慢性乙肝和肝硬化患者HBV DNA与HBsAg相关性分析

王 军，黄文达，薛思为

（惠阳三和医院检验科，广东惠州 516211）

慢性乙肝是发病率较高的慢性传染病，该病症因感染乙肝病毒（HBV）所致。相关调查显示，全球人口中约35%感染过HBV，其中15%～30%HBV携带者会发展为肝硬化[1]。HBV DNA是诊断HBV感染最直接的指标，其特异性、灵敏性较高，HBV携带者的传染性强弱与HBV DNA定量水平密切相关，其在判断病毒复制程度和抗病毒药物治疗效果中具有重要价值，但该指标对检测仪器和环境要求较高[2]。乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是HBV感染的重要标志物，在HBV感染患者中，HBsAg亚病毒颗粒数量与成熟病毒颗粒相比明显更多，即便经药物抑制病毒复制，HBsAg仍在持续合成与分泌，因此其水平与肝病的发展存在密切关联[3]。本研究旨在探讨慢性乙肝和肝硬化患者HBV DNA与HBsAg的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析惠阳三和医院2019年1月至2020年10月收治的105例肝病患者的临床资料，按照不同疾病类型分为3组。将37例慢性乙肝患者纳入A组，其中男性23例，女性14例；年龄26～64岁，平均（38.61±8.27）岁；其中乙型肝炎E抗原（HBeAg）阳性25例。将32例代偿期肝硬化患者纳入B组，其中男性20例，女性12例；年龄24～65岁，平均（38.56±8.18）岁；其中HBeAg阳性22例。将36例失代偿期肝硬化患者纳入C组，其中男性25例，女性11例；年龄25～63岁，平均（38.68±8.37）岁；其中HBeAg阳性24例。3组患者一般资料相比，差异无统计学意义（P＞0.05），组间具有可比性。研究经院内医学伦理委员会批准。纳入标准：所有患者均符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》[4]中的相关诊断标准；肝硬化患者符合《临床肝脏病学》[5]中的相关诊断标准；患者无抗病毒治疗史；初诊患者。排除标准：其他原因所致的肝炎或肝硬化患者；拟诊肝癌患者；患者入组前有提高血细胞、降酶药物治疗史。

1.2 方法 采集3组患者空腹肘静脉血5 mL，室温下放置30 min，离心处理（转速3 000 r/min，半径9 cm，时间14 min），取上层血清备检，采用圣湘SLAN96实时定量PCR仪对HBV DNA定量水平进行检测；采用化学发光法对HBsAg定量水平进行检测，检测仪器为罗氏ROCH601化学发光免疫分析仪。

1.3 观察指标 ①比较3组患者HBV DNA和HBsAg定量水平。②观察并比较3组HBeAg阳性患者HBV DNA和HBsAg定量水平。③分析3组患者HBV DNA与HBsAg的相关性。④分析HBV DNA、HBsAg与肝硬化程度的相关性。

1.4 统计学分析 采用SPSS 24.0统计软件处理数据，计量资料以（±s）表示，采用t检验，多组间比较采用重复测量方差分析；符合正态分布的数据相关性分析采用Pearson检验，不符合正态分布的数据数据相关性分析使用Spearman检验。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组患者HBV DNA、HBsAg水平 A组患者HBV DNA、HBsAg水平均显著高于B组、C组，且B组显著高于C组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 3组患者HBV DNA、HBsAg水平比较(±s,IgIU/mL)

表1 3组患者HBV DNA、HBsAg水平比较(±s,IgIU/mL)

注：与A组比，*P＜0.05，与B组比，#P＜0.05。HBV：乙肝病毒；HBsAg：乙型肝炎表面抗原。

组别 例数 HBV DNA HBsAg A组 37 7.59±1.16 3.93±0.69 B组 32 6.61±1.05* 3.54±0.37*C组 36 5.58±0.98*# 2.71±0.33*#F值 32.347 56.991 P值 ＜0.05 ＜0.05

2.2 3组HBeAg阳性患者HBV DNA、HBsAg水平 A组HBeAg阳性患者25例，B组HBeAg阳性患者22例；C组HBeAg阳性患者24例。A组HBeAg阳性患者HBV DNA、HBsAg水平均显著高于B组、C组，B组HBeAg阳性患者HBsAg定量水平显著高于C组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；B组、C组HBeAg阳性患者HBV DNA定量水平经比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表2。

表2 3组HBeAg阳性患者HBV DNA、HBsAg水平比较(±s,IgIU/mL)

