PIVKA-Ⅱ与PTEN联合检测对肝细胞癌患者5年死亡率的预测价值研究

范少峰 张辉 赵辉 汪勇 苏华斌

【摘要】 目的：探討异常凝血酶原（PIVKA-Ⅱ）及磷酸酶-张力蛋白同源物基因（PTEN）联合检测对肝细胞癌（HCC）患者5年死亡率的预测价值。方法：回顾性分析2014年1月-2015年1月本院收治并进行肝癌根治术的80例HCC患者的临床资料。将5年内死亡的34例设为死亡组，存活的46例设为存活组。取HCC肿瘤组织，检测入组患者样本中PIVKA-Ⅱ及PTEN表达。比较两组的临床相关资料，多因素logistic回归分析HCC患者5年内死亡的影响因素，ROC曲线分析PIVKA-Ⅱ及PTEN在HCC患者预后评估中的价值;进一步用统计学方法分析PIVKA-Ⅱ与PTEN联合检验对HCC患者预后评估的价值。结果：两组年龄、TNM分期、肿瘤直径比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;死亡组患者肿瘤组织中AFP、PIVKA-Ⅱ均明显高于生存组，PTEN含量低于生存组，差异均有统计学意义（P<0.05）。多因素logistic回归模型分析结果显示AFP、PIVKA-Ⅱ、PTEN是HCC患者5年内死亡的影响因素（P<0.05）。ROC曲线分析显示PIVKA-Ⅱ及PTEN联合检测预测HCC患者5年内死亡率的灵敏度和特异度优于单一检测PIVKA-Ⅱ或PTEN。结论：PIVKA-Ⅱ及PTEN联合检测可提高对HCC术后患者5年生存率的预测价值，对临床具有一定的参考价值。

【关键词】 肝细胞癌 磷酸酶-张力蛋白同源物基因 异常凝血酶原 联合检测

Predictive Value of PIVKA-Ⅱ and  PTEN Combined Detection in 5-year Mortality of Patients with Hepatocellular Carcinoma/FAN Shaofeng， ZHANG Hui， ZHAO Hui， WANG Yong， SU Huabin. //Medical Innovation of China， 2021， 18（12）： 0-092

[Abstract] Objective： To investigate the predictive value of abnormal prothrombin （PIVKA-Ⅱ） and phosphatase-tensin homologue gene （PTEN） in 5-year mortality of patients with hepatocellular carcinoma （HCC）. Method： The clinical data of 80 patients with HCC who underwent radical hepatectomy in our hospital from January 2014 to January 2015 were retrospectively analyzed. 34 cases died within 5 years were set as death group and 46 cases survived were set as survival group. The expressions of PIVKA-Ⅱ and PTEN were detected in HCC tissues， the clinical data of two groups were compared， multivariate logistic regression analysis was used to analyze the influencing factors of death in HCC patients within 5 years， ROC curve was used to analyze the prognostic value of PIVKA-Ⅱ and PTEN in HCC patients. The value of PIVKA-Ⅱ combined with PTEN in the prognosis of HCC patients was further analyzed by statistical method. Result： There were no significant differences in age， TNM stage and tumor diameter between two groups （P>0.05）. The levels of AFP and PIVKA-Ⅱ in tumor tissue of death group were significantly higher than those of survival group， and the level of PTEN was lower than that of survival group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Multivariate logistic regression model analysis showed that AFP， PIVKA-Ⅱ and PTEN were the influencing factors for the death of HCC patients within 5 years （P<0.05）. ROC curve analysis showed that the sensitivity and specificity of combined detection of PIVKA-Ⅱ and PTEN were better than that of single detection of PIVKA-Ⅱ or PTEN. Conclusion： The combined detection of PIVKA-Ⅱ and PTEN can improve the predictive value of 5-year survival rate of HCC patients， which has a certain reference value for clinical.

