不同杀菌剂对柑橘果实采后炭疽病菌室内毒力测定

张亚男，王印宝，陈 秀，罗震宇，向妙莲，陈 明

不同杀菌剂对柑橘果实采后炭疽病菌室内毒力测定

张亚男，王印宝，陈 秀，罗震宇，向妙莲，陈 明*

（江西农业大学 农学院/江西省果蔬采后处理关键技术与质量安全协同创新中心/江西省果蔬保鲜与无损检测重点实验室，江西 南昌 330045）

【目的】为筛选出防治柑橘炭疽病的有效药剂。【方法】采用菌丝生长速率法测定了9种杀菌剂对柑橘炭疽病菌（）的毒力作用。【结果】25%吡唑醚菌酯、95%肟菌酯、96%戊唑醇、95%苯醚甲环唑、40%双胍三辛烷基、75%百菌清、75%肟菌酯戊唑醇、80%代森锰锌和70%甲基硫菌灵的EC50分别为0.258 1，0.542 7，0.849 2，0.917 4，1.572 1，3.736 2，4.009 8，5.761 6，17.041 7 mg/L。【结论】供试9种杀菌剂对均有一定的抑菌作用，其中25%吡唑醚菌酯毒力最强，70%甲基硫菌灵的毒力最弱。

柑橘炭疽病菌；毒力测定；杀菌剂

【研究意义】由引起的柑橘炭疽病是柑橘产区普遍发生的一种真菌性病害，该病发生快蔓延广，给柑橘生产造成巨大经济损失[1-2]。【前人研究进展】可使柑橘在生长季节中整个植株叶片卷曲脱落、枝梢坏死干枯、花柱发褐腐烂，果柄形成“枯蒂”、果实腐烂干缩[3-5]，或使果实腰部呈现圆形或近圆形褐色病斑凹陷，病斑革质或硬化，同时病斑上还分布着大量黑色或朱红色点状分生孢子盘及由其分泌的分生孢子，严重时病斑扩大可致发病果实脱落[5-6]。此外，属于典型潜伏型侵染菌，潜伏在柑橘果实内随采后贮运导致采后腐烂变质，商品价值下降[7-9]。【本研究切入点】化学杀菌剂是目前控制柑橘果实采后炭疽病的主要途径，在生产中主要应用多菌灵和甲基硫菌灵等苯并咪唑类杀菌剂防治该病害[10-12]。但是随着此类杀菌剂的大量重复使用，由其导致病原菌的抗药性等问题越来越严重，急需筛选更多高效低毒的杀菌剂交替使用，避免产生抗药性。【拟解决的关键问题】研究以25%吡唑醚菌酯、95%肟菌酯、96%戊唑醇、95%苯醚甲环唑、40%双胍三辛烷基、75%百菌清、75%肟菌酯戊唑醇、80%代森锰锌和70%甲基硫菌灵等9种杀菌剂为材料，测定其室内毒力作用，以期为柑橘果实采后炭疽病的防治提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 供试病菌

柑橘炭疽病菌（）由江西农业大学农学院植物病理实验室提供，-80 ℃保存，试验前活化待用。

1.2 供试药剂

80%代森锰锌400 g/L WP、70%甲基硫菌灵100 g/L WP、75%百菌清400 g/L WP、25%吡唑醚菌酯250 g/L EC、75%肟菌酯戊唑醇WG、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP、95%苯醚甲环唑WP和40%双胍三辛烷基WP，由江西农业大学农学院植物保护系农药实验室提供。

1.3 供试药剂对病原菌的毒力测定

本试验采用菌丝生长速率法，先将各供试药剂用无菌水配成母液，再用无菌水稀释，配置成7个不同浓度（每个药剂的浓度经预备试验抑制率均在5%～95%）梯度的药液。用取液器分别吸取2 mL药液与6 mL PDA培养基（培养基温度为50 ℃左右），然后在直径为9 cm的培养皿内均匀混合成带药平板培养基，试验同时设置无菌水空白对照。

活化-80 ℃保存的柑橘炭疽病菌株，置25 ℃黑暗环境培养，7 d后用灭菌打孔器取直径为7 mm边缘的菌丝块，分别转移到带药平板培养基上，每处理3次重复，置于25 ℃恒温培养箱。当菌丝培养约培养皿直径2/3时，即可采用十字交叉法测量菌落直径，取其平均值计算出菌丝生长抑制率。菌丝生长抑制率计算公式如下。

菌丝生长抑制率=[1-(处理菌落直径-菌饼直径)/(对照菌落直径-菌饼直径)]×100% （1）

1.4 数据处理

利用SPSS 22.0对数据进行统计分析，应用最小二乘法，建立“质量浓度对数-几率值”的直线方程，其中因变量（）为抑菌率换算而成的几率值，而自变量（）为实验药剂浓度对应的对数值，并分别得出各供试药剂的EC50值和其相关系数2。

