甘肃省天水市生猪屠宰企业非洲猪瘟检测能力提升措施

李小珍，马 萍，王美菊，庾珍珍，宋凤梅

（1.天水市秦州区动物疫病预防控制中心，甘肃天水 741000；2.天水市动物疫病预防控制中心，甘肃天水 741000）

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的一种家猪和野猪烈性传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为须通报动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。自2018年8月我国首次发现ASF疫情以来，农业农村部高度重视，积极应对，采取了一系列防控措施使疫情得到有效控制。但由于病毒已在我国定殖并形成较大污染面，疫情发生风险依然较高[1]。屠宰环节作为连接生猪产销的关键环节，是ASF防控的重中之重。2019年1月，农业农村部发布第119号公告，要求所有屠宰企业尽快建立ASFV自检体系。这对疫情防控起到了至关重要的作用。本文对甘肃省天水市生猪屠宰企业ASFV自检体系建立情况和提升自检能力措施进行了全面调研和总结，以期为其他地区生猪屠宰企业提升ASFV检测能力提供参考。

1 ASFV自检体系建设情况

天水市共有生猪屠宰企业4家（分别称为A—D），其中年设计产能10万头以下的1家，10万头以上的3家，实际年屠宰量都在5万头左右。根据农业农村部第119号公告要求，2019年4家屠宰企业均在第一时间建立了ASFV检测实验室。

1.1 实验室物资配备

4个ASFV检测实验室都配备了基本检测仪器，包括PCR仪、离心机、冰柜（冰箱）、储物柜、垃圾桶各1个（台），普通垃圾和生物废弃物没有区分对待；只有1家屠宰企业配备高压锅和水浴锅各1个，其他3家企业均无高温高压消毒和加热设备；只有1家屠宰企业对实验室进行了分区，其他3家企业均未进行分区，实验室也只有1间，既进行配液又开展PCR扩增，容易造成核酸污染。具体情况见表1。

表1 2019 年天水市屠宰企业ASFV 检测实验室建设情况

1.2 实验室人员配备

4家屠宰企业ASFV检测实验室各配有工作人员1名，但都是非专职人员，采样和检测均由该人员承担。4名工作人员中，大专以上学历2人，其中1人为兽医专业，1人为财会专业，而其他2人为初中文化水平，且年龄偏大，均在40岁以上。调研发现，4家企业检测人员检测能力较低，检测程序不规范、留样混乱、档案记录不全、生物安全防控措施落实不到位。实验室人员配备具体情况见表2。

表2 2019 年天水市屠宰企业ASFV 检测实验室人员配备情况 单位：个

1.3 ASFV自检

4家屠宰企业日屠宰量均为100头左右。自2019年7月1日起，都实现了ASFV自检，达到了“批批检，全覆盖”要求，但检测结果可信度不高。调研发现，4家屠宰企业检测人员素质参差不齐，都没有经过相关专业知识系统培训，上岗前仅由仪器厂商在装机时进行了操作指导，缺乏基本认知，检测结果判断准确度不高。

1.4 检测样品无害化处理

4个实验室中，只有A企业在处理废吸头、扩增产物和其他试验废弃物时，用84消毒液简单处理后集中装入密封塑料袋并送至焚烧炉焚烧处理。其他3家企业生物安全意识淡薄，试验过程中不注重个人防护，使用过的废弃吸头等未用20% 84消毒液浸泡处理，而是随手扔进垃圾桶，生物安全措施不到位。

1.5 实验室制度建设

调研发现，4家屠宰企业实验室制度建设不健全。其中，A企业实验室制度包括实验室检测操作规程、人员管理制度、生物安全管理制度、样品采集及保存制度，C企业实验室制度包括实验室人员管理制度、生物安全管理制度、仪器设备管理制度，B、D企业实验室制度包括人员管理制度、生物安全管理制度、废弃物及污染物处理制度。4家企业实验室都缺乏检测记录、卫生清洁等制度。

2 存在问题

2.1 实验室硬件配备不足

4家企业中，仅有1家ASFV检测实验室试剂准备区、样品制备区和扩增区相对独立，但试剂准备区和样品制备区存在套间现象，未形成有效隔离。其他3家企业检测实验室仅有1间，没有实行分区管理，容易造成污染，在生物安全柜、微量移液器、离心机、可移动紫外灯、垃圾桶等设备配置方面也均不充足。

2.2 检测人员数量和能力不够

4家企业对ASFV检测实验室均未开展资质认定和强制考核，有的屠宰场检测实验室建好后，配备了仪器、设备，但因聘用工作人员对检测知识和程序等缺乏熟练掌握，加之所有检测实验室均只有1名兼职工作人员，包括采样、样品制备、检测、出具检测报告等均由1人完成，程序多、任务量大，监督机制没有形成，工作上容易造成疏漏。

