血清MALAT1、ENA-78、HE4表达情况与子宫内膜异位症进展的关系研究

李凤梅

（郑州大学附属郑州中心医院妇产科 河南郑州 450007）

子宫内膜异位症（Endometriosis,EMs）简称内异症，在临床上是一种发病率奇高的妇科疾病，其发病的病机并不明确。目前，EMs已成为妇女常见病和多发病，发病率逐年上升，所占比例超过普通妇科手术的30%[1]。发病原因有多种假说，如化生内膜、良性转移及遗传因素等。EMs常表现为痛经、下腹部疼痛等，对妇女健康及生活质量都产生了严重影响，是发生不育症的一个主要因素[2～3]。目前，EMs的具体发病原因仍不明确，其发病多样且广泛，已成为当下的难治之症[4～5]。在临床上治疗该病的方法较多，常见通过手术辅助药物进行治疗，但是效果并不理想，预后复发率较高，所以早期诊断及干预治疗是提高患者生存率的有效手段。如何简单有效地对该病进行诊断有着十分重要的临床意义，但是一般通过单一标记物进行诊断时，其敏感性及特异性存在一定问题，本研究对血清中的ENA-78、HE4及MALAT1因子水平进行研究。现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取2017年4月～2019年10月来我院就诊的EMs患者46例为观察组，年龄25～35岁，平均（29.12±3.29）岁；平均体质量指数（23.92±1.33）kg/m2。根据美国生育学会的EMs的分期准则对观察组患者进行划分，轻度患者（Ⅰ～Ⅱ度）21例，重度患者（Ⅲ～Ⅳ度）25例，轻度患者与重度患者的年龄、体质量指数之间差异不存在统计学意义（P＞0.05）。另外选取同期来我院体检的46例正常健康妇女为对照组，年龄25～36岁，平均（29.45±3.78）岁；平均体质量指数（23.55±1.69）kg/m2。观察组与对照组的年龄、体质量指数之间差异不存在统计学意义（P＞0.05）。所有研究对象均签署知情同意书，并经医院医学伦理委员会审核通过。

1.2 入组标准 （1）纳入标准：经过超声及临床综合检查确诊为EMs患者；依从性较好，能够有效配合完成各项检查的患者；患者或家属已经签署知情同意书者。（2）排除标准：合并有心、肝、肾等重要脏器严重衰竭者；各种其他对本次研究可能会产生负面作用的疾病者；自身存在免疫性或血液方面疾病者；3个月内存在激素类药物使用史者。

1.3 观察指标 取两组患者清晨空腹静脉血，离心后，取上清液，采用酶联免疫法（ELLSA）对患者血清中ENA-78、HE4水平进行检测。按照血清总核糖核酸（RNA）提取试剂盒的操作规范对血清中RNA进行提取，对其中转录因子MALAT1的含量进行测定。实验过程包括包被、加样、加酶标抗体、显色剂终止反应过程，按厂家操作规范进行操作。结果判定标准[4～5]：（1）ENA-78＞1.0 ng/ml判定为阳性；（2）HE4＞42 pmol/L判定为阳性；（3）MALAT1＜0.65 U/ml判定为阳性；（4）平行联合检测判定，不同检测方法中，任何一项出现阳性，即判定为阳性；（5）系列联合检测，几项检测方法均出现阳性结果时，判定为阳性。

1.4 统计学方法 数据处理采用SPSS19.0统计学软件，计数资料以%表示，采用χ2检验，计量资料以（±s）表示，采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组ENA-78、HE4与MALAT1水平差异 观察组ENA-78（t=14.105，P=0.000）、HE4（t=13.355，P=0.000）显 著 高 于 对 照 组，MALAT1因 子（t=59.321，P=0.000）水平显著低于对照组。见表1。

表1 两组ENA-78、HE4与MALAT1水平差异（±s）

表1 两组ENA-78、HE4与MALAT1水平差异（±s）

组别 n MALAT1（U/ml）ENA-78（ng/ml） HE4（pmol/L）观察组对照组tP 46 46 0.61±0.05 1.12±0.03 59.321 0.000 2.22±0.63 0.89±0.11 14.105 0.000 53.79±4.99 41.38±3.85 13.355 0.000

2.2 不同严重程度患者的NA-78、HE4与MALAT1水平差异 Ⅰ～Ⅱ度组患者ENA-78（t=9.930，P=0.000）、HE4（t=13.424，P=0.000）显著低于Ⅲ～Ⅳ度组，MALAT1因子（t=40.540，P=0.000）水平显著高于Ⅲ～Ⅳ度组。见表2。

表2 不同严重程度患者的NA-78、HE4与MALAT1水平差异（±s）

表2 不同严重程度患者的NA-78、HE4与MALAT1水平差异（±s）

组别 n MALAT1（U/ml）ENA-78（ng/ml） HE4（pmol/L）Ⅰ～Ⅱ度组Ⅲ～Ⅳ度组tP 21 25 0.74±0.02 0.50±0.02 40.540 0.000 1.10±0.36 3.16±0.96 9.930 0.000 50.67±1.33 56.41±1.57 13.424 0.000

