80例胃癌患者腹水常规细胞形态学检查分析

刘超群， 韩 东， 徐 健

（1.浙江中医药大学附属金华中医院检验科，浙江 金华 321017；2.海军军医大学附属长海医院实验诊断科，上海 200433）

恶性腹水中多见胃肠道肿瘤细胞，胃癌的病理分型较多，细胞形态较复杂，国内文献多以病理科角度进行报道，检验科多侧重肿瘤标志物[1]等的研究，有关胃癌腹水常规细胞形态学研究较少。本研究收集80例经病理科确诊的胃癌患者，分析其腹水常规细胞形态学特点，提高检验人员认知能力，为临床诊疗提供有价值的诊断信息。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2012年1月—2017年4月海军军医大学附属长海医院和浙江中医药大学附属金华中医院经病理诊断为胃癌的患者80例，其中男35例、女45例，年龄22～88岁；组织病理学类型为中分化腺癌3例（3.75%）、中-低分化腺癌8例（10.00%）、低分化腺癌35例（43.75%）、低分化腺癌伴部分印戒细胞癌16例（20.00%）、印戒细胞癌14例（17.50%）、低分化黏液性腺癌2例（2.50%）、低分化腺癌伴部分未分化癌1例（1.25%）、局部腺上皮高级内瘤伴癌变1例（1.25%）；病变部位中，胃体33例（41.25%）、胃窦角43例（53.75%）、贲门胃底3例（3.75%）、全胃1例（1.25%）。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 采用腹水常规检查专用乙二胺四乙酸二钾抗凝管留取10 mL腹水标本并送检。

1.2.2 细胞计数 将腹水标本混匀充入计数池，静置2 min，进行细胞计数。血性腹水或含大量细胞数的样本应进行稀释（100倍）或使用带有体液模式的血液分析仪进行计数。

1.2.3 细胞分类 将留取的标本500×g离心5 min，弃上清液吸取沉淀物制片，采用改良推片法[2]制备6张涂片，其中无尾厚片、有尾厚片、有尾薄片各2张。采用改良瑞-吉染色法[2]进行染色，干燥后用油镜进行细胞分类。

1.2.4 细胞形态学观察 由经验丰富的细胞形态学检验人员在普通光学显微镜下进行观察。

2 结果

2.1 常规检查结果

80例胃癌患者中，有核细胞数>500×106/L的有52例（65.0%），其中中性粒细胞>50%且淋巴细胞≤50%的有7例、中性粒细胞≤50%且淋巴细胞>50%的有28例、中性粒细胞和淋巴细胞均≤50%的有17例；有核细胞数为（300～500）×106/L的有10例（12.5%），其中淋巴细胞>50%的有6例、淋巴细胞≤50%的有4例；有核细胞数＜300×106/L的有18例（22.5%）。

2.2 异常细胞形态观察结果

参考病理诊断结果，重点观察35例低分化腺癌，发现镜下低分化腺癌细胞体积较小；有花边状突起，胞质较少，着色不均，核较大，核染色质粗糙不均，核仁清楚，呈单个、散在分布，或成团分布，如开窗样、栅栏样、镶嵌状等。见图1和图2。

图1 低分化腺癌细胞胞体呈花边状突起，开窗样排列（瑞-吉染色，×1 000）

图2 低分化腺癌细胞胞质内含有大小不一的空泡（瑞-吉染色，×1 000）

3 讨论

多数胃癌患者缺乏特异性消化道症状，早期胃癌无消化道症状占42.2%[3]。进展期胃癌常以腹痛、厌食、黑便和贫血为临床表现，当症状明显时，多已进入晚期。有不少病例以腹水为首发表现[4]。腹水常规及形态学检查在二级及以上医院检验科均有开展，该检查对临床诊断、治疗及预后评估有重要价值，但关于胃癌患者腹水常规形态学检查分析报道较少。

世界卫生组织以组织学来源及其异型性为基础，将胃癌分为乳头状腺癌、管状腺癌、低分化腺癌、黏液腺癌、印戒细胞癌、鳞腺癌、未分化癌和不能分类的癌[5]。本研究收集的80例胃癌患者腹水中均可查见癌细胞，其中低分化腺癌细胞所占比例最高，印戒细胞癌细胞次之，提示分化程度差的腺癌或恶性程度高的胃癌细胞易在腹水中被检出[6]；病变部位以胃窦角居多，胃体病变次之，这与其他文献报道[7]较一致。异常细胞中以低分化腺癌细胞多见，其形态学特征[8]表现为细胞体积较小；胞体有花边状突起，胞质较少，着色不均，边缘深染，内有大小不一的空泡；核较大，偏位或居中，核染色质粗糙不均、浓聚，核仁清楚；呈单个、散在分布，或成团分布，如开窗样、栅栏样、镶嵌状等。低分化腺癌细胞易与间皮细胞混淆，但有一定区别。（1）胞质着色，内涵物：低分化腺癌细胞胞质着色不均，边缘着色很深，内有大小不等的空泡。（2）核染色质：低分化腺癌细胞核染色质粗糙不均，核仁清楚。（3）细胞排列分布：低分化腺癌细胞除了单个、散在分布，还有其他排列方式。除了易与间皮细胞混淆外，低分化腺癌细胞与其他的小细胞性肿瘤细胞（如淋巴瘤细胞、小细胞癌细胞，低分化鳞癌细胞等）形态上也有相似点，检验人员应高度重视，加强对比分析。

腹水常规检查中，有核细胞数>500×106/L，以中性粒细胞（>50%）为主，提示有细菌性腹膜炎[9]。本研究80例胃癌患者中有7例除了腹水中查见癌细胞，还可能有细菌性腹膜炎，需引起临床注意，应结合细菌培养、药敏结果，积极给予抗感染治疗。有核细胞数>300×106/L，以淋巴细胞（>50%）为主的有34例，胸/腹水中淋巴比例增高主要见于慢性炎症、结核、肿瘤等疾病[10]。肿瘤细胞浸润腹腔，体内启动免疫应答，淋巴细胞比例会增高。常规检查可为临床提供有价值的信息。

总之，腹水常规细胞形态学检查是一种重要的临床检验手段，为临床诊断、治疗等提供重要的实验室依据，尤其是细胞形态学检查，难度大、价值也大，检验人员应综合其他相关检查，不断积累经验，提高认识和技能，以减少漏诊和误诊。