掂中风汤外擦剂1号皮肤刺激性研究

邱峰源 彭卓

摘要：目的：研究掂中风汤外擦剂1号重复用药对小鼠皮肤的刺激性。方法：将80只TCR级小鼠随机分三组，药物组以掂中风汤外擦剂1号，空白（阴性）对照组以相同体积的质量分数为0.9%的生理盐水（NaCL溶液），对照组（阳性）以相同体积丙酮酸加2，4-二硝基氯苯（2-4dinitro-chlorobenzene，DNCB），每天1次，用药1周，分别在第1、3、7天观察记录小鼠死亡数和皮肤刺激分值。结果：中药组与空白对照组的刺激分值比较无显著差异（P>0.05）;阳性对照组的刺激分值均较中药组和空白对照组显著升高（P<0.01）。皮肤破损时，阳性对照组和中药组的刺激分值均较皮肤完整时显著升高，而空白对照组的刺激分值仅在用药第1天较皮肤完整时高（P<0.05）。结论：掂中风汤外擦剂1号外用具有较好的安全性。皮肤完整时，其对皮肤刺激性小;皮肤破损早期稍有刺激性，建议在修复破损皮肤后再使用。

关键词：掂中风汤外擦剂1号;外用;皮肤刺激性

掂中风汤外擦剂1号为湘潭金侨医院院内制剂，由姜黄、当归、沉香、檀香、徐长卿、延胡索、桑枝、桂枝等中药组成，辅料植物油，功能疏风通络，行气活血，散寒止痛。临床主要适用于中风病各期患者，临床表现为一侧肢体感觉减退，麻木不仁，关节无力等症状。作为外用剂型，需要考察其对皮肤的刺激性。本研究通过掂中风汤外擦剂1号作用于小鼠完整和破损皮肤的观察，评估其外用时的刺激性，从而为其临床安全用药提供实验依据。

1 材料

1.1 药材与试剂

掂中风汤外擦剂1号（姜黄、当归、沉香、檀香、徐长卿、延胡索、桑枝、桂枝，生药浓度100%），DNCB（江苏地浦科技股份有限公司，批号20200811324），丙酮酸（天津市四友精细化学品有限公司，批号2019030421），甲醇（天津市四友精细化学品有限公司，批号2019102415）、乙醇（天津市四友精细化学品有限公司，批号2019110131）为分析纯。

1.2 实验动物

ICR级别昆明小鼠80只，雌雄各半（180±10g），由湖南中医药大学医学实验动物中心提供（批号：430172000172）。实验动物在观察期间均在实验动物房，其室温控制在22±4℃，湿度控制在60±10%，ICR小鼠自由饮食，适应性饲养3天。

2 方法

2.1 分组

随机将小鼠分为8组，每组10只，各组小鼠雌雄各半。

2.2 掂中风汤外擦剂对ICR小鼠完整皮肤刺激性实验

实验开始前24h将80只ICR小鼠两侧及背部先剪毛后脱毛，去毛范围左、右各约3.5cm×3.5cm。ICR小鼠皮肤刺激性实验采用同体自身左右对照法，左侧脱毛区为阳性对照，右侧脱毛区使用掂中风汤外擦剂1号。取掂中风汤外擦剂1号（受试药）0.2mL涂在左侧，用无毒聚乙烯薄膜覆盖，固定后持续30min，30min后以无菌水洗去药物，每天上午1次，连续用药观察7d。在整个实验期间如有ICR小鼠死亡时，应立刻进行动物尸检观察和病理检查。

2.3 掂中风汤外擦剂对ICR小鼠破损皮肤刺激性实验

ICR小鼠破损皮肤的制备：药前24h，用75%酒精消毒ICR小鼠裸露皮肤部位，用消毒针头在剃毛部位做“井”字状划划痕，划破皮肤，以有组织液和血液渗出为度。ICR小鼠左右两侧皮肤破损程度基本一致。对ICR小鼠破损皮肤刺激性实验采用与对ICR小鼠完整皮肤刺激性实验以相同方法进行实验。

2.4 实验指标观察

按表1进行皮肤反应评分，以受试动物积分的平均值进行综合评价，按表2判定皮肤刺激强度。皮肤刺激性评分标准及评价标准：皮肤反应积分=红斑分值+水肿分值。

2.5 统计学方法

采用Graphpad Prism 8.0处理所得数据，实验数据采均值±标准差（x?+SD）表示，实验动物结果书记分析组间比较采用单因素方差分析检验，有显著差异（P>0.05）。

3 结果

各组ICR小鼠皮肤小反复用药皮肤刺激分值变化情况的刺激情况见表2和图1～6。

3.1 不同时间ICR小鼠皮肤刺激性结果组间比

用药7d内，掂中风汤外擦剂1号与NaCL溶液对ICR小鼠皮肤的皮肤反应积分比较无明显差异（P>0.05）;第3和第7天的皮肤反应积分较空白组和药物组显著升高（P<0.01）。

3.2 ICR小鼠皮肤完整性对刺激分值的影响

当ICR小鼠的皮肤破损时，第1，3，7天的皮肤反应积分过敏组均较皮肤完整时显著升高（P<0.01）;药物组第1，3天的皮肤反应积分较皮肤完整时显著升高（P<0.05），而空白组的皮肤反应积分仅在用药第1天较皮肤完整时显著升高（P<0.05）。

4 讨论

本动物实验结果表明，掂中风汤外擦劑1号对ICR小鼠的刺激反应为无刺激性反应类型，具有良好的安全性。在整个皮肤刺激性实验观察期间，ICR小鼠没有出现1例死亡，说明掂中风汤外擦剂1号对皮肤的影响基本是无毒性的。掂中风汤外擦剂1号方即使在皮肤破损的情况下，也并未达到DNCB所造成的严重程度，所以掂中风汤外擦剂1号外用，无论机体皮肤完整与否，均可安全使用;但若机体皮肤存在严重破损，使用掂中风汤外擦剂1号可能会增加对机体皮肤的刺激性，故建议临床上慎重使用。

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作者简介：邱峰源（1981— ），男，副主任医师，现为湘潭金侨医院康复科主任，主要从事脑中风防治及康复工作。

通讯作者：彭卓（1979— ），男，医学硕士，副主任医师，湘潭医卫职业技术学院院专任教师兼附属医院（湘潭市第三人民医院）急诊科主任，主要从事临床医学教学和急诊临床诊疗工作。