李元凤,王亚超,范明东,敖 翔,申小云*,何 健*
(1.西南科技大学生命科学与工程学院,四川绵阳 621000;2.四川铁骑力士集团冯光德实验室,四川绵阳 621000)
鸡蛋是人们的日用食品,但由于胆固醇含量高,消费者对蛋及蛋制品消费产生了一定心里障碍[1]。辣木和诺丽果富含多种活性成分,可以提高机体抗氧化能力、降低胆固醇。辣木广泛种植于热带和亚热带国家和地区,风干辣木叶中富含粗蛋白质、氨基酸、脂肪酸、多糖以及钙、磷等多种营养成分,还含有较高的总黄酮[2]。诺丽果化学成分主要包括蒽醌类、黄酮类、糖苷类等物质,具有抗菌、抗氧化、抗炎等功能[4]。辣诺提取物从辣木和诺丽果中提取,主要含有总黄酮(0.92%)、总皂苷(0.87%)和植物多糖(1.84%)等成分[3],具有抗菌、抗氧化、调节免疫等功能[4-6]。研究表明,产蛋高峰期蛋鸡饲粮中添加辣诺提取物可以一定程度地改善料蛋比和蛋壳强度,还可以显著降低蛋黄胆固醇,改善蛋黄颜色[3],但对蛋形指数、蛋壳强度、哈氏单位等无影响[3]。辣诺提取物在蛋鸡[3]、奶牛[7]和猪[8-9]上已取得了良好的应用效果,但有关产蛋高峰后期蛋鸡添加辣木和诺丽果的研究尚未见报道。本试验旨在研究产蛋高峰后期蛋鸡饲粮中添加辣诺提取物对蛋鸡生产性能、蛋品质、血清抗氧化及生化指标的影响,为产蛋后期蛋鸡健康养殖和蛋品质提升提供理论依据。
1.1 试验材料 辣诺提取物(商品名:辣诺素,四川伟康生物科技有限公司)由25% 的辣木叶水提物、15%的诺丽果水提物和60% 的麦芽糊精组成[3],其有效成分为总黄酮0.92%,总皂苷0.87%和植物多糖1.84%[3]。罗曼粉蛋鸡由圣迪乐村梓潼养殖基地提供。
1.2 试验设计 选取产蛋率相近、健康的60 周龄罗曼粉蛋鸡300 只,随机分为2 个组,每组10 个重复,每个重复15 只鸡。对照组饲喂基础饲粮,辣诺提取物组在基础饲粮中添加500 mg/kg 辣诺提取物。预试期2 周,正试期8 周。饲粮组成和营养成分见表1。
表1 饲粮组成及营养成分(风干基础)
1.3 饲养管理 动物试验于2020 年3 月—5 月在四川铁骑力士集团冯光德实验室花荄试验基地开展。试验蛋鸡饲养于2 层阶梯式笼养设施中,1 个笼位饲养3 只蛋鸡。自由采食和饮水,采用自然光照,不足16 h 时用人工光照补充。自然通风结合纵向负压通风,鸡舍日常饲养管理(如环控、消毒、饲喂、清粪以及免疫程序等)参照冯光德实验室花荄试验基地规定执行。
1.4 测定指标及方法
1.4.1 生产性能 试验期间每天以重复为单位收集鸡蛋,称重,统计产蛋数、蛋重、破蛋和异常蛋(畸形蛋、重量低于45 g 的小蛋等),计算产蛋量和平均蛋重。每周统计每个重复的采食量,计算平均日采食量,统计产蛋率和料蛋比。
1.4.2 蛋品质和货架期 试验第14、28、42、56 天,每个处理随机收集鸡蛋15 枚,测定蛋白高度、哈氏单位、蛋形指数、蛋黄颜色、蛋壳强度以及蛋壳厚度等,取其平均值。蛋白高度、哈氏单位和蛋黄颜色采用多功能蛋品质分析仪(EMT-7300ΙΙ,日本TOUHOKU RHYTHM 公司)测定。蛋的纵径、横径采用电子数显卡尺(0.01 mm,桂林广陆数字测控股份有限公司)测定,计算蛋形指数。蛋壳钝端、中部和锐端的厚度采用电子游标卡尺分别测量,取其平均值。蛋壳强度采用蛋壳强度测定仪(RHDQ200 型,广州润湖仪器有限公司)测定。在正试期第28 天,每个处理随机抽取15 枚鸡蛋常温储藏7 d 后进行蛋品质测定。
