百香果种苗快繁技术研究

百香果组培快繁是大量生产植物种苗的主要手段。本研究以百香果为对象，探究百香果初代培养、增殖培养、生根培养到炼苗移栽等适宜的培养基配方，完善并优化其组培快繁技术，以期为百香果产业的发展提供技术支撑。

1材料与方法

1.1外植体灭菌、接种及初代培养

以自选育的产量和质量性状均较好的的黄金百香果嫩茎作为外植体，使用70%的乙醇对外植体浸泡1 min，之后使用0.1%HgCl2对外植体进行进一步的灭菌处理，浸泡完成之后使用无菌水对外植体进行3～5次的清洗。灭菌处理完成之后将外植体进行裁剪，每段需要保留1～2个腋芽茎段。将每个裁剪好的茎段接种到MS+ 6-BA 0.5～1.0 mg/L+IAA 0.05～0.1 mg/L培养基上进行培养管理，每30瓶进行一次处理，且每一个瓶子均需要进行一个外植体的接种，按照此要求进行3次重复处理，后期每间隔一周进行一次生长观察及记录，并需要及时将污染材料进行清除。本试验在实际操作过程中的最低温度不可低于25℃，最高温度不可高于31℃，每天光照时间不可少于10 h，不多于12 h，光照强度需要保持在40μmol/m2·s。

1.2百香果增殖培养

将经过初代培养的黄金果培养材料，接种于含有不同浓度配比的6-BA和IAA的MS培养基中，试验采取正交试验设计，需要进行3次相同的实验操作，接种完成之后的30 d之内需要每间隔10 d进行一次材料生长情况记录，并对不同时期的增长系数及长势进行统计。生根培养时选择的主要材料为增殖培养所得的芽苗或丛生苗，将其放入不同浓度NAA的1/2MS培养基中实现生根培养处理，实际处理时主要为3个方式，每种培养方式包含10瓶，每瓶中有无根的百香果苗2株，重复进行3次实验后方可对数据进行统计，所有苗株接种完成之后均需要进行20 d的培养，并对幼苗的生长情况进行观察和记录。打开百香果组培瓶瓶盖，将百香果组培苗放在大棚中进行5～7 d炼苗，炼苗完成后需要将根苗取出并将根部的培养基完全去掉并清洗干净，将处理之后的苗株移栽到消过毒的移栽基质（腐殖土：泥炭土=1：2）的营养杯（12 cm×12 cm）中，在此环境下连续培养30 d，培养结束之后统计成活率。

2结果与分析

2.1外植体灭菌、接种与初代培养

百香果外植体经消毒灭菌后，接种于MS+ 6BA 0.5～1.0 mg/L+IAA 0.05～0.1 mg/L培养基中，光照培养20 d后对试验结果进行统计，结果发现，随着升汞灭菌时间的延长，其成活率先上升后下降，升汞处理8 min时成活率最高，为48.89%。外植体部位的选择对灭菌结果影响很大，老化的茎段茎秆中空，灭菌后污染率和死亡率都比较高；较嫩的顶芽及其下端1～2芽部位，升汞灭菌后容易褐化死亡；试验结果显示，最适外植体部位为顶芽之下第3～第6腋芽所在茎节，这一部位的茎节多数呈半纤维化状态，不如顶芽过于嫩弱，也尚未长老出现中空，在适宜的升汞灭菌时间下，灭菌存活率较高。

2. 2百香果的增殖培养

以6-BA（0.5～1.5mg/L）与IAA（0.1～0.3mg/L）不同浓度配比进行黄金百香果组培苗的增殖培养，在培养30 d后，统计发现当6-BA浓度为0.5 mg/L时，增殖效果差，增殖系数在2.0以下，植株健壮，叶片宽大，IAA浓度提高也不能使其增殖效果显著提高。处理5（6-BA浓度1.0 mg/ L、IAA浓度0.2 mg/L）的增殖系数最高，达到5.6，且与其他处理达到极显著水平（表1）；相对于其他处理其植株叶片鲜绿，丛生芽较多，且植株长势旺盛。综上，处理5即培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L比较适合作为黄金百香果增殖培养基，培养30 d，增殖系数为5.60。

2.3百香果生根培养

将高度5 cm左右的百香果丛生芽苗从基部剪下，转入含有不同浓度NAA（0.2、0.3、0.4 mg/L）的1/2MS培养基中培养，20 d后对结果进行观测并统计生根率。根据表2的统计结果显示百香果生根培养，处理2在生根数方面与其他2个处理差异极显著，平均生根数量为5条。3个处理在根长和生根率方面没有显著差异。经过20 d，根长达到4 cm，生根率达到95%以上。因此，百香果的生根培养为1/2MS+NAA0.3 mg/L+糖20.0 g/L+卡拉胶3.8 /L。

2.4百香果炼苗移栽

在大棚中进行5～7 d炼苗，炼苗完成后需将根苗取出，在此环境下连续培养14d，成活率90%。

基金项目：桂林市科学研究与技术开发计划项目（20170108-2，20190215-2）；广西喀斯特植物保育与恢复生态学重点实验室项目（19-050-6）

（1广西壮族自治区桂林市临桂区农业科学研究所何秋婵；2广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所苏江，黄宁珍；3廣西壮族自治区南边山镇农业服务中心莫庚生）