2 结果与分析

9种杀菌剂对的室内毒力测定结果见表1。25%吡唑醚菌酯EC对菌丝生长的抑菌活性最高，EC50为0.258 1mg/L，而70%甲基硫菌灵WP对的毒力最弱，其EC50为17.041 7 mg/L。75%百菌清WP、75%肟菌酯戊唑醇WG、80%代森锰锌WP、95%肟菌酯、96%戊唑醇WP、95%苯醚甲环唑WP、40%双胍三辛烷基WP和80%代森锰锌WP对菌丝抑菌活性次之，其EC50分别为0.542 7，0.849 2，0.917 4，1.572 1，3.736 2，4.009 8，5.761 6 mg/L，EC50值在10 mg/L以下，均有较好的抑菌活性。

表1 9种杀菌剂对柑橘炭疽病菌的室内毒力测定

3 结论与讨论

试验采用菌丝生长速率法分析了9种杀菌剂对柑橘炭疽病菌的毒力，结果表明，除70%甲基硫菌灵对的毒力相对较弱，其它8种杀菌剂对柑橘炭疽病菌均具有较好的抑菌效果，其中25%吡唑醚菌酯对菌丝生长的抑菌效果最好，其EC50仅为0.258 1mg/L。吡唑醚菌酯属于甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，该试剂会阻止细胞色素传递，导致线粒体不能生产细胞正常代谢所需的能量，细胞死亡，从而抑制孢子萌发和菌丝生长。大量研究表明，炭疽病菌对不同杀菌剂的敏感性存在显著差异，不同杀菌剂通过一定比例配比也可表现较好的抑菌作用[1,13-14]。王贤达等[1]试验证实，45%咪鲜胺和60%唑醚·代森联对的抑菌效果较好，其EC50值依次为0.05，0.11 μg/mL。而陈怡志等[9]采用25%咪鲜胺微乳剂和25%苯醚甲环唑微乳剂质量比6:4复配剂1 000倍液、2 000倍液、3 000倍液均对柑橘炭疽病表现出较好的防治效果。此外，唑胺菌酯与咪鲜胺以5:1的配比对亦有较好的抑菌作用[14]。

基于本试验室内毒力测定结果，在柑橘果实采后炭疽病防治中，建议优先使用25%吡唑醚菌酯，而95%肟菌酯、96%戊唑醇和95%苯醚甲环唑可作为交替使用杀菌剂。因室内试验和实践环境存在较大差异，上述9种杀菌剂对柑橘果实采后炭疽病的贮藏效果，有待后续试验进一步验证。

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Toxicity Tests of Different Fungicides Againstof Postharvest Citrus Fruits

ZHANG Ya’nan, WANG Yinbao, CHEN Xiu, LUO Zhengyu, XIANG Miaolian, CHEN Ming*

(Collaborative Innovation Center of Postharvest Key Technology and Quality Safety of Fruits and Vegetables of Jiangxi Province/Jiangxi Key Laboratory for Postharvest Technology and Non­destructive Testing of Fruits & Vegetables, School of Agronomy, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China)

[Objectives] The study was conducted to screen effective fungicides to control citrus anthracnose caused by. [Methods] The toxicity tests of 9 fungicides againstwere compared by using the mycelial growth rate method under laboratory conditions. [Results] The results showed that EC50of 25% Pyraclostrobin, 95% Trifloxystrobin, 96% Tebuconazole, 95% Difenoconazole, 40% Biguanide trioctyl, 75% Chlorothalonil, 75% Trifloxystrobin tebuconazole, 80% Mancozeb and 70% Thiophanate methyl were 0.2581 mg/L, 0.5427 mg/L, 0.8492 mg/L, 0.9174 mg/L, 1.5721 mg/L, 3.7362 mg/L, 4.0098 mg/L, 5.7616 mg/L and 17.0417 mg/L, respectively. [Conclusion] All 9 fungicides had certain inhibition effects on, of which 25% Pyraclostrobin had the best one, while 70% Thiophanate methyl had the weakest.

; toxicity test; fungicide

S436.66

A

2095-3704（2021）02-0150-03

2021-03-10

2021-04-15

江西省自然科学基金项目(20192BAB204018)和江西省果蔬采后处理关键技术及质量安全协同创新中心项目(JXGS-03)

张亚男（1993—），女，硕士生，主要从事果实采后生理研究，zyn781246@163.com，*通信作者：陈明，副教授，博士，mingchen@jxau.edu.cn。