河北省一例蛋鸡脂肪肝综合征的诊断和防治

张 宁，陆 安，田 勇，杨 威，赵志强，李 茜，魏忠华，李杰峰★

（1.河北省畜牧兽医研究所 071000；2.石家庄市金元康牧药业有限公司 051130）

鸡脂肪肝综合征是产蛋鸡比较容易发生的一种营养代谢性疾病，因为此病伴有肝脏出血症状，所以1972年Wolford 等人又将其改为脂肪肝出血综合征[1]。该病多数发生于笼养蛋鸡，过肥的肉用鸡也时有发生，鸡的品种和饲料的组分不同发病率也不同。该病主要是由于饲料中营养物质过剩造成的，也可能是饲料中微量元素缺乏导致的。当蛋鸡摄入的日粮为高能量低蛋白时，多余的能量就会转化为脂肪贮存在体内，特别是肝脏部位。这些脂肪如果不能被及时运出就会导致肝脏内脂肪堆积，使得鸡出现脂肪肝[2]。此外，蛋鸡饲料中缺乏营养物质也会引起脂肪肝。脂蛋白是将脂肪运出肝脏的辅助物质，日粮中缺乏合成脂蛋白的物质，如：维生素E、B族维生素、胆碱、蛋氨酸等，就会造成肝脏中脂肪无法被运出，使其大量堆积于肝中，从而产生脂肪肝[3]。通常鸡群发病率的1%～2%，有的高达5%～7%，甚至15%以上。死亡率一般低于5%，但有时高达20%[4]。鸡脂肪肝综合征还引起鸡的产蛋率下降，从而给蛋鸡养殖户带来极大经济损失。

2020年4月，河北某养殖场140日龄蛋鸡已进入产蛋期，突然有少数鸡出现死亡，随后死亡鸡数目逐渐增多，从体形上发现病鸡腹部膨大、下垂，用手触摸感觉到很柔软，剖检后可见整个腹腔被脂肪包围，肝脏与胸腔粘连，肝脏肿大，肝脏内还含有许多白色小结节，胸腔出现大量血凝块，卵黄被膜充血。为进一步确诊，采取病死鸡的肝脏组织进行实验室检测，确诊为脂肪肝综合征。

1 材料与方法

1.1 病料来源

病料来源于河北某蛋鸡场140日龄蛋鸡，无菌采集病死鸡肝脏，放入10mL环保组织固定液和30mL 95%乙醇混合液中备用，同时无菌采集心脏、肺脏、脾脏等组织冻存待病原学检测。

1.2 主要试剂

血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）购自北京天根生化科技有限公司；TRNzol Universal试剂购自北京天根生化科技有限公司；氯仿、异丙醇、乙醇购自天津市鼎盛鑫化工有限公司；Fast Quant RT Kit （With gDNase） cDNA第一链合成试剂盒购自北京天根生化科技有限公司；RNase-Free dd H2O 购自北京天根生化科技有限公司；TaqMan荧光定量试剂盒，购自北京天根生化科技有限公司；油红O染色液，购自湖北百奥斯生物科技有限公司。

1.3 细菌学检测

无菌剪开肝脏、肺脏等组织，做细菌涂片，革兰氏染色后镜检，观察细菌菌体。

1.4 油红O染色

将采集的放入10mL环保组织固定液和30mL 95%乙醇混合液中的肝脏组织，制作成冰冻切片，取冰冻切片，先用蒸馏水洗；用玻璃钩吧切片捞入60%异丙醇中漂洗20～30s；油红O贮备液6mL，加蒸馏水4mL，混合后静置10min，即可用来染色，油红O染色时间5～10min；60%异丙醇稍洗去多余染液，蒸馏水洗；Mayer苏木素浅染核1min；1%盐酸水稍分化；水漂洗10min，用滤纸将切片周围水分抹干；阿拉伯糖胶封盖，显微镜检查。

1.5 病毒荧光定量PCR检测

将采集的肝脏、肺脏、脾脏等组织混合研磨，提取组织DNA和RNA，检测鸡白血病病毒、鸡传染性贫血病毒、禽腺病毒4型、禽呼肠孤病毒等病原。

2 结果与分析

2.1 临床诊断及剖检变化

病鸡鸡冠、肉髯变淡，腹部膨大、下垂，用手触摸感觉很柔软，剖开后发现整个腹腔被脂肪包围，肝脏与胸腔粘连，肝脏肿大，边缘钝圆，质地较脆，很容易破裂，表面有一种油腻感，且肝脏内含有许多白色小结节，胸腔出现大量血凝块，卵黄被膜充血。根据临床症状和剖检变化初步诊断为鸡脂肪肝综合征。

2.2 细菌学检测

经组织涂片和染色镜检，结果未发现细菌菌体。

2.3 油红O染色

病理学镜检下可见肝细胞的胞浆内出现大小不等的脂滴，小的脂滴互相融合成较大的脂滴，细胞核常常被挤到一侧，经油红O染色可见细胞内的脂肪滴被染成橙色，细胞核被染成蓝色，证实为脂肪变性。（见图1）

图1 油红O染色

2.4 荧光定量PCR检测

荧光定量PCR结果显示，从剖检的鸡组织中检测出鸡传染性贫血病毒，其他病毒未检出。

3 讨论

鸡脂肪肝综合征是由营养、环境、激素、遗传等因素引起的，因体内脂肪代谢紊乱而使得肝脏脂肪堆积的一种营养代谢性疾病。脂肪肝综合征的症状不像鸡疫病那样有比较明显的临床特征，因此，常被人们忽视，但随着集约化等高效规模养殖方式的推广，蛋鸡脂肪肝已经普遍存在，患鸡最初无明显症状，且与鸡疫病相比死亡率不高[5]，但是此病可造成产蛋率下降，给养殖户带来较大经济损失。

通过荧光定量PCR检测，发现该鸡场具有鸡传染性贫血，鸡传染性贫血是鸡的一种免疫抑制性疾病，是传染性贫血病毒引起的。该病毒的易感性随着鸡日龄的增长而下降，自然发病多见于2～4周龄鸡，公鸡比母鸡易感染，肉鸡比蛋鸡易感染，该病主要的传播方式是垂直传播[6]，根据鸡场临床症状和剖检变化，未发现鸡传染性贫血的典型症状和病理变化，因此该病毒判断为隐性感染。根据病原学检测、临床症状、剖检变化、镜检观察综合分析，综合考虑确诊该养殖场为鸡脂肪肝综合征。

在实际生产中，过多的能量饲料、不平衡的能量和蛋白、饲料霉变是导致脂肪肝综合征发生的主要原因。要根据蛋鸡的品种合理搭配日粮的营养成分，并停止饲喂发病前的饲料。当蛋鸡出现产蛋率下降了，可以添加胆碱1kg拌料1000kg，同时添加维生素C纯粉1g拌7.5kg料。当鸡群中出现了死亡，可以在饲料中添加肝泰乐，每只鸡1g拌料，最好用开水煮30min后放凉，渣子和药液一起拌料。本次检测结果为养殖户确诊和防治鸡脂肪肝综合征提供了依据。