免疫性血小板减少性紫癜患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平变化及其与预后的关系

蒋玲 钟丽丽 廖龙跃

【摘要】 目的：探討免疫性血小板减少性紫癜（ITP）患儿血小板相关抗体（PAIgG、PAIgM、PAIgA）水平变化及其与预后的关系。方法：回顾性分析本院2017年1月-2020年9月82例ITP患儿的临床资料，并将其作为研究组，另选取本院同期体检的50例健康儿童作为对照组。研究组患儿根据病情严重程度分为轻度组（n=19）、中度组（n=34）和重度组（n=29），并根据预后情况分为预后良好组（n=65）和预后不良组（n=17）。采集各组空腹静脉血，采用酶联免疫吸附法检测各组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平，分析ITP患儿PAIgG、pAIgM、PAIgA水平变化，使用ROC曲线分析其与预后的关系。结果：研究组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。不同病情严重程度ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。重度组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均高于中度组和轻度组，中度组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均高于轻度组，差异均有统计学意义（P<0.05）。预后良好组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均低于预后不良组，差异均有统计学意义（P<0.05）。由ROC曲线可知，PAIgG、PAIgM、PAIgA三者联合预测ITP患儿的AUC为0.901，高于三者单独预测的0.724、0.715、0.710（P<0.05）。结论：ITP患儿PAIgG、pAIgM、PAIgA水平升高，三者与病情严重程度及预后相关，可作为临床评估预后的参考指标。

【关键词】 免疫性血小板减少性紫癜 血小板抗体 预后

Changes of PAIgG， PAIgM and PAIgA Levels in Children with Immune Thrombocytopenic Purpura and Their Relationship with Prognosis/JIANG Ling， ZHONG Lili， LIAO Longyue. //Medical Innovation of China， 2021， 18（12）： 0-089

[Abstract] Objective： To explore the changes of platelet-related antibodies （PAIgG， PAIgM， PAIgA） levels in children with immune thrombocytopenic purpura （ITP） and their relationship with prognosis. Method： The clinical data of 82 children with ITP in our hospital from January 2017 to September 2020 were retrospectively analyzed， and they were selected as the research group， and 50 healthy children who underwent physical examination in the same period in our hospital were selected as the control group. The children in the study group were divided into mild group （n=19）， moderate group （n=34） and severe group （n=29） according to the severity of the disease. According to the prognosis， they were divided into good prognosis group （n=65） and poor prognosis group （n=17）. Fastening venous blood was collected in each group， and the levels of PAIgG， PAIgM and PAIgA in each group were detected by ELISA. Changes in PAIgG， PAIgM and PAIgA levels in ITP children were analyzed， and the relationships between PAIgG， PAIgM and PAIgA and prognosis were analyzed by ROC curve. Result： The levels of PAIgG， PAIgM and PAIgA in the study group were higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Comparison of PAIgG， PAIgM and PAIgA levels in ITP children with different severity of disease， the differences were statistically significant （P<0.05）. The levels of PAIgG， PAIgM and PAIgA in severe group were higher than those in moderate group and mild group， and the levels of PAIgG， PAIgM and PAIgA in moderate group were higher than those in mild group， the differences were statistically significant （P<0.05）. The levels of PAIgG， PAIgM and PAIgA in the good prognosis group were lower than those in the poor prognosis group， the differences were statistically significant （P<0.05）. According to the ROC curve， the AUC of PAIgG， PAIgM and PAIgA in children with ITP was 0.901， which was higher than 0.724， 0.715 and 0.710 of the single prediction of three （P<0.05）. Conclusion： The levels of PAIgG， PAIgM and PAIgA increase in ITP children， which are correlated with the severity of the disease and prognosis， and could be used as a reference index for clinical evaluation of prognosis.