[Key words] Hepatocellular carcinoma PTEN PIVKA-Ⅱ Combined detection

First-authors address： Eighth Affiliated Hospital of Guangdong Medical University， Guangzhou 510440， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.12.021

肝癌多起病隐匿，大多数患者直至出现症状方到医院进行诊疗，错过了治疗的最佳时机，造成患者术后复发率高等不良影响[1]。肝细胞癌（HCC）是原发性肝癌的一种，我国HCC发病例数占原发性肝癌患者整体的90%，占世界HCC总例数的55%，其中大多数患者有乙型肝炎或肝硬化病史[2]。目前，肝细胞癌临床治疗仍以手术和放疗为主，但治疗效果仍不尽人意，有研究显示，部分地区患者术后中位生存时间仅17个月[3]。因此，寻找对HCC患者术后生存率进行精准预测的方法尤为重要。已有研究显示，异常凝血酶原（PIVKA-Ⅱ）与磷酸酶-张力蛋白同源物基因（PTEN）在肝癌的发生及发展中起重要作用[4-5]，其中PIVKA-Ⅱ在肝癌组织中呈高表达，PTEN则呈低表达，有可能对HCC患者术后3年内死亡率进行预测。本研究回顾性分析2014年

1月-2015年1月本院收治并进行肝癌根治术的HCC患者80例为研究对象，探讨PIVKA-Ⅱ及PTEN联合检测对HCC患者5年生存率的预测价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般資料 回顾性分析2014年1月-2015年1月本院收治并进行肝癌根治术的80例HCC患者的临床资料。纳入标准：所有入组患者均需符合2019年版《原发性肝癌诊疗规范》[6];年龄≥18岁;可进行有效沟通;均确诊为HCC后，行肝癌根治术，部分患者必要时进行放疗治疗;均为单发HCC。排除标准：合并高血压病及2型糖尿病;并发其他肿瘤;出现门静脉瘤栓;病例信息不全;无法按时回访。将5年内死亡的34例设为死亡组，存活的46例设为存活组。本研究通过本院伦理委员会审核，符合医学伦理学和国际医学研究惯例。

1.2 样本取样及目标蛋白检测 取各组患者肿瘤组织最中间部分样本，进行冷研磨，并提取总蛋白，制作悬浊液，采用ELISA法检测样本中PTEN蛋白含量，试剂盒购自北京六一公司，检测方法严格按照说明书进行;甲胎蛋白（AFP）检测采用罗氏E601型全自动电化学发光分析仪检测;PIVKA-Ⅱ采用富士公司Lumipiles G1200全自动化学发光免疫分析系统检测。

1.3 观察指标 所有患者信息均由高年资主治医师及以上职称专业医务人员收集完整的临床资料，比较生存组和死亡组患者肿瘤样本中PIVKA-Ⅱ与PTEN蛋白含量，分析两组PIVKA-Ⅱ及PTEN与HCC患者临床病理学特征关系，ROC曲线分析PIVKA-Ⅱ及PTEN在HCC患者预后评估中的价值;进一步用统计学方法分析PIVKA-Ⅱ与PTEN联合检验对HCC患者预后评估的价值。

1.4 统计学处理 采用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。PIVKA-Ⅱ及PTEN对HCC患者的5年生存率诊断效能采用ROC曲线分析，多因素logistic回归模型分析HCC患者5年内死亡的影响因素。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 死亡组男20例，女14例;年龄41～63岁，平均（56.33±7.25）岁;TNM分期：Ⅰ期6例，Ⅱ期11例，Ⅲ期17例;肿瘤直径≤5 cm者17例，肿瘤直径>5 cm者19例。存活组男29例，女17例;年龄38～65岁，平均（57.12±9.63）岁;TNM分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期16例，Ⅲ期22例;肿瘤直径≤5 cm者21例，肿瘤直径>5 cm者25例。两组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 两组临床相关资料比较 两组年龄、TNM分期、肿瘤直径比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;死亡组患者肿瘤组织中AFP、PIVKA-Ⅱ均明显高于生存组，PTEN含量低于生存组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.3 多因素logistic回归分析HCC患者5年内死亡的影响因素 将所有入组患者进行多因素logistic回归模型分析，变量赋值：AFP、PIVKA-Ⅱ、PTEN均采用实测值，年龄≤50岁=0，年龄>50岁=1;TNM分期Ⅰ～Ⅱ期=0，TNM分期Ⅲ期=1;肿瘤直径≤5 cm=0，肿瘤直径>5 cm=1。结果显示：年龄、TNM分期及肿瘤直径均非HCC患者5年内死亡的影响因素，而AFP、PIVKA-Ⅱ、PTEN是HCC患者5年内死亡的影响因素（P<0.05）。见表2。

