纳氏试剂法测定水质氨氮重复性限和 再现性限的实际应用

郭双双(宁波中诚检测技术服务有限公司，浙江 余姚 315408)

0 引言

HJ 535—2009《水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法》标准中给出了重复性限和再现性限[1-2]两个术语，标准描述如下：

准确度和精密度：氨氮浓度为1.21 mg/L的标准溶液，重复性限为0.028 mg/L，再现性限为0.075 mg/L，回收率在94%～104%。氨氮浓度为1.47 mg/L的标准溶液，重复性限为0.024 mg/L，再现性限为0.066 mg/L，回收率为95%～105%。作为非研究性检测机构，可以不研究重复性限和再现性限的来源。但是重复性限和再现性限的验证，对一个实验室某个时期内测试结果的稳定性具有实际应用意义，我们有必要进行重复性限和再现性限的验证试验。

1 术语与定义

(1)准确度，指分析和测量结果与真值之间的接近程度。

(2)精密度，指多次测定结果互相接近的程度。

(3)重复性条件[1]是在同一实验室，由同一操作员在短时间内，依据相同的方法，使用相同的设备对同一被测对象相互独立进行的实验条件。

(4)重复性限，用r表示，是指一个数值在重复性条件下，两个测试结果的绝对差以95%的概率小于或等于此数。

(5)再现性条件[3]不同的操作员，使用不同的测试设备，依据相同的测试方法，对同一测试对象相互独立进行的测试条件。

(6)再现性限，用R表示，是指一个数值在再现性条件下，两个测试结果的绝对差以95%的概率小于或等于此数。

(7)限的确定

根据GB/T 6379.6—2009中4.1.2的规定，对正态分布95%的概率水平下，ƒ=1.96，将ƒ 2修约为2.8。

在重复性条件下或再现性条件下得到的两个单一测试结果进行检验时，应与重复性限r=2.8σr或再现性限R=2.8σR进行比较。

2 实验部分

2.1 实验原理

游离态的氨或铵离子形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物，在波长420 nm处测量络合物吸光度，其光度与水中氨氮含量成正比。

2.2 实验主要仪器和试剂

紫外可见分光光度计：T6新世纪；纳氏试剂[4]：二氯化汞-碘化钾-氢氧化钾溶液；酒石酸钠溶液：500 g/L；氨氮标准溶液：GSB05-1145-2000/500 mg/mL。

2.3 实验过程

2.3.1 标准溶液制备

氨氮标准工作液(10 mg/L)：取5.00 mL氨氮标准溶液于250 mL容量瓶中，用纯水定容至刻度，摇匀。

2.3.2 精密度试验用标准溶液

氨氮浓度为1.21 mg/L和1.47 mg/L的标准溶液：分别量取12.1 mL和14.7 mL氨氮标准工作液(2.3.1)于100 mL容量瓶中，用纯水定容至刻度，摇匀。

备注：最好买到有证的标准质控样品，如果买不到，则自行配置。

2.3.3 标准曲线制备

纳氏试剂法标准曲线[5-6]：分别量取0、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL氨氮标准工作液于8个50 mL比色管中，加纯水定容至刻度。加入1.0 mL酒石酸钾钠溶液，混合均匀，然后再加入纳氏试剂1.5 mL，混合均匀，静置10 min后，在波长420 nm下，用10 mm比色管，以纯水作参比测定吸光度，绘制标准工作曲线。

2.3.4 标准工作曲线绘制

纳氏试剂法氨氮标准工作曲线如图1所示。

图1 纳氏试剂法氨氮标准工作曲线

2.4 精密度试验的验证

试验方法：分别量取5.0 mL氨氮浓度为1.21 mg/L的标准溶液和氨氮浓度为1.47 mg/L的标准溶液于50 mL比色管中，加纯水定容至刻度。加入1.0 mL酒石酸钾钠溶液，混合均匀，再加入纳氏试剂1.5 mL，混合均匀，静置10 min后，在波长420 nm下，用10 mm比色管，以纯水作参比，测量吸光度。分别对两种浓度的标准溶液进行两组测定[3]，测试结果数为3次，求出3次测试的算术平均值。

对1.21 mg/L的标准溶液，其临界差[7]计算如下：

表1 精密度试验吸光度结果

表2 精密度试验结果

根据实际工作情况，我们只做了一个实验室测试结果的验证试验，所以在此只用重复性限进行比较。

3 结语

HJ 535—2009《水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法》标准中给出了重复性限和再现性限两个术语，那么重复性限和再现性限的实际应用也是实验室内部质量控制方法之一。

在进行精密度试验验证过程中，尽量进行多次平行测定。如果测试结果的算术平均值差的绝对值大于标准中的重复性限或再现性限，建议查找原因，对实验试剂、实验仪器、环境条件以及操作步骤进行全面查找，然后再进行新试验，之前的数据应弃之不用。