温敏型盐酸达克罗宁胶液的制备及质量评价

司佩茹，周红建，杨显伟，莫 菲，姚俊营，张继业，李俊霞

（1.西安交通大学药学院，陕西 西安 710061；2.遂成药业股份有限公司，河南 新郑 451150）

盐酸达克罗宁，化学名为4-丁氧基-3-哌啶基苯丙酮盐酸盐。美国药典第35 版已收录本品，且该药在我国临床上已使用多年，尤其是盐酸达克罗宁胶浆（商品名达己苏）产品，内窥镜插管操作中能够减轻检查患者的不适感[1-4]。但在临床应用中偶见轻度头痛、焦虑、冷热感觉、麻木等不良反应，如儿童、老人用药过量，偶会发生惊厥。研究表明[5]，涂抹达克罗宁胶浆可有效缓解全麻患者气管镜术后咽喉部疼痛，降低拔管不良反应发生率。利多卡因为局部麻醉药，随着剂量加大，麻醉作用或毒性增强。其胶浆剂常用于内窥镜检查，因此有学者研究盐酸达克罗宁胶浆和利多卡因胶浆局部麻醉效果。Sha J 等[6]比较了柔性纤维喉镜检查中盐酸达克罗宁胶浆和盐酸利多卡因胶浆的效果，该随机对照试验结果表明盐酸达克罗宁胶浆更有效。可能的原因为盐酸达克罗宁在喉部黏膜有持续的作用时间，胶浆中的羧甲基纤维素钠增大了黏度，延长了作用时间。但是相比于在一定温度下温敏型凝胶来说胶浆流动性较高，口服后停留时间较短，且难以覆盖整个腔道内表面，致使麻醉效果降低。为保障良好的临床应用效果，需要相对较高的给药剂量，增加了产生不良反应的可能性[7，8]，同时盐酸达克罗宁具有苦味，较高剂量会使患者产生不适感。温敏型凝胶[9-11]是指在室温下为流动性良好的液体，而当温度升至体温附近时，能够迅速转变为凝胶状态的一类制剂。根据目前临床应用的特点，将盐酸达克罗宁制备成温敏型凝胶产品，利用食管内壁与外界温度的显著差异，能够在同等给药剂量下，增加盐酸达克罗宁的滞留时间，由于流动性减弱，相同给药体积下，凝胶在食管壁的覆盖面积也会相应增加。因此在同等体积和同等给药剂量下，能够显著提高局部麻醉的效果，进而提高患者顺应性。因此，温敏型盐酸达克罗宁凝胶的研发，可有效的提高患者术前准备效率，可以缓解临床消化道内窥镜检查对患者带来的刺激和不适感。本研究主要制备了一种温敏型盐酸达克罗宁胶液，分析其性质并应用所建立的分析方法对其进行质量评价和稳定性研究，现报道如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器 Alliance HPLC 高效液相色谱系统（美国Waters 公司）；NDJ-9T 数字旋转粘度计（上海方瑞仪器有限公司）；Thermo Scientific 加热磁力搅拌器（赛默飞世尔科技中国有限公司）；梅特勒-托利多Five Easy Plus pH 计（梅特勒-托利多上海仪器有限公司）；PL1502E 电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；ATX124 分析天平（日本岛津公司）；DF-101S 集热式恒温加热器（郑州科丰仪器设备有限公司）；BIO-DL 移液器（Genex Beta 宝予德中国有限公司）；LHH-150GSP 药品稳定性试验箱（上海一恒科学仪器有限公司）；0.45 μm 过滤器，天津市科亿隆实验设备有限公司。

1.2 材料 盐酸达克罗宁对照品（100423-201102），中国食品药品检定研究院；盐酸达克罗宁原料药，河南精康制药有限公司；达己苏-盐酸达克罗宁胶浆，扬子江药业集团有限公司；泊洛沙姆407，泊洛沙姆188，巴斯夫（中国）有限公司；苯甲酸钠，上海迈瑞尔化学技术有限公司；乙腈、甲酸，色谱级，科密欧化学试剂有限公司；其余试剂均为分析纯。

2 方法

2.1 温敏型盐酸达克罗宁胶液的制备

2.1.1 处方 盐酸达克罗宁10.0 g，泊洛沙姆188 5.0 g，泊洛沙姆407 25.0 g，苯甲酸钠0.1 g，纯化水加至1000 ml。

2.1.2 制备工艺 称取10.0 g 盐酸达克罗宁原料药，溶于400 ml 纯化水中，得盐酸达克罗宁溶液；另取400 ml 纯化水慢慢加入精密称定好的5.0 g 泊洛沙姆188 25.0 g 泊洛沙姆407，置于4 ℃冰箱待溶胀完全后取出至环境温度，再与盐酸达克罗宁溶液混合均匀，加入0.1 g 苯甲酸钠，加纯化水至1000 ml，搅拌均匀即得。

