TGF-β1、GM-CSF及TNF-α对急性髓系白血病患者病情转归的评估

仲华 林志强 薄德映 王亚南 武艳伟 翟志佳 焦路阳

急性髓系白血病是一类源于造血干细胞的恶性克隆性疾病，其会抑制机体正常造血功能，影响机体组织器官的功能。近年来有学者发现，在急性髓系白血病的发生、发展的过程中，有较多的生化指标发挥着重要的调控作用［1］。Koichi 等［2］学者报道转化生长因子（Transforming growth factor-β1，TGF-β1）广泛参与机体病理生理的过程，可抑制白血病细胞的增殖。肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor，TNF-α）在诊断恶性肿瘤、心血管疾病的临床价值已得到肯定，近年来TNF-α 与急性髓系白血病的关系得到广大学者的重视，认为急性髓系白血病患者体内高水平的TNF-α 会导致患者预后不良［3］。粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（ranulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）来源于适应性免疫系统的细胞、骨髓细胞等，较多研究发现其在类风湿性关节炎的关节中浓度较高［4］，但其与急性髓系白血病的相关研究较少。本研究旨在探讨TGF-β1、GM-CSF 及TNF-α在急性髓系白血病患者血清中的表达情况及三者对其病情转归的影响。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年2月至2018年2月本院收治的136例急性髓系白血病患者设为观察组。纳入标准：①均临床、血常规、骨髓象确诊为急性髓系白血病；②病历资料完整。排除标准：①纳入研究前1 个月内，服用过影响本研究指标水平的药物，或接受相关治疗者；②合并心、肝、肾等器官和系统严重疾病或恶性肿瘤者；③妊娠期、哺乳期女性、精神障碍者。

经对症予以VDP/VDCP/DA/MEA 方案治疗后，根据相关分组标准［9］分为完全缓解组58 例，未缓解组45 例，难治复发组33 例。选取同期本院的140 例健康体检者，设为对照组。观察组男性72例，女性64 例；平均年龄（43.35±5.71）岁。对照组男性71 例，女性69 例；平均年龄（43.44±5.78）岁。2 组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经医院医学伦理委员会批准通过，所有受试者均签署知情同意书。

1.2 方法

观察组患者在入院后第2日、对照组患者于体检当日清晨空腹抽取静脉血3 mL，离心10 min，分离血清及血浆，样本置于-20℃下保存待检。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平。相关试剂盒采购于北京中杉金桥生物技术有限公司。TGF-β1 参考范围：20～55 μg/L，<20 μg/L 视为异常降低［6］；TNF-α 参考范围：180～320 pg/mL，<180 pg/mL 视为异常降低［7］；GM-CSF 参考范围：32～65 ng/L，>65 ng/L 视为异常升高［8］。

1.3 观察指标

①收集患者的病历资料，包括姓名、性别、年龄、是否合并髓外浸润、白细胞水平、FAB 分型、危险度分型等资料，分析TGF-β1、TNF-α、GM-CSF水平与患者病理特征的关系。②对患者进行为期3年的随访（方式：电话随访、门诊复查，随访截止时间：2021年2月），了解患者预后情况。③采用多元Logistic 回归分析影响急性髓系白血病患者预后不良的相关危险因素。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行数据分析，计数资料用n（%）表示，采用χ2检验；计量资料采用（）表示，两组间比较行t检验，多组间比较行F检验；采用多元Logistic 回归分析影响急性髓系白血病患者预后不良的相关危险因素；以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 观察组与对照组TGF-β1、TNF-α、GM-CSF水平比较

观察组GM-CSF水平高于对照组，TGF-β1、TNF-α水平低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 两组TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比较（±s）Table 1 Comparison of TGF-β1，TNF-α and GM-CSF levels between 2 groups（±s）

表1 两组TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比较（±s）Table 1 Comparison of TGF-β1，TNF-α and GM-CSF levels between 2 groups（±s）

组别观察组对照组t 值P 值n 136 140--TGF-β1（μg/L）7.32±2.14 32.65±7.54 38.199<0.001 TNF-α（pg/mL）105.52±17.55 227.25±25.14 46.519<0.001 GM-CSF（ng/L）90.25±8.65 43.77±5.19 54.309<0.001

2.2 完全缓解组、未缓解组及难治复发组的急性髓系白血病患者TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比较

完全缓解组GM-CSF 水平明显低于未缓解组、难治复发组，TGF-β1 及TNF-α 水平明显高于未缓解组、难治复发组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 完全缓解组、未缓解组及难治复发组的急性髓系白血病患者TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比较（±s）Table 2 Comparison of the levels of TGF-β1，TNF-α and GM-CSF in patients with complete remission，unremission and relapsed acute leukemia（±s）