[Key words] Immune thrombocytopenic purpura Platelet antibody Prognosis

First-authors address： Xinyu Peoples Hospital， Xinyu 338000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.12.020

免疫性血小板减少性紫癜（ITP）是巨噬细胞及血小板在免疫紊乱作用下生成减少而引起的获得性自身免疫性出血性疾病，患儿临床以血小板减少、黏膜及皮肤自发性出血等为主要表现[1-2]。近年来我国ITP发病率呈升高趋势，但其发病具体机制仍处于研究中，临床致力于寻找诊断及预测ITP预后的可靠指标[3]。血小板相关抗体（PAIg）是临床诊断出血性疾病的重要指标，多项报道均显示，大部分ITP患儿会出现PAIg水平升高，其中包括PAIgG、PAIgM及PAIgA[4-6]。随着医学技术的发展，临床对出血性疾病与PAIg关系的研究不断开展，但关于PAIg与ITP患儿病情严重程度及预后关系的报道较少。基于此，本研究探讨ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平变化及其与预后的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2017年1月-2020年9月本院82例ITP患儿的临床资料，并将其作为研究组。（1）纳入标准：①满足《血液病诊断及治疗标准》中ITP诊断标准[7];②首次确诊为ITP;③年龄不超过16岁;④近期未接受相关免疫治疗或血小板输注治疗。（2）排除标准：①继发性血小板减少症;②合并恶性肿瘤、内分泌性疾病、系统性红斑狼疮及其他自身免疫性疾病;③先天发育不全或畸形;④精神、认知功能严重损伤;⑤存在血液系统疾病史;⑥脑、心、肺等重要脏器严重损伤;⑦临床资料不全。另选取本院同期体检的50例健康儿童作为对照组。患儿家属均签署知情同意书，本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 （1）血小板分离：所有研究对象于清晨空腹取静脉血约6 mL，放置于EDTA抗凝管中，以800 r/min转速离心5 min后取富血小板血浆，加入等量PBS-BSA清洗液，以800 r/min转速离心5 min后，去上清液，得血小板沉淀，并调整血小板浓度为3×109/L。（2）PAIgG、PAIgM、PAIgA检测：将FITC-羊抗鼠IgG、FITC-羊抗人IgM、FITC-羊抗人IgA（均由美国BD公司生产）分别与1 mL血小板悬液混合，室温下，避光急性10 min孵育，使用PBS-BSA洗涤2次进行检测。采用酶联免疫吸附法检測PAIgG、PAIgA、PAIgM，将同型阴性对照设置阳性阈值。

1.2.2 治疗方法 患儿给予静注人免疫球蛋白[生产厂家：国药集团武汉血液制品有限公司，批准文号：国药准字S20070027，规格：2.5 g/瓶（5%，50 mL）]，400 mg/（kg·d），静脉注射;口服醋酸泼尼松片（生产厂家：新乡市常乐制药有限责任公司，批准文号：国药准字H41020214，规格：

5 mg/片），20 mg/d;重组人血小板生成素（生产厂家：沈阳三生制药有限责任公司，批准文号：国药准字S20050048，规格：15 000 U/mL）300 U/（kg·d），皮下注射。

1.3 观察指标及判定标准

1.3.1 比较两组一般资料 统计并比较两组性别、年龄、体重等一般资料。

1.3.2 比较两组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平 比较研究组及对照组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平。

1.3.3 比较不同病情严重程度ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平 根据血小板减少程度，将ITP患儿分为轻度组（血小板计数≥30×109/L）19例、中度组（10×109/L≤血小板计数<30×109/L）21例、重度组（血小板计数<10×109/L），比较各组ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平。

1.3.4 比较不同预后ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平 疗效判定如下，显效：血小板计数恢复正常，临床症状消失，2个月内无复发;有效：血小板计数超过50×109/L或升高30×109/L，临床症状明显改善，2个月内无复发;缓解：血小板计数不超过30×109/L，临床症状有所改善，2个月内无复发;无效：未达到上述标准[8]。治疗有效及显效患儿为预后良好组（n=65），治疗无效及缓解患儿为预后不良组（n=17），比较预后良好组及不良组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平。

1.4 统计学处理 采用SPSS 21.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验，多组数据比较采用单因素方差分析;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。采用ROC曲线分析PAIgG、pAIgM、PAIgA水平对ITP患儿预后的预测价值。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 研究组女31例，男51例;年龄6～14岁，平均（9.71±1.81）岁;体重22～58 kg，平均（31.52±3.24）kg。对照组女22例，男28例;

年龄6～15岁，平均（10.03±1.55）岁;体重24～52 kg，平均（30.84±3.02）kg。两组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 研究组和对照组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平比较 研究组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.3 不同病情严重程度ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平比较 不同病情严重程度ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。重度组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均高于中度组和轻度组，中度组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均高于轻度组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.4 不同预后ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平比较 预后良好组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均低于预后不良组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表3。

