD 大鼠72 只,雌雄各半,体重180～220 g,实验动物购自于甘肃中医药大学实验动物中心,动物合格证号：SCXK(甘)2015-0002。

1.2 药品与材料

1.2.1 药品 苦柏坐浴颗粒(批号20190802)由兰州市肺科医院制剂室提供。称取苦柏坐浴颗粒20 g,研磨过80 目筛后与凡士林80 g 混合作为苦柏坐浴颗粒药膏,浓度为0.2 g/g,即人临床用量的10 倍,备用。马应龙麝香痔疮膏(武汉马应龙药业集团有限公司,批号2090720)。

1.2.2 试剂 二甲苯(天津市大茂化学试剂厂,批号20181006)；冰醋酸(天津市百世化工化工有限公司,批号20140718)；乙醚(天津市化学试剂二厂,批号880308)

1.2.3 仪器 胶塞打孔器,BS110S 电子天平(万分之一)德国赛多利斯公司。

2 方法

2.1 小鼠耳肿胀实验 取昆明种小鼠36 只,雌雄各半,随机分为空白对照组、马应龙麝香痔疮膏组、苦柏坐浴颗粒组,每组12 只。空白对照组在小鼠两耳廓涂凡士林,马应龙麝香痔疮膏组、苦柏坐浴颗粒组小鼠分别在两耳廓涂试马应龙麝香痔疮膏、苦柏坐浴颗粒药膏,1 h 后擦掉试药,用微量进样器于小鼠右耳涂布二甲苯0.02 m/只,使致炎,30 min 后再涂试药1 次,3 h 后处死(颈椎脱臼法),沿耳廓基线剪下双耳,用打孔器(直径8 mm)取下两耳同一部位同等面积耳片,并称重。肿胀度=(右耳片质量-左耳片质量)/左耳片质量×100%。

2.2 大鼠肛周肿胀实验［6］取SD 大鼠36 只,雌雄各半,用脱毛剂脱去(10%硫化钠)大鼠肛周毛,脱毛面积约为2.0 cm×2.0 cm。将棉签放进0.16 ml 巴豆油混合液(蒸馏水、乙醚、吡啶和6%巴豆油按1∶5∶4∶10的比例混合)中浸吸5 min。取浸润好的棉签插入到大鼠肛门内15 s,观察肿胀情况。造模成功后,随机分为模型对照组、马应龙麝香痔疮膏组、苦柏坐浴颗粒组,每组12 只。模型组肛门肿胀处涂0.5% CMC-Na 溶液。各给药组于6、12、24、48、72 h 将试药涂于肛门肿胀处,给药体积为2.0 g,每次给药后30 min,用圆规测定肛门周围组织肿胀的(纵、横)直径,取其纵横直径的均值的乘积(即肿胀面积),作为测定肿胀程度的指标。

2.3 大鼠肛周溃疡面愈合实验［7］取SD 大鼠36 只,在其肛门外周注射冰醋酸0.05 ml/只,致溃疡,随机分为模型对照组、马应龙麝香痔疮膏组、苦柏坐浴颗粒组,每组12 只。临床给药时为直接熏蒸坐浴,因此本次溃疡面愈合实验仅设用高浓度组。模型对照组均匀涂凡士林基质1.0 g,马应龙麝香痔疮膏组、苦柏坐浴颗粒组给予溃疡面均匀涂试药1.0 g 次,3 次/d,观察溃疡面红肿、组织炎性渗出及溃疡面的愈合时间(以伤口结痴脱落为痊愈)。溃疡程度评定标准：有溃疡渗出液1分,有少量溃疡渗出液2 分,有结痂、基本愈合3 分,完全愈合4 分。

2.4 统计学方法 采用SPSS18.0 统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差()表示,采用t检验。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

3 结果

3.1 小鼠耳肿胀实验结果 马应龙麝香痔疮膏组、苦柏坐浴颗粒组肿胀度均低于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。苦柏坐浴颗粒组与马应龙麝香痔疮膏组肿胀度比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。见表l。

表1 三组小鼠耳肿胀情况比较()

表1 三组小鼠耳肿胀情况比较()

注：与空白对照组比较,aP＜0.05

3.2 大鼠肛周肿胀实验结果 给药6、12、24、48、72 h,马应龙麝香痔疮膏组和苦柏坐浴颗粒组大鼠肛周肿胀面积均小于模型对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 三组不同给药时间肛周肿胀面积比较(,cm2)