2.2 含量测定方法[12-14]

2.2.1 溶液制备 对照品溶液：精密称取盐酸达克罗宁对照品10.0 mg，置于10 ml 容量瓶中，0.01 mol/L盐酸溶解，混匀后用0.45 μm 过滤器过滤，续滤液即为1.0 mg/ml 的对照品储备液。供试品溶液：精密称取温敏型盐酸达克罗宁胶液1.0 g，置于100 ml 容量瓶中，流动相稀释至刻度，混匀后用0.45 μm 过滤器过滤，取续滤液作为供试品溶液。阳性对照溶液：精密称取盐酸达克罗宁胶浆1.0 g，置于100 ml 容量瓶中，流动相稀释至刻度，混匀后用0.45 μm 过滤器过滤，取续滤液作为阳性对照溶液。阴性对照溶液：配制不含主药的泊洛沙姆188-泊洛沙姆407 空白胶液，按上述供试品溶液配制方法操作，得阴性对照溶液。

2.2.2 色谱条件 Waters Alliance 2695 高效液相色谱系统配备四元梯度泵、自动进样器、柱温箱及二极管阵列检测器；Titank Hilic 亲水色谱柱（5 μm，250 mm×4.6 mm）；流动相：乙腈-1‰ 甲酸溶液=50∶50（V∶V）；流速：1.0 ml/min；柱温：25 ℃；检测波长：282 nm；进样量：20 μl。

2.2.3 专属性试验 将对照品溶液、供试品溶液、阳性对照溶液、阴性对照溶液分别进样测定，观察阴性对照溶液在盐酸达克罗宁色谱峰附近有无杂质峰干扰。

2.2.4 线性范围 精密量取对照品储备液，分别稀释至浓度为10、30、60、90、120、150 μg/ml 的溶液，按2.2.2 项下色谱条件分析，以峰面积（y）对进样浓度（x）进行回归。

2.2.5 精密度及准确度试验 分别配制低（80 μg/ml）、中（100 μg/ml）、高（120 μg/ml）3 个浓度的对照品溶液，每个浓度在同一天内连续进样5 次，测定日内精密度；每个浓度分别于1、2、3、4、5、6 d 各进样5 次进行测定，测定日间精密度。

2.2.6 回收率试验 精密量取不含主药的泊洛沙姆188-泊洛沙姆407 空白胶液1.0 g 于100 ml 容量瓶中，分别加入已知量的盐酸达克罗宁对照品溶液，加流动相至刻度，得低（80 μg/ml）、中（100 μg/ml）、高（120 μg/ml）3 个浓度，每个浓度测定3 次。

2.3 稳定性评价 放置在温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%的药品稳定性试验箱下，试验前取样1 次，在试验期间第1、2、3、6 个月末各取样1 次，考察指标分别为外观、胶凝温度、黏度、pH 值及含量，评价其稳定性。

2.3.1 外观 黑色背景下观察凝胶状态、色泽、光泽度，无色透明为正常状态。

2.3.2 胶凝温度测定 采用倒置法。将温敏型盐酸达克罗宁胶液加入西林瓶，插入温度传感器，然后置于25.0 ℃恒温水浴锅，再以每隔0.5～1.0 ℃/min 上升，每隔1 ℃后恒温2 min，将西林瓶倒置，观察凝胶5 s内是否流动；若流动，继续升温，至液面流动缓慢后每隔0.1 ℃后恒温2 min，继续倒置，直至不再流动，若5 s 内不再流动，此时温度即为胶凝温度。每组平行测定3 次。

2.3.3 黏度测定 25 ℃时选用2 号转子，转速100 rpm，动力黏度应不大于200 mPa·s；35 ℃时选用4 号转子，转速50 rpm，动力黏度应不小于70 Pa·s。

2.3.4 pH 值测定 取凝胶样品1.0 g，加纯化水10 ml稀释后测定，pH 值应在4.5～6.5。

3 结果

3.1 含量测定方法学验证

3.1.1 专属性 盐酸达克罗宁在确定的色谱条件下峰型良好，基质对盐酸达克罗宁样品测定没有干扰，此方法专属性良好，见图1。

图1 高效液相色谱图

3.1.2 标准曲线 回归方程为：y=33595 x-12228，相关系数：r=0.9999(n=3)，结果表明盐酸达克罗宁在10～150 μg/ml 浓度范围内，浓度（x）与峰面积（y）呈现良好的线性关系，可依此进行质量测定。

