外周血淋巴细胞计数在艾滋病患者HAART治疗中的变化及其对疗效的影响

刘尹正泽 肖 寒 梁 欣 张利霞

遵义医科大学第五附属 （珠海）医院感染科，广东珠海 519100

获得性免疫缺陷综合征（acquired immune deficiency syndrome，AIDS）又称为艾滋病，是由人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）引起的一种传染性疾病。HIV通过破坏人的免疫系统，使患者丧失对各种疾病的抵抗力，严重危害人的生命。HIV高效抗反转录病毒治疗（highly active antiretroviral therapy，HAART）可有效抑制机体HIV增殖复制，促进患者免疫功能恢复，进而延长患者生存期并控制并发症[1-2]。淋巴细胞功能缺陷是艾滋病患者免疫功能缺陷的主要病因，T淋巴细胞与B淋巴细胞同属淋巴细胞，前者介导特异和非特异性免疫，后者产生抗体发挥特异性体液免疫功能，两者相辅相成[3-4]。本研究选取2018年6月至2019年9月我院收治的艾滋病患者，对其接受HAART治疗前后的外周血淋巴细胞变化进行研究，分析外周血淋巴细胞改变对于预后的评估价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2018年6月至2019年9月间收治的艾滋病患者120例作为观察组。纳入标准：①符合《中国艾滋病诊疗指南（2018版）》中对艾滋病的诊断标准[5]；②经免疫印迹法证实为HIV抗体阳性；③均可接受治疗期间1、3、6及12个月复诊检测。排除标准：①在近3个月内接受HAART治疗；②存在明显机会性感染患者；③合并肺结核、病毒性肝炎等其他传染性疾病；④合并血液、免疫、内分泌或神经等系统严重疾病；⑤合并严重的心脑血管、肝肾肺等实质性脏器功能障碍；⑥妊娠期或哺乳期女性；⑦资料不完整或失访。选择同期门诊体检健康志愿者100名作为对照组。

观察组中男69例，女51例，年龄19～68岁，平均（36.71±8.52）岁，平均体重指数（21.31±1.36）kg/m2；对照组中男57例，女43例，年龄20～71岁，平均（37.05±8.63）岁，平均体重指数（21.28±1.27）kg/m2。两组受试者的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有受试者均签署知情同意书。本研究已经过医院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

观察组患者给予HAART治疗：①替诺福韦（Tenofovir Disoproxil Fumarate，TDF）（国 药 准 字H20193014，安徽贝克生物制药有限公司）口服300 mg/次，1次 /d；或 2.0 mg/kg（体重＜ 50.0 kg），1次/d；②拉米夫定（Lamiv udine，3TC）（苏州葛兰素史克制药有限公司，国药准字：H20030581，国药准字：H20030581，）口服300.0 mg/次，1次/d；③依非韦伦（Efavirenz，EFV）（浙江华海药业股份有限公司，国药准字：H20143154）口服600 mg/次，1次/d。连续治疗12个月。

1.3 观察指标

①比较观察组患者治疗前及治疗1、3、6及12个月的CD4+T淋巴细胞和B淋巴细胞计数，并与对照组进行比较。采集受试者外周静脉血3.0 ml，将外周静脉血置于含乙二胺四乙酸二钾的抗凝管中抗凝，5000 rpm离心5 min得血浆，2 h内上机完成检测，采用Partec CyFlow PA流式细胞仪及配套试剂（德国PARTEC公司）检测CD4+T淋巴细胞和B淋巴细胞计数；②治疗12个月，以CD4+T淋巴细胞较治疗前升高＞100个/μl作为治疗有效标准，分为有效亚组和无效亚组，比较观察组患者治疗前及治疗1、3、6及12个月的CD4+T淋巴细胞和B淋巴细胞计数。