表2 三组不同给药时间肛周肿胀面积比较(,cm2)

注：与模型对照组比较,aP＜0.05

3.3 大鼠肛周溃疡面愈合实验结果 致溃疡后第6、8、10 天,苦柏坐浴颗粒组溃疡程度评分均大于模型对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05)。致溃疡后第8、10 天,马应龙麝香痔疮膏组溃疡程度评分均大于模型对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表3 三组不同时间的溃疡程度评分比较(,分)

表3 三组不同时间的溃疡程度评分比较(,分)

注：与模型对照组比较,aP＜0.05

4 讨论

现代医学认为,痔疮病的治疗目的不是消除痔疮体本身,而是消除其症状。随着西医对这一新概念的认识,非手术疗法在痔疮治疗中逐渐占主导地位。因此国内外肛肠病学界倡导痔病应尽量采用非手术治疗,有利于保护肛门周边更多的正常组织。

传统中医认为脏腑本虚、气血亏损是痔疮的发病基础,而情志内伤、长期便秘、劳倦过度、饮食不节、妇女妊娠等为外部诱因,使脏腑阴阳失调,气血运行不畅,燥热内生,经络受阻,热与血相搏,经脉交错,气血纵横,结滞不散而成［8］。因此痔疮治疗,主要是针对引起该病的风、热、湿、燥等病因进行清热凉血、利湿解毒、益气活血等办法。中药熏洗法是中医将药物煎汤,趁热将患处熏蒸、淋洗,以此借助药力和热力,通过皮肤、黏膜作用于机体,促使腠理疏通、气血流畅、脉络调和,以达到疏通腠理、清热解毒、祛风除湿、杀虫止痒目的。

苦柏坐浴颗粒原组方由十一味药物组成,其中苦参清热燥湿,去下焦湿热［9］；黄柏清热燥湿,泻火解毒［10］；苍术燥湿健脾,三药合用,祛湿之功加倍,共为君药。五倍子收敛止血、解毒；地榆凉血止血,清热敛痔；槐花凉血止血、清肝泻火,三药共为臣药,辅助君药清热之功。君臣共用,在化湿清热的同时又兼有凉血止血之效。佐以当归、黄芪益气养血,赤芍、白芷、元胡消肿止痛。在临床使用当中,显示其具有明显的止血、消肿、止痛促进溃疡面愈合等作用,但由于本方为外用熏洗方,小鼠、大鼠等口服给药剂量相对较大,且违背了该方的给药途径。小鼠耳肿胀实验结果表明,马应龙麝香痔疮膏组、苦柏坐浴颗粒组肿胀度均低于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。苦柏坐浴颗粒组与马应龙麝香痔疮膏组肿胀度比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。给药6、12、24、48、72 h,马应龙麝香痔疮膏组和苦柏坐浴颗粒组大鼠肛周肿胀程度均小于模型对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。大鼠肛周溃疡面愈合实验结果显示,致溃疡后第6、8、10 天,苦柏坐浴颗粒组溃疡程度评分均大于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05)。总的来说,本实验采用现代药理研究方法,且给药方法及途径均与临床应用相一致,用于评价苦柏坐浴颗粒的疗效更为确切,证实了苦柏坐浴颗粒治疗痔疮是一种优良的外用药。

现市面应用于混合痔、内痔、外痔、肛瘘、便血的中药制剂种类较多,口服的有地榆槐角丸、痔根断等,外用的有肛泰、化痔栓、马应龙痔疮膏。但由于痔疮位置偏下,口服药物一般疗程长起效较慢,不能及时缓解痔疮引起的疼痛和出血症状。而外用栓剂和膏剂容易沾染衣物,且在使用时会伴有不适感。洗剂则可直达患部,可较快缓解痔疮引起的红肿热痛,对肛周的创面起到消炎作用,还能改善便血情况。本研究表明苦柏坐浴颗粒具有明显的抗炎、消肿、促进溃疡面愈合的作用,将为苦柏坐浴颗粒在治疗痔疮的临床应用提供药效学基础。

综上所述,苦柏坐浴颗粒具有抗炎、消肿、促进溃疡面愈合的作用,值得在临床推广应用。