2.3 相关性分析 采用Spearman相关性分析，对疾病的严重程度与NA-78、HE4与MALAT1水平进行相关性分析，患者的疾病严重程度与NA-78（r=0.445，P=0.000）、HE4（r=0.551，P=0.000）呈正相关，与MALAT1呈负相关（r=-0.578，P=0.000）。

2.4 联合检测诊断的ROC曲线分析 平行联合检测ROC曲线下面积分别为0.761、0.763和0.915，系列联合检测ROC曲线下面积为0.750、0.721和0.904，ENA-78+MALAT1诊断的ROC曲线下面积显著高于MALAT1+HE4及ENA-78+HE4，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见图1。

图1 ROC曲线分析（A为平行联合检测，B为系列联合检测）

2.4 EMs患病危险因素的多因素Logistic回归分析多因素Logistic回归分析显示，ENA-78、HE4与MALAT1均是EMs发病的影响因素（P＜0.05）。见表3。

表3 子宫内膜异位症发病危险因素的多因素Logistic回归分析

3 讨论

EMs是临床上发病率较高的一种雌激素依赖系统疾病，发病人群多为育龄女性，患者通常会出现不规则出血、疼痛、不孕等临床表现，比较严重时会对患者的生活质量造成负面影响[6]。最近几年来，该病发病率持续走高，患者不孕概率高达50%，所以如何在患者发病时进行准确有效的诊断并开展治疗，对改善患者的预后十分有必要[7～8]。目前临床上一般通过腹腔镜手术切除异位病灶，并在患者术后同时辅以药物巩固治疗来减少复发。随着医疗条件的改善和各种创新药物的研发，该病的治疗已经取得十分显著的效果[9]。虽然临床上认为腹腔镜检查诊断EMs是“金标准”，但这种检查需要全身麻醉，在检查期间要对患者的腹腔进行侵入性操作，对患者机体造成一定伤害，会引起副交感神经的应激反应，导致检查后的并发症也较多，而且检查花费也较大，限制了推广使用的范围，所以应该寻找一种操作方便、特异性强、灵敏度较好的诊断方案。已有文献报道了许多生物标志物可以用于该病的诊断，具有十分广泛的参考价值[10～11]。

HE4是近年来发现的一种肿瘤标志物，在临床上多用于卵巢癌的早期诊断，一般在健康人体的呼吸道、生殖系统及卵巢组织中的表达水平极低，但是在卵巢癌患者的组织和血清中均发现高度表达。随着科学家的进一步研究发现，EMs患者血清中HE4也存在一定程度的升高[12]。ENA-78是一种炎症介质，来源于人体的上皮细胞，作用是趋化及激活患者体内的中性粒细胞，能够显著促进患者体内新血管的形成，同时也能够对异位病灶中的新生血管吻合静脉微血管系统起到促进作用，导致患者局部出现缺血、缺氧，引发纤维化，进而加重盆腔粘连，最终出现异位作用[13～15]。研究表明，MALAT在多个肿瘤中均出现了过表达现象，如子宫内膜癌，乳腺癌及卵巢癌等多种雌激素依赖性肿瘤，MALAT7因子表达下调，能够调节患者的上皮间质转化，涉及恶性肿瘤的生长、迁移及侵袭过程[16～18]。由此可见，已经有文献和临床支持以上三个指标与卵巢癌存在密切关联，但是与子宫异位症的关系没有得到进一步确定[19～20]。本研究结果发现，观察组ENA-78、HE4水平显著高于对照组，MALAT1水平低于对照组，P＜0.05。可以认为检测患者血清中的ENA-78、HE4和MALAT1水平对于EMs诊断有一定参考价值。随着分子生物学迅速发展及血管形成理论的进一步规律揭示，已经有越来越多研究显示EMs病机与患者的血管生成过程存在密切关联。而在本研究中，随着疾病的严重程度加重，ENA-78、HE4显著升高，MALAT1显著降低，与以上研究相互印证。ENA-78、HE4和MALAT1与子宫内膜症的相关关系已经十分明确，但三者联合用于该病的诊断报道较少。平行联合检测ROC曲线下面积分别为0.761、0.763和0.915，系列联合检测ROC曲线下面积为0.750、0.721和0.904，ENA-78+MALAT1诊断的ROC曲线下面积显著高于MALAT1+HE4及ENA-78+HE4，差异具有统计学意义（P＜0.05）。说明ENA-78、MALAT1的联合检测对于该病的阳性诊断有重要意义，对于该病的早期筛查有积极的作用。

综上所述，ENA-78、HE4和MALAT1表达情况与EMs疾病进展存在相关性，而且ENA-78的诊断灵敏度最高，HE4诊断灵敏度最低，ENA-78、MALAT1的联合检测可以为该病临床阳性诊断提供参考，诊断过程简单且为非侵入式的，价值较高，值得在临床中推广运用。

（收稿日期：2020-12-18）