3.1.3 精密度及准确度试验 3 个浓度的质控样品精密度及准确度试验结果见表1，测得盐酸达克罗宁实际浓度与理论浓度偏差以及相对标准偏差皆满足要求，说明本方法精密度及准确度良好，满足测定要求。

表1 精密度及准确度测定结果（n=5）

3.1.4 回收率试验 回收率试验结果见表2 所示，温敏型盐酸达克罗宁胶液样品处理方法回收率满足测定要求。

3.1.5 样品含量测定 温敏型盐酸达克罗宁胶液样品测得的平均含量为9.93 mg/ml，RSD=1.39%（n=6）。

3.2 稳定性评价 试验前、试验第1、2、3 及第6 个月末取得的样品考察项目：外观、胶凝温度、黏度、pH值及含量见表3。结果表明，温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%的条件下，6 个月内温敏型盐酸达克罗宁胶液外观及含量稳定，胶凝温度、黏度、pH 值稍有变化但都在要求范围内。

4 讨论

盐酸达克罗宁是一种起效快、毒性小的常用的局部麻醉药，能阻断各种神经冲动或刺激的传导，抑制触觉和痛觉。其毒性较利多卡因低，局部麻醉作用迅速且较持久，对皮肤、黏膜穿透力强，主要应用于黏膜麻醉和皮肤麻醉，具有止痛、止痒、杀菌的作用。但是有刺激性，不宜作注射麻醉和浸润麻醉用，只供外用，仅有几种传统的外用制剂（如洗剂、乳膏剂等）和口含制剂（如膜剂、口服乳剂、胶浆剂等），多用于临床上消化道内镜和纤维支气管镜检查时黏膜表面麻醉及气管插管操作时涂抹气管导管即喉镜、气管镜、胃肠镜等检查前的准备，也用于局部止痛止痒、烧伤、溃疡、褥疮等。

盐酸达克罗宁经典的含量测定方法有银量法、中和法。但是随着制剂技术的不断发展，制剂处方中辅料等成分也越来越复杂，用上述方法已无法排除制剂中其余成分对达克罗宁含量测定的干扰，且其操作不便、耗时、可重复性较差，所以新的检测手段应运而生，如紫外分光光度法、高效液相色谱法，尤其是HPLC 法，该方法操作简便快速、准确度高、灵敏度高、选择性高等特点，且改变流动相极性使样品各组分在最佳条件下能够分离，可满足盐酸达克罗宁制剂质量控制的要求。

本研究制备了温敏型盐酸达克罗宁胶液，建立了高相液相色谱法，该法操作简便、精密度及准确度高，可进行温敏型盐酸达克罗宁胶液质量控制和稳定性研究。稳定性加速试验证明，温敏盐酸达克罗宁凝胶外观性状没有发生变化，主药含量无明显变化、pH 保持在要求范围内，并且温敏特性也并未发生明显改变，证明了其质量稳定性，具有成为临床用药的特性。

使用泊洛沙姆188 和泊洛沙姆407[15]作为胶液基质安全性好，制成的盐酸达克罗宁温敏胶液比胶浆等制剂在腔道内表面保留时间更长，局部浓度高，麻醉效果明显。在制备凝胶基质时，应将泊洛沙姆188 和泊洛沙姆407 均匀撒在水面，置于4 ℃冰箱使其充分溶胀后搅拌，防止产生不溶性胶团。使用苯甲酸钠为抑菌剂，成本较低，相同抑菌效果下成本低于山梨酸钾；其次用量少，因此对人体毒副作用大幅降低；再者其抑菌范围广，且随着酸度的增高其杀菌、抑菌效力增强，综合考虑其更适合用于温敏盐酸达克罗宁胶液。盐酸达克罗宁碱性条件下不稳定，在配制供试品溶液时，溶解及稀释应在弱酸性环境中进行。

本研究制备的温敏型盐酸达克罗宁胶液处方可进一步优化，加入黏度调节剂如羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素改善黏度增加盐酸达克罗宁在腔道内的滞留时间以提高麻醉效果，加入医用消泡剂如聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚去除腔道内泡沫使得腔道检查更加清晰，加入矫味剂如阿司帕坦、甜菊苷等改善口感提高患者顺应性，加入助溶剂如聚山梨酯-80（乙醇在制剂中长期放置易于挥发）更好的增加盐酸达克罗宁的溶解度。

综上所述，本制剂制备工艺简单、所采用的辅料生物相容性良好，用于上消化道内窥镜检查时的喉头麻醉和润滑，在同等给药体积条件下，滞留时间和覆盖面积比大幅增加，具有药效发挥快、麻醉效果强等特点，能提高患者的依从性，有望成为新型局部麻醉制剂。