表2 完全缓解组、未缓解组及难治复发组的急性髓系白血病患者TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比较（±s）Table 2 Comparison of the levels of TGF-β1，TNF-α and GM-CSF in patients with complete remission，unremission and relapsed acute leukemia（±s）

组别完全缓解组未缓解组难治复发组F 值P 值n 58 45 33--TGF-β1（μg/L）41.25±8.65 35.64±7.22 30.21±5.59 26.980<0.001 TNF-α（pg/mL）120.32±20.33 97.67±17.52 85.14±15.65 42.920<0.001 GM-CSF（ng/L）84.23±7.14 93.27±8.34 108.65±9.74 92.660<0.001

2.3 TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平与急性髓系白血病患者病理特征的关系

TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平与急性髓系白血病患者髓外浸润、危险度分型显著相关（P<0.05）。见表3。

表3 TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平与急性髓系白血病患者病理特征的关系［n（%）］Table 3 the relationship between the levels of TGF-β1，TNF-α，GM-CSF and the pathological characteristics of patients with acute leukemia［n（%）］

2.4 急性髓系白血病患者预后情况

TGF-β1 及TNF-α 异常降低、GM-CSF 异常增高的急性髓系白血病患者死亡率明显高于TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 正常水平的患者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表4。

表4 急性髓系白血病患者预后情况［n（%）］Table 4 prognosis of patients with acute leukemia［n（%）］

2.5 影响急性髓系白血病患者预后死亡的相关危险因素

髓外浸润、危险度分型、TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 为影响急性髓系白血病患者预后死亡的独立危险因素（P<0.05）。见表5。

表5 影响急性髓系白血病患者预后死亡的相关危险因素Table 5 related risk factors of death in patients with acute leukemia

3 讨论

急性髓系白血病是造血干细胞的恶性克隆性疾病，平均生存期仅3 个月左右，严重危害患者生命健康［10］。部分急性髓系白血病患者可以通过化疗或骨髓移植延长生存期，但该病生存率仍不想理。积极寻找可在急性髓系白血病发病早期发现病情变化、评价疗效并判断预后的指标对延长患者生存时间临床意义重大。

TGF-β1 是由Treg 细胞分泌产生的细胞因子，它通过参与多种免疫细胞的调控作用下调机体免疫应答反应，是目前已知的作用较强的负性造血细胞调控因子，在造血方面主要起负调控作用。Ramaswamy K 等［11］学者研究认为TGF-β1 可以显著抑制血细胞增殖，并在正常造血细胞生长分化的各个阶段均有表达。本研究结果，这一研究结果与既往文献报道结果一致［12］。考虑为TGF-β1 水平降低，导致白血病细胞抑制作用减弱，促进了白细胞的增殖，从而加重了急性髓系白血病患者的病情。

GM-CSF 作用于造血干细胞、祖细胞等细胞中，可促进骨髓造血，是机体必需的造血生长因子之一［13］。本研究结果显示急性髓系白血病患者血清GM-CSF 水平呈异常增高表达状态，完全缓解组GM-CSF 水平明显低于未缓解组、难治复发组。Otegbeye F 等［14］学者研究报道，急性髓系白血病患者GM-CSF 水平与其预后有着显著相关性，这与本研究所得结果一致，提示GM-CSF 可作为评估急性髓系白血病患者预后的重要指标之一。

TNF-α是重要的炎症和免疫反应调节物，主要由激活的单核-巨噬细胞产生，具有较强的抗肿瘤及促炎功能。Sterner等学者［15］研究指出，正常表达的TNF-α可提高白细胞对病原体吞噬能力。本研究中，TNF-α异常升高的急性髓系白血病患者预后死亡的风险大。分析导致TNF-α水平异常升高的原因：急性髓系白血病患者对病原菌具有易感性，易并发多种机会性感染，刺激单核-巨噬细胞的表达水平，使得患者发生持续的炎症反应，引起TNF-α水平升高［16］。

本研究结果显示，TGF-β1、TNF-α、GM-CSF水平与急性髓系白血病患者髓外浸润、危险度分型有显著相关性，TGF-β1 异常降低、TNF-α 异常升高、GM-CSF 异常降低的急性髓系白血病患者髓外浸润发生的风险越高，危险度分型为高危型的几率越大，同时TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平与急性髓系白血病患者疾病进展有着密切联系。

综上所述，TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 与急性髓系白血病患者病情进展密切相关，TGF-β1（异常降低）、TNF-α（异常升高）、GM-CSF（异常降低）的患者预后死亡的风险更大，提示临床可加强三者联合检测，以尽快掌握患者病情，评估患者预后。