1.4.3 血清抗氧化和生化指标 试验第28 和56 天早上,产蛋鸡禁食12 h 后,从每个重复中随机选取1 只体重相近的蛋鸡,翅静脉采血,3 600 r/min 离心10 min,用移液枪吸取上层血清,存于无菌的1.5 mL EP 管中,-80℃冻存。采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)含量。血清样品送到成都扬克斯生物有限公司进行检测,测定方法按照试剂盒说明书操作。
1.5 统计分析 采用Excel 2010 初步处理原始数据,用SPSS 17.0 进行独立样本t检验分析差异显著性。结果以平均值± 标准误表示,P<0.05 表示差异显著,0.05<P<0.10 表示有趋势。
2.1 辣诺提取物对蛋鸡生产性能的影响 从表2 可见,辣诺提取物组蛋鸡试验全期的平均日采食量高于对照组(P<0.05),平均蛋重比对照组高1.59 g(绝对值,P=0.070)。
2.2 辣诺提取物对鸡蛋蛋品质和货架期的影响 从表3可见,与对照组相比,辣诺提取物组第2 周和第4 周蛋白高度分别比对照组高9.70%(P=0.074)和8.27%(P=0.052),第6 周和第8 周蛋白高度分别比对照组高11.93%和12.12%(P<0.05)。试验第4 周的鸡蛋储藏1 周后蛋品质下降较快,蛋白高度下降3 个百分点以上,哈氏单位下降25 个百分点以上,但2 个处理间差异不显著。
表3 辣诺提取物对鸡蛋蛋品质和货架期的影响
2.3 辣诺提取物对蛋鸡血清抗氧化指标的影响 由表4可见,辣诺提取物组第4 周血清MDA 含量比对照组低17.17%(P=0.082)。试验第8 周,2 个处理组GSH-Px、T-AOC、SOD 和MDA 差异均不显著。
表4 辣诺提取物对蛋鸡血清抗氧化指标的影响
2.4 辣诺提取物对蛋鸡血清生化指标的影响 由表5 可见,辣诺提取物组第4 周血清TG 和LDL 分别比对照组低28.00% 和32.18%(P<0.05)。试验第8 周,2 个处理组TC、TG、LDL 和HDL 差异均不显著。
表5 辣诺提取物对蛋鸡血清生化指标的影响 mmol/L
3.1 辣诺提取物对蛋鸡生产性能的影响 辣诺提取物主要活性成分是总黄酮、总皂苷和植物多糖。杨玉等[10]研究表明,在蛋鸡饲粮中添加苜草素(主要成分为黄酮、皂苷和多糖)显著提高了产蛋率,降低了料蛋比。陈志敏等[3]选用540 只22 周龄海兰褐蛋鸡,发现在饲粮中分别添加500、750 mg/kg 辣诺提取物有改善料蛋比的趋势。Mansoub[11]研究发现,在36 周龄海兰褐蛋鸡饲粮中添加200 mg/kg 苜草素时产蛋率和产蛋量最高,而添加150 mg/kg 苜草素时料蛋比最低。谢泰华[12]分别在产蛋前期和产蛋后期蛋鸡饲粮中添加500 和1 000 mg/kg苜草素,发现蛋鸡产蛋率有显著提高,料蛋比则降低,但平均蛋重和日采食量不受影响。本试验结果表明,添加辣诺提取物不影响蛋鸡的产蛋率和料蛋比,但平均日采食量显著提高,与Kakengi 等[13]的研究结果一致。本试验全期蛋鸡产蛋率均在90%以上,远高于相同日龄蛋鸡产蛋率水平[10],可能是蛋鸡繁殖性能受到辣诺提取物中黄酮的直接调控,从而延缓了高龄蛋鸡的产蛋率下降。本试验结果与前人研究有较大出入,可能与蛋鸡品种、饲粮营养水平以及调控营养成分的利用率[14]等有关。