2.4 HCC患者肿瘤组织中PIVKA-Ⅱ及PTEN检测对HCC患者5年内死亡率的ROC曲线预测值 对PIVKA-Ⅱ及PTEN进行ROC曲线分析结果显示：PIVKA-Ⅱ在HCC患者5年内死亡的特异性优于PTEN，灵敏度低于PTEN。多元逻辑回归算得PIVKA-Ⅱ及PTEN联合预测HCC患者5年内死亡时各因子前的系数（PIVKA-Ⅱ & PTEN）=5.267×PIVKA-Ⅱ+5.113×PTEN-13.682。PIVKA-Ⅱ及PTEN联合检测灵敏度和特异度均优于单一检测PIVKA-Ⅱ、PTEN检测。见图1和表3。

3 讨论

HCC虽然手术成功率高，但由于其易发生血行性转移导致复发率较高，有研究报道，原发性肝癌5年生存率仅为50%[7]。本研究回顾性分析的80例HCC患者中，死亡34例，占入组患者的42.5%，与文献[7-9]报道相近，但死亡率略低，可能由于本研究纳入的患者均为单发HCC，肿瘤均为单一起源，另一方面排除出现门静脉瘤栓者，这均可能是导致HCC患者5年死亡率略低的原因。

PIVKA-Ⅱ是一种维生素K缺乏诱导蛋白，对肝癌具有较高的特异性，尤其对于AFP阴性肝癌患者的特异性仍具有良好的临床参考价值，有希望成为新的肝癌肿瘤标记物[10-11]。辛文瀚等[12]对PIVKA-Ⅱ用于肝癌诊疗的研究进展进行综述，认为PIVKA-Ⅱ不仅对肝癌的诊断价值较高，并且在不同肿瘤分期、不同肿瘤直径患者血清中存在差异性表达[13]，但本研究对入组患者局限性较强，且入组例数较少，仅入组TNM分期Ⅰ～Ⅲ期患者，故而对TNM分期及不同肿瘤直径并未检测出存在差异性表达。PTEN具有双重磷酸酶活性，对肝癌具有抑制作用，其在多种肝癌中均呈低表达，导致肿瘤细胞粘附性不强，易转移、分化，并且近年来研究发现，其对肿瘤预后评估具有一定的参考价值[14-15]。有基础研究显示，PTEN可通过调节PI3K/AKT/mTOR信号通路或PTEN/AKT/SGK1信号通路调节肝癌细胞增殖能力[16-17]。近期研究显示，血清、肿瘤组织中多种因子或miRNA联合检测，可提高对肝癌的诊断效能，对患者转归亦有一定参考价值[18-20]。

本研究首先通过临床病理学特征分析，证实PIVKA-Ⅱ及PTEN在HCC术后5年死亡及生存患者肿瘤组织中的表达存在差异，死亡组患者PIVKA-Ⅱ含量升高，PTEN含量降低，并且通过多因素logistic回归分析证实PIVKA-Ⅱ及PTEN是HCC术后患者5年内死亡的独立影响因素。本团队最后采用多元逻辑回归算得PIVKA-Ⅱ及PTEN联合预测HCC患者5年内死亡率时各因子前的系数，并ROC曲线分析PIVKA-Ⅱ及PTEN联合检测对HCC术后患者5年内死亡率的预测评估价值，结果证实，PIVKA-Ⅱ及PTEN联合检测AUC值为0.87，95%CI（0.79，0.93），灵敏度和特异度均优于单一检测PIVKA-Ⅱ或PTEN。说明PIVKA-Ⅱ及PTEN联合检测可弥补单一检测灵敏度和特异度不佳的缺点，做到1+1>2的临床诊断效能。

综上所述，PIVKA-Ⅱ及PTEN联合检测可提高对HCC术后患者5年生存率的预测价值，可对患者预后做出有效评估，有可能成为预测患者生存周期重要的参考标准之一。

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（收稿日期：2021-03-01） （本文编辑：姬思雨）