血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7联合检测在诊断子宫腺肌病中的临床价值

单 君，李 莉

复旦大学附属妇产科医院妇科，上海 200090

子宫腺肌病是妇科常见的良性疾病，是常见的不孕原因之一，临床上常有痛经、经量过多和经期延长等症状，痛经在月经开始时出现，疼痛持续到月经结束，严重影响患者的生活质量[1]。近年来发现，糖类抗原125(CA125)对子宫腺肌病的诊断具有一定的价值，但其灵敏度和特异度不高。趋化因子是一类细胞分泌的信号蛋白，具有诱导特定的细胞趋化能力，参与细胞病理生理过程[2]。趋化因子配体(CXCL)-12在多种细胞中广泛的表达，与趋化因子受体(CXCR)-4或CXCR-7结合，激活多种细胞信号通路，参与了细胞的病理生理过程[3]。现已知CXCL-12、CXCR-4在子宫内膜异位症中具有重要作用，但是否对子宫腺肌病具有影响仍不清楚[4-5]。本研究通过检测子宫腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平，观察其在诊断子宫腺肌病的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月至2020年1月在本院就诊且病理确诊为子宫腺肌病的96例患者作为子宫腺肌病组，年龄26～56岁，平均(3.86±6.24)岁，体质量指数(BMI)为(23.94±2.15)kg/m2。选取同期在本院行手术治疗且病理诊断为子宫肌瘤的75例患者作为子宫肌瘤组，年龄23～57岁，平均(43.27±5.21)岁，BMI为(23.19±2.06)kg/m2。另选取同期本院体检健康者45例作为健康对照组，年龄25～55岁，平均(43.92±5.28)岁，BMI为(23.62±1.78)kg/m2。纳入标准：(1)子宫腺肌病和子宫肌瘤均经病理证实；(2)均签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会审核通过。排除标准：(1)其他生殖系统疾病如恶性肿瘤和盆腔炎等；(2)3个月内服用性激素类药物；(3)合并内分泌和神经系统疾病；(4)精神性疾病和智力障碍；(5)免疫性和血液性疾病。3组年龄和BMI等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1子宫腺肌病病理分级 根据子宫内膜浸润子宫肌层的不同程度及子宫内膜侵入浅肌层、子宫肌层中部和超过肌层中部分为Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级。

1.2.2痛经程度评估 入院后患者采用视觉模拟评分，根据评分标准总分为0～10分，分数越高疼痛越严重。根据疼痛评分总分分为轻度：0～2分；中度：3～6分；重度：7～10分。

1.2.3血液标本的留取 子宫腺肌病组、子宫肌瘤组患者入院时和健康对照组研究对象同期在清晨抽空腹肘部静脉血约5 mL，将标本静置约30 min予以离心，离心速度3 000 r/min，离心半径为15 cm，离心15 min，留取上清液。

1.2.4血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平检测 采用酶联免疫吸附试验法检测血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平，按照购买的试剂盒说明书操作，采用CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125抗体制成固相抗体，将抗体包被微孔板，并将加入含有CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125的待测样本，形成抗原抗体复合物及酶结合物，在充分温育后进行洗涤，并加入显色剂，并终止反应，在450 nm处测定吸光度，根据吸光度查标准曲线并计算出血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平。所有的试剂盒购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司。

1.2.5观察指标 观察各组血清CXCL-12、 CXCR-4、CXCR-7和CA125水平变化；血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平对子宫腺肌病的诊断效能及其与病理分级、痛经程度和各指标之间的相互关系。

2 结 果

2.1各组血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平比较 子宫腺肌病组血清CXCL-12、CXCR-4和CA125水平明显高于子宫肌瘤组和健康对照组，而血清CXCR-7水平明显低于子宫肌瘤组和健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)；子宫肌瘤组血清CXCL-12、CXCR-4和CA125水平高于健康对照组，而血清CXCR-7水平明显低于健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组血清CXCL-12、CXCR-4、CXCR-7和CA125水平比较

2.2血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平在诊断子宫腺肌病的灵敏度和特异度比较 血清CXCL-12(Z=4.470，P<0.01)、CXCR-4(Z=4.019，P<0.01)和CXCR-7(Z=3.685，P<0.01)水平在诊断子宫腺肌病的效能明显优于CA125，将CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7进行二元Logistic回归分析，方程Y=0.67×XCXCL-12+0.23×XCXCR-4-3.18×XCXCR-7-13.09，CXCL-12+CXCR-4+CXCR-7联合检测的灵敏度为85.4%，特异度为96.0%，AUC为0.953，明显高于单个指标的检测结果[CXCL-12(Z=4.221，P<0.001)、CXCR-4(Z=4.595，P<0.001)和CXCR-7(Z=4.628，P<0.001]，而单个指标的检测结果比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见图1、表2。