3.2 辣诺提取物对鸡蛋蛋品质和货架期的影响 蛋形指数、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度和哈氏单位等是衡量蛋品质好坏主要常用指标[10]。哈氏单位可直接反映鸡蛋的新鲜程度与蛋白品质[15]。研究发现,苜草素可以一定程度增强蛋壳强度[10],辣诺提取物不影响高峰期蛋鸡蛋壳强度和蛋壳厚度[3]。侯永刚[16]研究发现,在400 日龄海兰褐蛋鸡饲粮中添加60 mg/kg 苜蓿皂苷,蛋黄和全蛋胆固醇含量降低,蛋壳厚度显著提高。本试验研究表明,在60 周龄的蛋鸡饲粮中添加500 mg/kg辣诺提取物,虽然哈氏单位无显著变化,但试验第2 周鸡蛋蛋白高度有所提高,第6 周达到显著水平,说明辣诺提取物中的活性物质增强了鸡蛋蛋白质代谢,从而使鸡蛋中蛋白质的沉积提高[17]。但储藏7 d 后蛋品质(蛋白高度和哈氏单位)下降很快,说明辣诺提取物虽然能改善鲜蛋蛋品质,但不能延长鸡蛋货架期。
3.3 辣诺提取物对蛋鸡血清抗氧化和生化指标的影响产蛋后期蛋鸡机体氧化衰老速度加快,但持续产蛋蛋鸡代谢依旧旺盛,导致大量活性氧自由基产生。积累的自由基会引起脂质过氧化,从而细胞功能受到损伤[18]。动物健康极容易影响机体抗氧化能力,而GSH-Px、T-SOD、T-AOC 和MDA 是体内反映机体抗氧化能力的主要指标[10]。研究表明,辣诺提取物中的活性物质可以调节免疫、增强抗氧化能力[4-6]。在蛋鸡饲粮中添加1 000 mg/kg 苜草素,血浆GSH-Px、T-SOD 和T-AOC活性显著提高,血浆MDA 含量降低[10]。本研究结果表明,产蛋高峰后期蛋鸡饲粮中添加500 mg/kg 辣诺提取物对血清GSH-Px、T-AOC、SOD 均无显著影响;血清第4 周MDA 含量有一定程度降低,TG 含量显著降低,表明辣诺提取物可能通过调控血清脂质代谢相关因子提高了蛋鸡的脂质代谢能力,从而减少了其在体内的沉积,改善了动物健康。LDL 是一种脂蛋白颗粒,在体内运载胆固醇进入外周组织细胞后被氧化成氧化低密度脂蛋白。过量的氧化低密度脂蛋白携带的胆固醇积存在动脉壁上,长期积累后容易引起动脉硬化。本研究发现,产蛋高峰后期蛋鸡饲粮中添加500 mg/kg 辣诺提取物显著降低了第4 周蛋鸡血清的LDL,减少了血脂沉积,提高了蛋鸡的健康水平;但试验第8 周血清TG 和LDL差异均不显著,说明辣诺提取物调控产蛋后期蛋鸡脂质代谢可能具有短期效应,还需进一步深入研究。
黄酮是一种很强的抗氧化剂,可以有效清除体内的氧自由基,改善血液循环,降低胆固醇。皂苷具有抗肿瘤、抗炎、免疫调节等多种生物活性。多糖具有免疫抑制作用,它能减少细胞毒性、机体抗感染能力下降、对骨髓造血细胞的繁殖抑制等副作用,还可以通过抑制病毒对细胞的吸附从而起到抗病毒作用,也能降低血糖。虽然黄酮、皂苷和多糖都具有独特的生理功能,但因其来源及提取工艺差异,导致不同产品有效成分差异大,而且缺乏从辣诺提取物中单独提纯的研究报道,推测本研究效果是由辣诺提取物中总黄酮、总皂苷和多糖协同作用的结果,但还需进一步验证。
本试验表明,在产蛋高峰后期蛋鸡饲粮中添加辣诺提取物不影响蛋鸡生产性能,但可以提高4 周内鸡蛋部分蛋品质,改善蛋鸡健康状况。