麻雪梦,曹阳
(广西医科大学附属口腔医院 病理科,南宁)
涎腺腺样囊性癌(SACC)是一种较常见的口腔颌面部恶性肿瘤,约占所有头颈部肿瘤的1%和所有唾液腺肿瘤的10%,具有生长速度缓慢、侵袭性强,术后可见局部复发和远处转移,常侵犯周围神经等独特的生物学行为[1-2]。近年来的研究表明,CD66b与多种恶性肿瘤的病变密切相关[3-6]。本研究采用PV-6000免疫组织化学检测技术对已确诊的51例涎腺腺样囊性癌标本和35例正常涎腺组织中CD66b的表达进行观察,探讨CD66b的表达与涎腺腺样囊性癌的关系。
实验组标本采集:收集广西医科大学附属口腔医院病理科2016年3月至2021年1月的涎腺腺样囊性癌手术切除病理组织标本51例(门诊10例+住院41例),男29例,女22例,年龄21~75岁,平均49岁,≥49岁28例,<49岁23例。局部有神经侵犯者6例,无神经侵犯者45例;颈淋巴结转移6例,无颈淋巴结转移35例。
对照组标本采集:正常涎腺组织35例。
CD66b兔多克隆抗体购自Abcam公司,PV-6000试剂盒、DAB显色液购自北京中杉金桥公司。所有组织标本均严格按常规处理,将组织蜡块连续切片层厚4 μm。60 ℃烤片3 h,脱蜡、梯度酒精复水,高压抗原碱修复,一抗4 ℃过夜孵育,37 ℃20 min孵育二抗,DAB显色和苏木素染液复染,脱水,透明,封片,镜下观察。
CD66b阳性信号主要定位于细胞膜和细胞质,呈棕黄色或黄色。评分标准为:选取6个具有代表性的高倍镜视野对癌组织的染色率及染色强度进行评分。染色率:0%~25%(1分),25%~50%(2分),50%~75%(3分),75%~100%(4分);染色强度:蓝色(0分),浅黄色(1分),黄色(2分),棕黄色(3分)。每个视野的评分=染色率X染色强度,取平均值作为该片子最终的免疫组化评分。由于本组病例数有限,故将评分≥3分表示高表达,评分<3分表示低表达。
采用SPSS 22.0统计学软件进行统计分析,计数资料用率(%)表示,采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
阳性表达产物:CD66b的染色部位主要定位于胞质和包膜中。以免疫组化PV-6000技术检测的CD66b在SACC组织及正常涎腺组织中的表达情况见图1、图2。
图1 CD66b在SACC组织中的表达(×400)
图2 CD66b在正常涎腺组织中的表达(×400)
CD66b在SACC组织中的表达低于CD66b在正常涎腺组织中的表达,两者的差异有统计学意义(P<0.05),见表1。
在SACC组织中,CD66b的表达水平与患者性别、年龄、颈淋巴结转移和神经累犯无关(P>0.05),见表1。
表1 SACC组织及正常涎腺组织中CD66b的表达情况及与临床病理特征之间的相关性(n)
CD66b为单链、gpi锚定、高糖基化蛋白,分子量为95 kDa,是人癌胚Ag(CEA)家族成员。以往的研究发现在中性粒细胞和嗜酸性粒细胞上可看到CD66b蛋白的表达,它被认为是粒细胞“激活标记物”[7-9]。有研究显示CD66阳性中性粒细胞的表达与乳腺癌的发生发展密切相关[10-11]。
本研究通过对35例正常涎腺组织进行免疫组化检测发现,CD66b在正常涎腺组织中呈稳定的阳性或强阳性表达,这意味着CD66b可能在维持正常涎腺组织的结构和功能方面发挥关键的作用,机制尚不清楚。同时本研究还发现CD66b在涎腺腺样囊性癌中表达较弱或表达缺失,与其在正常涎腺组织表达相比有显著性差异,表明CD66b在涎腺腺样囊性癌组织中表达的异常可能与发病的状态有关,可能可作为一个潜在的标记物用于区分SACC组织和正常涎腺组织。本研究对CD66b的表达与临床病理特征之间的相关性进行分析发现CD66b的表达水平与涎腺腺样囊性癌患者的性别、年龄、颈淋巴结转移和神经累犯无显著差异,这表明CD66b可能与涎腺腺样囊性癌的进展没有显著性相关。
本课题证实CD66b可能可作为一个潜在的标记物用于区分SACC组织和正常涎腺组织,CD66b不仅存在于粒细胞中,也存在于涎腺组织中。本研究下一步将继续增加样本量来进一步验证CD66b与涎腺腺样囊性癌进展的关系。