2.3 检测能力和检测水平不高

ASFV检测为特种检测，要求检测人员既要熟练掌握检测设备性能，又要全面掌握相关检测项目的政策规定和要求，如果检测人员对设备及检测原理不熟悉，混样不科学，检测过程不规范，极易导致检测工作出现偏差。2020年初天水市动物疫病预防控制中心组织各屠宰企业检测实验室进行盲样检测比对，曾出现比对结果和标准结果不能完全吻合现象。

2.4 生物安全防控不全面

调研发现，4家屠宰企业ASFV检测实验室墙面、台面均达不到耐腐蚀、易清洁、易消毒的标准，实验室废弃物处置不及时、不规范，固液不分，生物垃圾和普通垃圾混放。

2.5 驻场官方兽医监督不力

由于驻场官方兽医人员配备不足，无法实现全流程监控，还有一些官方兽医缺乏对实验室检测技术的认知，监督流于形式。

3 提升措施及效果

3.1 优化实验室配置

根据各屠宰企业实际情况，针对ASFV检测实验室存在的不同问题及时进行了整改。一是通过宣传，强化企业领导对ASFV自检的认知和主体责任意识。二是指导企业对存在问题按规定进行整改，各增设了1个采样岗位；将不符合选址规定的C、D屠宰企业检测实验室迁至生产区外；指导4个屠宰企业分别增设样品处理间（有条件的企业增建，没条件的企业将1间隔离成2间），将操作台改造成防滑、耐热耐腐蚀、易于清洗和操作的台面；实验室入口处加设明显的生物安全标识；帮助企业建立健全实验室人员管理、生物安全管理、仪器设备管理、试剂管理、废弃物及污染物处理等制度。通过优化配置，实验室设施设备得到明显改善。具体见表3。

表3 2020 年天水市屠宰企业ASFV 检测实验室硬件改造前后情况

3.2 优化检测人员队伍

通过一年多的优化，检测人员素质不断提升。各屠宰企业通过招聘和引进人才，增设专职采样或检测人员，壮大了检测队伍，提升了专业化程度。2020年各ASFV检测实验室人员队伍情况详见表4。

表4 2020 年天水市屠宰企业ASFV 检测实验室人员情况 单位：个

3.3 加强检测人员培训

组织专业技术人员对各屠宰企业ASFV检测实验室人员定期开展培训，共举办ASFV检测专题培训班5场次，到场指导52次。通过培训和现场指导，切实提升了检测人员业务水平和综合素质，提高了法律法规意识，规范了操作流程，强化了操作技能，解决了企业检测过程中因操作错误造成的结果不准确问题。

3.4 强化生物安全防护

正确使用检测仪器和设备是确保结果准确的关键因素。生物安全柜、离心机和核酸提取仪操作不当，会形成气溶胶，导致样品之间发生交叉污染。因此每次试验结束后需用消毒液擦拭工作台面以及仪器设备等，并用紫外灯照射整个试验区域不少于30 min。实验室一旦发生交叉污染就要尽快通风，同时用1%～2%的84消毒液进行处理，让机体或腔体中的气溶胶成分充分降解，避免污染不断扩大[2]。由于企业自检人员本身文化程度不高，操作过程中出现问题得不到及时发现和处理，造成检测结果易出现错误。理论培训和现场指导全面提升了采样员和检测人员的理论和技术水平，避免了因仪器使用不当出现失误。

4 有关思考

屠宰环节在生猪养殖和肉品销售过程中起着承上启下作用，也是疫病传播的关键风险点，因此建设屠宰企业ASFV检测实验室显得尤为重要。天水市4家生猪屠宰企业自2019年7月1日起，均实现了ASFV自检，达到了“批批检，全覆盖”要求。2020年，4家企业采样基数为10.76万头，共检测2 000多批次，采集生猪混合血液样品0.9万份，自检比例为8.36%，高于农业农村部规定的最低要求（5%），基本实现了养殖环节、屠宰环节和流通环节全过程溯源。但是，4家企业都属于半自动化生产的中小型企业，实力较弱，加之受疫情影响，屠宰量减少，盈利水平下降，致使检测成本不断增高；且由于企业缺乏主体责任意识，主动检测意识不强，如果监管不到位，就容易出现对软硬件投入不足和建设不到位现象。因此，建议各相关部门要进一步提高认识，理顺关系，切实做好屠宰监管，定期或不定期到屠宰企业对ASFV自检能力进行检查和督导，强化企业对ASFV检测重视程度，不断完善实验室管理和生物安全制度，定期清理留样和试验废弃物，规范检测、消毒等相关记录，督查试验试剂、仪器设备有无损坏、试剂盒是否有过期现象。一旦发现问题，及时提出整改意见，对整改不力或逾期整改不到位的，可下发《责令整改通知书》或责令停产，以促使屠宰企业ASFV检测实验室能力提升。