李春花,雷萌桐,蔡进忠,孙建,罗松格来 ,闫鸿斌, 贾万忠
(1.青海大学畜牧兽医科学院,西宁 810016;2.青海省玉树州治多县动物疫病预防控制中心,治多 815499;3.中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家动物包虫病专业实验室,兰州 730046)
肠道寄生虫病是犬常见的寄生虫病之一,可引起犬营养不良、消瘦、贫血、胃肠道症状及神经症状,重者可导致全身衰弱死亡[1]。我国北方牧区是细粒棘球绦虫(Echinococcusgranulosus)感染率较高的地区,尤其是青藏高原,由于受生产和生活方式、自然生态﹑生物因素及牧民文化水平等的影响,造成动物和人畜间棘球蚴病的高度流行[1,2],使棘球蚴病成为危害严重的人兽共患病地方病。藏犬是牧业区少数民族的朋友和其财产及牛羊的卫士,与牧民的生产、生活休戚相关。我省牧业区目前有牧羊藏犬约92万只,此外有野犬和其它犬类及数量众多的狼、狐狸等食肉动物存在。藏犬绦虫病是牧区的常见多发病,由于复杂的循环生态链的构成,形成了绦虫和绦虫蚴病在人、畜和野生动物间感染的普遍性,给防控与净化带来了困难[3]。
随着我国经济的发展,人民生活水平的提高,养犬成为一种新的生活时尚,发展迅速。因此,我国对犬类疫病的研究越来越受到重视。目前,对犬细粒棘球绦虫的调查较多,应用吡喹酮片剂防治的方法也较为成熟[8-10],但存在对牧区藏犬用药不便的难题。因此,采用综合防控技术措施是防治藏区犬及传播病的有效手段,其中,选用有效药物及其适用剂型是取得良好防治效果的关键。为了优化给药途径,提高驱虫效果,我们研制了吡喹酮浇泼剂,进而做了驱除藏犬肠道绦虫的临床试验与示范应用。
1.1试验药物
氢溴酸槟榔碱粉剂,类白色粉末,由中国农业科学院兰州兽医研究所提供;吡喹酮浇泼剂,青海大学畜牧兽医科学院研制,每1mL含吡喹酮5mg;吡喹酮片剂,商品名血虫净,青海九梁农牧科技有限公司生产,每片含吡喹酮100mg;犬细粒棘球绦虫抗原检测试剂盒,批号20151119、20160222、20160928、20180309,深圳市康百得生物科技有限公司生产。
1.2试验动物
2016年4月,在玉树州治多县加吉博洛镇,对未使用任何抗寄生虫药物的34只藏犬(其中14只平时未拴养),每只犬采集新鲜粪便约5g带回实验室,置-80℃冰箱冷冻9d,采用ELISA法检测犬粪便棘球绦虫虫体抗原,按操作步骤检查犬棘球绦虫粪抗原[3]。
1.3驱虫试验
1.3.1分组 将34只犬按户编为3组。其中第1组11只,为吡喹酮片剂5mg/kg剂量试验组;第2组12只,为吡喹酮浇泼剂10mg/kg剂量试验组;第3组11只,为阳性对照组。
1.3.2给药 在试验前逐只称重、记录,第1组按5mg/kg体重剂量将吡喹酮片剂药片包于肉片中给药;第2组按10mg/kg体重剂量将吡喹酮浇泼剂用无针头注射器吸取药液沿犬背中线浇泼于皮肤;第3组对照犬不给药。
1.3.3效果检查 在给药后第7d,先采集犬粪便,采用ELISA法检测犬粪便中细粒棘球绦虫虫体抗原。然后采用氢溴酸槟榔碱泻下法再进行对犬细粒棘球绦虫的驱除效果检查,给药后40~60min,收集被检犬排出的粪便,用5%的甲醛溶液浸泡沉淀后弃去上清液,漂洗检虫,收集虫体,计数统计。
1.4示范应用效果检查