1.4 统计学方法

数据处理采用SPSS 26.0统计学分析软件，计量资料以（）表示，多组比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNQ检验，两组间同一时间淋巴细胞计数比较采用t检验；采取Pearson相关及散点图描述观察组患者治疗前及治疗12个月后的CD4+T淋巴细胞和B淋巴细胞计数差值（ΔCD4+T淋巴细胞和ΔB淋巴细胞）相关性；绘制受试者工作特征曲线（receiver operator characteristic curve，ROC），分析B淋巴细胞最佳治疗切入点。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后淋巴细胞计数变化比较

观察组治疗前后的CD4+T及B淋巴细胞计数均低于对照组（P＜0.05），与治疗前比，观察组患者治疗1、3、6及12个月后的CD4+T及B淋巴细胞计数均明显升高（P＜0.05），且呈时间依赖性相关趋势。见表1。

表1 两组患者治疗前后淋巴细胞计数变化比较（，个/μl）

表1 两组患者治疗前后淋巴细胞计数变化比较（，个/μl）

注：F*、P*为对照组与观察组前后的单因素方差分析比较；1）观察组治疗前后与对照组比较，P＜0.05，2）观察组治疗后与治疗前比较，P＜0.05，3）观察组治疗3、6及12个月与治疗1个月比较，P＜0.05，4）观察组治疗6及12个月与治疗3个月比较，P＜0.05，5）观察组治疗12个月与治疗6个月比较，P＜0.05

组别 n CD4+T淋巴细胞 B淋巴细胞对照组 100 830.26±182.39 301.38±114.82观察组 120 治疗前 216.37±88.591） 114.57±39.851）治疗 1 个月 265.92±94.281）2） 122.88±43.161）2）治疗 3 个月 294.34±92.731）2）3） 135.40±50.721）2）治疗 6 个月 331.50±98.471）2）3）4）157.63±61.291）2）3）4）治疗 12 个月 395.81±106.361）2）3）4）5）195.74±70.351）2）3）4）5）F值* 413.357 117.948 P值* 0.000 0.000

2.2 有效亚组与无效亚组治疗前后淋巴细胞计数比较

根据治疗有效标准将患者分为有效亚组73例（60.83%），无效亚组47例（39.17%）。治疗前、治疗1个月和治疗3个月，有效亚组及无效亚组的CD4+T淋巴细胞比较差异无统计学意义（P＞0.05）；与无效亚组比较，有效亚组治疗6个月、12个月的CD4+T淋巴细胞计数均明显升高（P＜0.05）；与无效亚组比较，有效亚组治疗前后的B淋巴细胞均明显升高（P＜0.05）；治疗有效亚组及无效亚组的CD4+T淋巴细胞及B淋巴细胞计数均高于治疗前（P＜0.05），且呈时间依赖性相关趋势。见表2。

表2 有效亚组与无效亚组治疗前后淋巴细胞计数比较（）

表2 有效亚组与无效亚组治疗前后淋巴细胞计数比较（）

注：①与治疗前比较，P＜0.05；②与治疗1个月比较，P＜0.05；③与治疗3个月比较，P＜0.05；④与治疗6个月比较，P＜0.05

组别 n CD4+T淋巴细胞（个/μl）治疗前 治疗1个月 治疗3个月 治疗6个月 治疗12个月 F值 P值有效亚组 73 215.25±54.37 251.62±98.27① 300.51±98.74①② 352.25±101.48①②③ 432.31±116.29①②③④ 57.732 0.000无效亚组 47 206.11±55.21 238.07±61.35① 269.56±79.45①② 304.27±84.41①②③ 341.12±90.46①②③④ 23.385 0.000 t值 0.894 0.845 1.805 2.695 4.559 P值 0.373 0.4 0.074 0.008 0.000组别 n B淋巴细胞（个/μl）治疗前 治疗1个月 治疗3个月 治疗6个月 治疗12个月 F值 P值有效亚组 73 111.36±47.54 132.26±49.78① 153.96±57.25①② 179.66±64.98①②③ 215.35±85.06①②③④ 30.979 0.000无效亚组 47 92.27±33.48 113.31±39.86① 133.27±46.35①② 155.96±57.68①②③ 184.60±59.35①②③④ 26.069 0.000 t值 2.395 2.195 2.077 2.039 2.161 P值 0.018 0.03 0.04 0.044 0.033

