河北省一例蛋鸡脂肪肝综合征的诊断和防治

2021-07-14 10:37赵志强魏忠华李杰峰
今日畜牧兽医 2021年6期
关键词:油红脂肪肝蛋鸡

张 宁,陆 安,田 勇,杨 威,赵志强,李 茜,魏忠华,李杰峰★

(1.河北省畜牧兽医研究所 071000;2.石家庄市金元康牧药业有限公司 051130)

鸡脂肪肝综合征是产蛋鸡比较容易发生的一种营养代谢性疾病,因为此病伴有肝脏出血症状,所以1972年Wolford 等人又将其改为脂肪肝出血综合征[1]。该病多数发生于笼养蛋鸡,过肥的肉用鸡也时有发生,鸡的品种和饲料的组分不同发病率也不同。该病主要是由于饲料中营养物质过剩造成的,也可能是饲料中微量元素缺乏导致的。当蛋鸡摄入的日粮为高能量低蛋白时,多余的能量就会转化为脂肪贮存在体内,特别是肝脏部位。这些脂肪如果不能被及时运出就会导致肝脏内脂肪堆积,使得鸡出现脂肪肝[2]。此外,蛋鸡饲料中缺乏营养物质也会引起脂肪肝。脂蛋白是将脂肪运出肝脏的辅助物质,日粮中缺乏合成脂蛋白的物质,如:维生素E、B族维生素、胆碱、蛋氨酸等,就会造成肝脏中脂肪无法被运出,使其大量堆积于肝中,从而产生脂肪肝[3]。通常鸡群发病率的1%~2%,有的高达5%~7%,甚至15%以上。死亡率一般低于5%,但有时高达20%[4]。鸡脂肪肝综合征还引起鸡的产蛋率下降,从而给蛋鸡养殖户带来极大经济损失。

2020年4月,河北某养殖场140日龄蛋鸡已进入产蛋期,突然有少数鸡出现死亡,随后死亡鸡数目逐渐增多,从体形上发现病鸡腹部膨大、下垂,用手触摸感觉到很柔软,剖检后可见整个腹腔被脂肪包围,肝脏与胸腔粘连,肝脏肿大,肝脏内还含有许多白色小结节,胸腔出现大量血凝块,卵黄被膜充血。为进一步确诊,采取病死鸡的肝脏组织进行实验室检测,确诊为脂肪肝综合征。

1 材料与方法

1.1 病料来源

病料来源于河北某蛋鸡场140日龄蛋鸡,无菌采集病死鸡肝脏,放入10mL环保组织固定液和30mL 95%乙醇混合液中备用,同时无菌采集心脏、肺脏、脾脏等组织冻存待病原学检测。

1.2 主要试剂

血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)购自北京天根生化科技有限公司;TRNzol Universal试剂购自北京天根生化科技有限公司;氯仿、异丙醇、乙醇购自天津市鼎盛鑫化工有限公司;Fast Quant RT Kit (With gDNase) cDNA第一链合成试剂盒购自北京天根生化科技有限公司;RNase-Free dd H2O 购自北京天根生化科技有限公司;TaqMan荧光定量试剂盒,购自北京天根生化科技有限公司;油红O染色液,购自湖北百奥斯生物科技有限公司。

1.3 细菌学检测

无菌剪开肝脏、肺脏等组织,做细菌涂片,革兰氏染色后镜检,观察细菌菌体。

1.4 油红O染色

将采集的放入10mL环保组织固定液和30mL 95%乙醇混合液中的肝脏组织,制作成冰冻切片,取冰冻切片,先用蒸馏水洗;用玻璃钩吧切片捞入60%异丙醇中漂洗20~30s;油红O贮备液6mL,加蒸馏水4mL,混合后静置10min,即可用来染色,油红O染色时间5~10min;60%异丙醇稍洗去多余染液,蒸馏水洗;Mayer苏木素浅染核1min;1%盐酸水稍分化;水漂洗10min,用滤纸将切片周围水分抹干;阿拉伯糖胶封盖,显微镜检查。

1.5 病毒荧光定量PCR检测

将采集的肝脏、肺脏、脾脏等组织混合研磨,提取组织DNA和RNA,检测鸡白血病病毒、鸡传染性贫血病毒、禽腺病毒4型、禽呼肠孤病毒等病原。

2 结果与分析

2.1 临床诊断及剖检变化

病鸡鸡冠、肉髯变淡,腹部膨大、下垂,用手触摸感觉很柔软,剖开后发现整个腹腔被脂肪包围,肝脏与胸腔粘连,肝脏肿大,边缘钝圆,质地较脆,很容易破裂,表面有一种油腻感,且肝脏内含有许多白色小结节,胸腔出现大量血凝块,卵黄被膜充血。根据临床症状和剖检变化初步诊断为鸡脂肪肝综合征。

2.2 细菌学检测

经组织涂片和染色镜检,结果未发现细菌菌体。

2.3 油红O染色

病理学镜检下可见肝细胞的胞浆内出现大小不等的脂滴,小的脂滴互相融合成较大的脂滴,细胞核常常被挤到一侧,经油红O染色可见细胞内的脂肪滴被染成橙色,细胞核被染成蓝色,证实为脂肪变性。(见图1)

图1 油红O染色

2.4 荧光定量PCR检测

荧光定量PCR结果显示,从剖检的鸡组织中检测出鸡传染性贫血病毒,其他病毒未检出。

3 讨论

鸡脂肪肝综合征是由营养、环境、激素、遗传等因素引起的,因体内脂肪代谢紊乱而使得肝脏脂肪堆积的一种营养代谢性疾病。脂肪肝综合征的症状不像鸡疫病那样有比较明显的临床特征,因此,常被人们忽视,但随着集约化等高效规模养殖方式的推广,蛋鸡脂肪肝已经普遍存在,患鸡最初无明显症状,且与鸡疫病相比死亡率不高[5],但是此病可造成产蛋率下降,给养殖户带来较大经济损失。

通过荧光定量PCR检测,发现该鸡场具有鸡传染性贫血,鸡传染性贫血是鸡的一种免疫抑制性疾病,是传染性贫血病毒引起的。该病毒的易感性随着鸡日龄的增长而下降,自然发病多见于2~4周龄鸡,公鸡比母鸡易感染,肉鸡比蛋鸡易感染,该病主要的传播方式是垂直传播[6],根据鸡场临床症状和剖检变化,未发现鸡传染性贫血的典型症状和病理变化,因此该病毒判断为隐性感染。根据病原学检测、临床症状、剖检变化、镜检观察综合分析,综合考虑确诊该养殖场为鸡脂肪肝综合征。

在实际生产中,过多的能量饲料、不平衡的能量和蛋白、饲料霉变是导致脂肪肝综合征发生的主要原因。要根据蛋鸡的品种合理搭配日粮的营养成分,并停止饲喂发病前的饲料。当蛋鸡出现产蛋率下降了,可以添加胆碱1kg拌料1000kg,同时添加维生素C纯粉1g拌7.5kg料。当鸡群中出现了死亡,可以在饲料中添加肝泰乐,每只鸡1g拌料,最好用开水煮30min后放凉,渣子和药液一起拌料。本次检测结果为养殖户确诊和防治鸡脂肪肝综合征提供了依据。

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