2017~2019年应用吡喹酮浇泼剂按10mg/kg剂量给药,进行驱虫示范。给药后7d采集犬粪样,采用ELISA法进行犬粪便抗原检测,评价示范驱虫效果。
1.5疗效判断
按常规方法计算驱净率和粗计驱虫率。
驱净率=驱净虫体的动物数/全部试验动物数×100%
粗记驱虫率=对照组平均残留虫体数-试验组平均残留虫体数/对照组平均残留虫体数×100%
1.6药物反应观察
用药后主要观察试验犬的精神、食欲、粪便等变化情况,连续观察12d。
2.1给药前粪抗原检测结果
共检测藏犬307只,检出阳性34只,阳性率11.07%。ELISA法粪细粒棘球绦虫虫体抗原检测结果及分组情况见表1。
表1 给药前犬粪抗原ELISA法检测结果
2.2对藏犬细粒棘球绦虫的驱虫效果
给药后7d,吡喹酮片剂、浇泼剂驱除藏犬棘球绦虫粪抗原检测结果见表2。从表中可见,吡喹酮片剂5mg/kg、浇泼剂10mg/kg剂量驱除犬细粒棘球绦虫的转阴率均达100.0%。
表2 各试验组藏犬粪抗原ELISA法检测结果
给药后7d,采用氢溴酸槟榔碱泻下法检查驱除效果,吡喹酮片剂、浇泼剂对犬细粒棘球绦虫的驱虫效果见表3。从表中可见,阳性对照组细粒棘球绦虫检出率72.73%(8/11),平均感染强度3728.1条(583~9054);吡喹酮片剂5mg/kg、浇泼剂10mg/kg剂量驱除犬细粒棘球绦虫的驱净率与驱虫率均达100%。
表3 各试验组藏犬细粒棘球绦虫检查统计结果
2.3防治效果
应用吡喹酮浇泼剂对犬3年的示范驱虫检测结果见表4。结果显示对犬驱虫效果佳。
表4 不同年份用药后犬粪抗原检测结果
2.4安全性观察
试验犬的精神、食欲、粪便等未见异常反应。
3.1吡喹酮(Praziquantel PZQ)是一种高效、广谱的驱绦药,对血吸虫、绦虫、囊虫具有较好的驱虫效果[8,9]。为改进给药途径,提供防治效果,吡喹酮剂型的研发也受到人们的关注[10]。犬是细粒棘球绦虫的终末宿主,也是防控包虫病的关键。
本次试验与示范应用结果表明,吡喹酮片剂、浇泼剂试验剂量对藏犬细粒棘球绦虫驱净率、粗计驱虫率均达100%。两种剂型的使用方法比较,浇泼剂给药法简便,牧户易掌握使用,而片剂给药较为复杂,有时发生部分犬吐出药片的情况,影响驱虫效果。结果显示应用吡喹酮片剂5mg/kg、浇泼剂10mg/kg剂量驱除藏犬棘球绦虫高效安全。
3.2安全性观察结果表明,吡喹酮片剂、浇泼剂试验剂量组藏犬给药后未发现异常反应,安全性好。
3.3国内外发达国家十分重视对宠物疾病的检查和防治。在驱绦虫药物应用上也有丰富的实验资料和临床经验[8-10]。犬、猫均为个体投药,且药物品种全面,美国、加拿大等国家约有30余种抗寄生虫药物用于犬、猫,代表了发达国家的防治现状。国内近几年对宠物犬、猫寄生虫病研究较多,对牧区犬细粒棘球绦虫的调查及防治工作日趋重视。防治技术措施也较完善,关键是如何贯彻执行,取得实效。
3.4在青藏高原地区,家养的和野生的棘球绦虫终宿主和中间宿主动物资源十分丰富,且相互之间存在捕食和被捕食的关系,使两种棘球绦虫生活史循环链的形成和延续具备了客观条件,并且呈恶性循环状态。加之广大牧民及城镇居民有养犬的习俗,从而造成人畜间棘球蚴病流行趋势呈波动状。根据青海省的实际情况,依据流行因素及传播的关键环节,采取加强人的卫生安全教育和犬只管理,应用吡喹酮定期驱虫,加强动物检疫,患病脏器无害化处理,对放牧家畜的免疫注射等综合防控措施是必要的。