表2 3组HBeAg阳性患者HBV DNA、HBsAg水平比较(±s,IgIU/mL)

注：与A组比，＊P＜0.05，与B组比，#P＜0.05。

组别 例数 HBV DNA HBsAg A组 25 7.69±1.10 4.31±0.56 B组 22 6.85±0.97* 3.76±0.45*C组 24 6.41±0.81* 3.11±0.41*#F值 11.043 38.366 P值 ＜0.05 ＜0.05

2.3 HBV DNA与HBsAg的相关性Spearman相关性分析结果显示，A组中，HBV DNA与HBsAg呈正相关（r=0.982，P＜0.05）；而B组、C组中，HBV DNA与HBsAg定量水平之间无明显相关性（r=0.085、0.067，均P＞0.05），见表3。

表3 HBV DNA与HBsAg的相关性

2.4 HBV DNA与HBsAg定量水平与肝硬化程度的相关性Spearman相关性分析结果显示，HBV DNA、HBsAg定量水平与肝硬化程度均呈负相关（r=-0.715、-0.504，均P＜0.05）。

3 讨论

慢性乙肝是指患者感染HBV持续6个月以上，且肝脏出现不同炎症坏死和（或）肝纤维化的疾病。全球有2亿多慢性HBV感染者，而多数HBV感染患者随着病情加重会发展为肝硬化，在国内，约60%的HBV患者会转化为肝硬化[6]。HBV DNA位于HBV核心内，其是HBV感染的最直接证据，具有特异性、灵敏度较高的特点，其定量水平与病毒复制和传染性存在密切关联。HBsAg是HBV感染的重要标志物，具有稳定可靠的特点，可作为诊断HBV感染的重要依据，其是一种由乙型肝炎病毒S基因分泌而来的病毒包膜蛋白质，可排放至细胞外。研究表明，与感染性成熟病毒颗粒相比，HBsAg亚病毒颗粒定量水平更高，在及时进行抗病毒治疗后，仍不能完全抑制病毒复制增生，HBsAg仍可持续合成与分泌[7]。可见，HBsAg在HBV感染和疾病发展中发挥着重要作用。血清HBsAg是肝细胞核基因整合的共价闭合环DNA（cccDNA）的转录和翻译结果，其滴度与cccDNA数量相关，因此，通过检测血清HBsAg可反映肝细胞中cccDNA的转录和翻译活性。由于HBV DNA只能反映HBV复制情况，而HBsAg可提供与HBV DNA不同的互补信息，因此可将HBsAg作为感染细胞数量的替代性指标。

本研究结果显示，A组患者HBV DNA、HBsAg水平均显著高于B组、C组，B组显著高于C组，提示HBV DNA、HBsAg定量水平随着病情加重而逐渐降低。分析原因可能为HBV的入侵会改变人体机能，体内细胞会更具有特异性，体液也会出现明显的免疫应答，进而破坏肝细胞，随着疾病的不断发展，肝细胞的损坏范围会继续扩大，增加肝部的纤维化容量，可能出现HBV DNA和HBsAg水平降低的情况[8]。本研究结果还显示，A组HBeAg阳性患者HBV DNA与HBsAg定量水平均显著高于B组、C组，B组HBeAg阳性患者HBsAg定量水平显著高于C组，B组、C组HBeAg阳性患者HBV DNA定量水平相比，差异无统计学意义(P＜0.05），提示随着慢性乙型肝炎向肝硬化进展，患者肝损伤不断加重，HBsAg和HBV DNA定量水平可能逐渐降低，但并不能完全说明HBV复制不活跃，也可能与本研究样本量少有关。

本研究结果显示，HBV DNA、HBsAg在A组中呈正相关，在B组、C组中无明显相关性，提示HBV DNA、HBsAg在疾病不同阶段并不完全平行，分析原因可能与HBV DNA、HBsAg在不同疾病阶段的合成和分泌路径不完全相同有关[9]。Spearman相关性分析显示，HBV DNA、HBsAg与肝硬化程度呈负相关，但HBsAg和HBV DNA定量较低的肝硬化患者，不等同于肝细胞内cccDNA数量的相应减少，仍需积极的抗病毒治疗，加强肿瘤筛查，可联合血清学和影像学检查来提高早期肝癌的检出率。

综上，随着病情加重，HBV DNA、HBsAg定量水平呈逐渐降低趋势，且HBV DNA与HBsAg呈正相关，但其在不同疾病阶段并不完全平行，HBV DAN、HBsAg与肝硬化呈负相关，临床通过对HBV DNA、HBsAg进行定量测定可有效预防肝硬化发展进程。