图1 血清CXCL-12、 CXCR-4和CXCR-7水平在诊断子宫腺肌病的ROC曲线分析

表2 血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平在诊断子宫腺肌病的效能比较

2.3子宫腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平与病理分级的关系 从表3可知，子宫腺肌病患者血清CXCL-12和 CXCR-4水平随着病理分级升高而升高(P<0.05)，而CXCR-7水平随着病理分级升高而降低(P<0.05)。

表3 子宫腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平与病理分级的关系

2.4子宫腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平与痛经程度的关系 从表4可知子宫腺肌病患者血清CXCL-12和CXCR-7水平随着痛经程度升高而升高(P<0.05)，而血清CXCR-4水平随着痛经程度升高而降低(P<0.05)。

表4 子宫腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平与痛经程度的关系

2.5子宫腺肌病患者血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平的相关性分析 子宫腺肌病患者血清CXCL-12和 CXCR-4水平与CXCR-7呈负相关(r=-0.682、-0.816，P<0.01)，而血清CXCL-12水平与CXCR-4呈正相关(r=0.742，P<0.01)。

3 讨 论

子宫腺肌病是一种雌激素依赖性疾病，CXCL-12是趋化因子CXC亚家族的成员之一，定位于10号染色体，是一种由68个氨基酸组成的小分子细胞因子，具有较高的稳定性[6]。CXCL-12具有两种表达形式CXCL-12a和CXCL-12b，在多种器官中表达，如心脏、肾脏、脾脏和子宫内膜等，这些组织无须炎症刺激，能够持续分泌CXCL-12[7]。CXCL-12的主要功能具有调节血管，促进肿瘤组织侵袭和转移等重要作用；此外，CXCL-12参与了诱导免疫细胞活化、募集和迁移，对机体的免疫平衡具有一定的作用[8-9]。CXCL-12参与血管生成可能与CXCR-4和CXCR-7结合后，启动下游的信号通路，诱导细胞发生增殖、迁移和刺激血管的形成有关[10]。本研究发现子宫腺肌病组血清CXCL-12水平明显高于子宫肌瘤组和健康对照组，并且发现随着病理分级的升高和痛经程度升高出现明显升高，说明CXCL-12参与了子宫腺肌病的病理生理过程。与其他报道结果接近[11]。本研究显示血清CXCL-12>9.24 pg/L时，在诊断子宫腺肌病的灵敏度为70.8%，特异度为88.0%，AUC为0.843，明显高于CA125的AUC。

CXCR-4是由人染色体2q21基因编码7次的跨膜G蛋白偶联受体，其由352个氨基酸组成，广泛存在于各种器官的细胞膜和细胞质中，主要在内皮细胞、白细胞和单核细胞中[12]。CXCR-4与CXCL-12结合后，通过改变自身的构象，导致异三聚体G蛋白活化，激活下游的多条信号通路，引起一系列的生物效应，在血管生产和恶性肿瘤增殖和转移中具有重要作用[13]。本研究显示，子宫腺肌病组血清CXCR-4水平明显高于子宫肌瘤组和健康对照组，并且随着痛经程度和病理分级升高而升高，说明CXCR-4参与了子宫腺肌病的病理生理过程。有研究发现，CXCR-4水平较高可以激活CXCL-12/CXCR-4轴，增加子宫内膜异位症的侵袭性[14-16]。本研究还发现CXCR-4>54.36 pg/mL时，其诊断子宫内膜异位症的灵敏度为65.6%，特异度85.3%，AUC为0.826，说明其在诊断子宫内膜异位症具有重要诊断价值。

CXCR-7定位于2q37上，与CXCR-4具有同源性，与CXCL-12具有高度亲和力[17]。现已知CXCR-7与CXCL-12结合的亲和力较CXCR-4更高，并且CXCL-12与CXCR-7结合后，无法再与CXCR-4结合，但功能上不能介导蛋白偶联，无法激活信号通路[18]。CXCL-12/ CXCR-7信号轴在不同的组织具有不同的效应，在多种肿瘤的血管内皮细胞和肿瘤细胞中高表达，促进肿瘤的进展，但在子宫内膜异位症中并未促进病情发展，并且发现CXCR-7还可以通过内吞形式进入人体的CXCL-12微环境中，发挥对CXCR-4的拮抗作用[19-20]。本研究显示,子宫腺肌病组血清CXCR-7水平明显低于子宫肌瘤组和健康对照组，并且发现随着子宫腺肌病的病理分级和痛经程度升高而降低，说明血清CXCR-7水平在子宫腺肌病发生发展过程中具有重要作用。本研究发现，CXCL-12+CXCR-4+CXCR-7联合检测的灵敏度为85.4%，特异度为96.0%，AUC为0.953，明显优于单个指标CXCL-12、CXCR-4和 CXCR-7，并且发现血清CXCL-12和 CXCR-4水平与CXCR-7呈负相关，而血清CXCL-12水平与 CXCR-4呈正相关，说明3个指标间具有联系，且具有明显的互补性。

总之，血清CXCL-12、CXCR-4和CXCR-7水平与子宫腺肌病的严重程度具有密切关系，其联合检测在诊断子宫腺肌病方面具有较高的灵敏度和特异度。