4-氨基安替比林分光光度法测定土壤中的挥发酚

张雷，胡琳珊

(1.天津华北地质勘查局核工业二四七大队,天津 301800；2.天津华北地质勘查局,天津 301800)

1 实验

1.1 原理:挥发酚为有毒物质，因此在检测过程中应戴好相应的保护工具，在碱性溶液中提取土壤中的挥发酚并在酸性的条件下进行蒸馏处理，所得的蒸馏液在铁氰化钾的作用下，与4-氨基安替比林发生反应，静置10min后，用723分光光度计在波长510nm的波长处进行测量。在一定的浓度中挥发酚的含量和吸光度成正比。

1.2 主要仪器：723分光光度计，蒸馏仪。

1.3 试样的取样和制备：加入10mL硫酸铜溶液于30mL的取样瓶中称量，取样品于样品瓶中，称取土壤样品20g，于500m广口聚乙烯瓶中，用10mL氢氧化钠溶液清洗样品瓶，加入260mL氢氧化钠溶液拧紧瓶盖，水平振荡10min，样瓶振荡后，静置5min，取250mL上清液，待蒸馏。提取液中加入数滴甲基橙，用磷酸调节至试样呈橙红色，加入5g硫酸铜，加入25mL去离子水，收集250mL馏出液，取50.0mL试样于比色管，加入0.5mL缓冲液，1.0mL 4-氨基安替比林溶液，混匀后，加入1.0mL铁氰化钾溶液，充分混匀，密塞，放置10min，用10mm比色皿于波长510nm处测量吸光度。以水为参比。

1.4 空白试样的制备：以石英砂代替样品按照以上步骤制备空白样品。

1.5 标准曲线的建立：在一组6支50.00 mL玻璃比色管瓶中，分别移取0.00 mL、0.50 mL、2.00 mL、5.00 mL、10.0 mL和25.0ml挥发酚标准溶液，加入水定容至刻度，摇匀。加入0.5mL缓冲液，1.0mL 4-氨基安替比林溶液，混匀后，加入1.0mL铁氰化钾溶液，充分混匀，密塞，放置10min，用10mm比色皿于波长510nm处测量吸光度。以水为参比。以挥发酚的酚含量为横座标，吸光度为纵座标，绘制标准曲线。

1.6 试样的测定：按照标准曲线的相同步骤进行试样的测定。当挥发酚含量大于250μg，可减少试样的取样量，按照以上步骤重新测定。

1.7 空白试样的测定：按照试样的测定相同步骤进行空白试样的测定。

1.8 结果计算：试样中挥发酚的质量分数以w（以苯酚，mg/kg）计，按公式计算：

式中：w—样品中的挥发酚的质量分数，mg/kg；A0—实验室空白溶液的吸光度；A—样品的吸光度；a—标准曲线的截距；V1—提取液体积，300mL；b—标准曲线的斜率；V2—用于比色的试样体积，50mL；m—试样质量，g；wdm—样品的干物质，%。

2 数据测试结果

2.1 方法检出限、测定下限测试数据

按照样品分析的全部步骤，重复8次试验测定方法检出限（见表1）。

表1 方法检出限测试数据表

2.2 标准曲线线性验证结果

标准曲线用挥发酚的标准使用液，配置0μg、5.00μg、20.0μg、50.0μg、100μg、250μg共6个不同浓度的标准系列，按照方法要求进行曲线绘制，统计结果见表2，图1标准曲线统计结果。

表2 标准曲线统计结果

图1

2.3 方法精密度和准确度测试数据

按照样品分析的全部步骤，对样品加标低中高不同浓度分别进行8次平行测定，并分别计算每一个标准物质的平均值、标准偏差、相对标准偏差和加标回收率，验证方法精密度和准确度（见表3，4）。

表3 精密度测试数据汇总表

表4 准确度测试数据汇总

3 结论

1）该研究方法分别进行了检出限、标准曲线、精密度、准确度和加标回收率5个指标的验证，测定土壤和沉积物的挥发酚(以苯酚计)的检出限为0.2mg/kg，小于方法检出限,测定回收率为99.8%～104%，，验证结果均符合土壤中挥发酚的测试要求。

2）实验结果表明：土壤中的挥发酚含量都相对较低，又不稳定，所以要保证样品的准确性，要在前处理方面解决。改进措施：必须要取新鲜土壤，且混匀土壤，然后再装入棕色瓶，用封口膜封紧瓶口，贴好标签，应放入低温保鲜箱内。且应在24h以内进行检测。