2.5 PAIgG、PAIgM、PAIgA水平及三者联合对ITP患儿预后的预测价值 由ROC曲线可知，PAIgG、PAIgM、PAIgA三者联合预测ITP患儿预后的AUC为0.901，高于三者单独预测的0.724、0.715、0.710（P<0.05），见图1和表4。

3 讨论

ITP在不同种族、性别及年龄人群中均存在患病者，发病年龄出现两极分化，在14岁以下儿童及60岁以上老年群体的发病率相对较高[9]。血小板主要脱落于巨核细胞胞质中，在其表面存在复杂的抗原，临床根据抗原类型将血小板抗体分为特异性抗体及PAIg。迄今ITP发病机制尚未阐明，多数学者认为免疫调节功能异常是造成该病的重要原因，而PAIg在ITP的发生及进展中发挥着重要作用[10-11]。有研究认为，机体免疫介导产生的PAIg会促进单核-巨噬细胞系统吞噬血小板，导致外周血中血小板明显减少，引起ITP[12]。此外，PAIg还能结合巨核细胞表面抗原，对血小板的生成发挥直接抑制作用[13]。因此，现阶段临床常通过检测PAIg水平对ITP进行诊断。

目前PAIgG、PAIgM、PAIgA等抗体是临床研究较多的PAIg，IgG是占比最多的抗体，IgG抗体与血小板抗原结合后留置于单核-巨噬细胞系统中，破坏血小板，造成血小板减少[14]。PAIgM的细胞膜溶解能力较强，可以影响血小板凋亡过程，此外，PAIgM也能够激活补体，激发相关反应链，影响血小板功能。IgA的占比仅次于IgG，同时具备IgG及IgM部分功能，可以影响免疫反应[15]。有研究报道，ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平高于健康儿童[16]。本研究使用流式细胞计数仪检测ITP患儿PAIgG、PAIgM、PAIgA水平发现，研究组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均高于对照组，与上述研究结果类似，提示PAIgG、PAIgM、PAIgA与ITP的发生密切相关。叶加建等[17]研究发现，ITP患者血小板相关抗体水平远高于健康人群，也佐证了本研究结果。石元耀等[18]认为，PAIgG、PAIgM、PAIgA與ITP患儿的病情严重程度有关，随着ITP患儿病情的加重，PAIgG、PAIgM、PAIgA水平也随之升高。本研究结果显示，重度组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平高于中度组和轻度组，中度组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均高于轻度组，与其研究结果一致，表明PAIgG、PAIgM、PAIgA水平变化会影响ITP患儿病情进展。ITP患儿体内的PAIg升高，使血小板减少，导致血小板生成刺激增加，进而生成较多的前血小板，前血小板由于含有较多的α颗粒，其体积及密度明显大于正常血小板，使之在血液循环中更容易被破坏[19]。此外，PAIg结合抗原后会对补体系统发挥激活作用，使巨噬细胞表面受体和C3裂解产物相结合，加速血小板吞噬过程。PAIgG的FC段可以结合巨噬细胞FC受体，发挥吞噬血小板的作用[20]。现阶段临床少有PAIgG、PAIgM、PAIgA水平与ITP患儿预后的关系研究，本研究发现，ITP患儿预后良好组PAIgG、PAIgM、PAIgA水平均低于预后不良组，说明PAIgG、PAIgM、PAIgA水平有利于判断ITP患儿的预后。本研究ROC曲线分析PAIg对ITP患儿预后的预测价值发现，PAIgG、PAIgM、PAIgA三者联合预测ITP患儿预后的AUC高于三者单独预测，进一步证实了PAIgG、PAIgM及PAIgA水平对ITP患儿预后的预测价值较高。临床应加强检测ITP患儿PAIg水平，对评估ITP患儿病情进展及判断预后具有重要的意义。

综上所述，ITP患儿PAIgG、pAIgM、PAIgA水平升高，三者与病情严重程度相关，联合检测对预后具有良好的预测价值，可作为临床评估预后的参考指标。

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（收稿日期：2021-03-05） （本文编辑：姬思雨）