2.3 治疗12个月ΔCD4+T和ΔB淋巴细胞的相关性分析

治疗12个月，观察组患者的ΔCD4+T淋巴细胞与ΔB淋巴细胞呈明显正相关（r=0.396，P＜0.05）。见图1。

图1 ΔCD4+T淋巴细胞和ΔB淋巴细胞相关性分析

2.4 HAART治疗最佳B淋巴细胞计数分析

ROC曲线显示，治疗前外周血B淋巴计数在101.28个/μl时，曲线下面积为0.853，治疗有效的敏感度为81.93%，特异度为83.47%。见图2。

图2 艾滋病患者接受HAART治疗前外周血最佳B淋巴细胞计数的ROC曲线图

3 讨论

近年来，艾滋病发生率逐年升高，已成为国内重点关注的公共卫生问题[6]。CD4+T淋巴细胞计数水平可直接反映艾滋病患者免疫缺陷程度，有效评估艾滋病患者病情进程和药物治疗效果，同时还可监测机会性感染和死亡风险[7-8]。目前，HAART是艾滋病的最有效治疗手段，通过提高机体CD4+T淋巴细胞计数，促进患者免疫系统重建，延缓病情进展[9]。

CD4+T淋巴细胞计数是评价患者患者机会性感染和死亡风险的重要参数，HAART能持续提升CD4+T淋巴细胞计数，促进患者免疫系统功能重建[10]。B淋巴细胞是机体重要的免疫细胞，经抗原激活后能提呈抗原，参与免疫调节及炎症反应，其计数水平亦直接决定机体体液免疫功能[11-12]。本研究结果显示，观察组患者治疗1、3、6及12个月后的CD4+T淋巴细胞计数及B淋巴细胞计数均明显高于治疗前，但仍明显低于健康者，提示HAART对艾滋病患者CD4+T淋巴细胞计数及B淋巴细胞计数提升效果明显，但无法彻底清除HIV，因此与健康人群相比，艾滋病患者的免疫功能仍不完全。进一步采取Pearson相关及散点图描述CD4+T淋巴细胞和B淋巴细胞的相关性分析显示，治疗12个月患者的B淋巴细胞和CD4+T淋巴细胞计数变化呈现正相关性，提示HAART能同时改善体液和细胞免疫功能。

B淋巴细胞作为机体唯一可产生抗HIV-1中和抗体免疫细胞，是延缓艾滋病病情进展的重要保护因素[13]。本研究以CD4+T淋巴细胞计数升高＞100个/μl作为治疗有效标准，结果显示120例艾滋病患者中，有效亚组73例（60.83%），无效亚组47例（39.17%），有效亚组患者治疗前后的B淋巴细胞计数均明显高于无效亚组（P＜0.05）。分析可能原因在于艾滋病患者B淋巴细胞对HIV损害敏感度不同，部分患者传递T淋巴细胞活化信号及其分泌白介素-6（interleukin-6，IL-6）等炎症介质等途径减弱，正向调控CD4+T淋巴细胞能力减弱，启动B淋巴细胞凋亡途径，又可通过“旁邻者效应”加快CD4+T淋巴细胞凋亡，降低了HAART治疗效果[14-15]。进一步通过ROC曲线分析显示，治疗前外周血B淋巴计数在101.28个/μl时，曲线下面积为0.853，治疗有效的敏感度为81.93%，特异度为83.47%，提示外周血B淋巴计数可用于指导艾滋病采用HAART治疗提供借鉴意义。

综上所述，HAART能明显提高艾滋病患者机体CD4+T淋巴细胞和B淋巴细胞计数，同时治疗前B淋巴细胞计数对艾滋病患者HAART治疗效果有明显影响。