化学发光免疫分析法检测乙肝病毒感染性标志物的临床应用分析

叶婷玉

摘要：目的：探究乙肝病毒感染性标志物检测中施行化学发光免疫分析法检测的效果。方法：参与此次研究的研究对象为乙肝患者，均在2020年2月～2021年2月期间收入本院接受诊治，共60例。对上述患者分别采取化学发光免疫分析法检测（CLIA）以及酶联免疫吸附法检测（HBeAg）。对比两种方法的检测结果。结果：由研究结果数据上可见，酶联免疫吸附法与化学发光免疫分析法的HBeAb阳性检出率比较差异不具备统计学含义（P>0.05）。化学发光免疫分析法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb阳性检出率相比较酶联免疫吸附法较高（P<0.05）。结论：在乙肝病毒感染性标志物检测中采取化学发光免疫分析法，具有较高的敏感度，其检测准确度较高，有助于乙肝患者的治疗，在乙肝病毒感染性标志物检测中具有重要意义。

关键词：化学发光免疫分析法;乙肝病毒;感染性标志物;敏感度

乙型肝炎病毒的传播路径较为广泛﹐同时具备较高的感染率，当患者感染此种病毒后，可伴随时间逐步进展为急性肝炎以及慢性肝炎，病情较为严重的患者可产生肝硬化等疾病，对患者的身心健康产生较大的危害。若能够及时诊断出乙肝病毒有无感染，经治疗对患者的痛苦进行缓解，且能减少传染率[1]。当前，临床上对于乙肝诊断常采取酶联免疫吸附法检测法，能够对乙肝病毒感染性标志物予以定性分析，但不能准确定量。化学发光免疫分析法较好地结合了化学发光反应以及免疫反应，灵敏度高，能够较快定量分析，可对酶联免疫吸附法存在的缺陷予以弥补。为此，参与此次研究的研究对象为乙肝患者，均在2020年2月～2021年2月期间收入本院接受诊治，共60例。探究乙肝病毒感染性标志物检测中施行化学发光免疫分析法检测的效果。研究结果详见下文。

1资料与方法

1.1 基础资料

参与此次研究的研究对象为乙肝患者，均在2020年2月～2021年2月期间收入本院接受诊治，共60例。上述研究对象男女占比为35：25;年龄在23～67岁，平均年龄（54.32±3.25）歲。上述研究对象均满足此次研究所设定的纳入标准。本研究经伦理审核标准通过。

1.1.1 纳入标准

（1）患者经病理诊断后满足乙肝疾病相关指证;（2）患者对本次研究目的知悉，且自愿参与到此次研究;（3）患者基础资料缺失。

1.1.2 排除标准

（1）患有器官功能性障碍疾病，以及感染性疾病和凝血功能障碍等;（2）患有精神类疾病，以及存在认知能力障碍者;（3）患者基础资料缺失，中途退出研究者。

1.2 方法

1.2.1 设备仪器

本次研究所使用的离心机设备型号为SV-II，为山东博科科学仪器有限公司生产;全自动酶免分析仪型号为Bosal，为上海通达生物科技有限公司生产;化学发光法检测仪型号为HISCL-5000，为日本希森美康公司生产。

1.2.2 试剂

酶联免疫吸附法试剂盒：HBsAg（生产厂家：艾康生物技术（杭州）有限公司;批准文号：国食药监械（准）字2010第3400516号;规格：条型单人份包装：50人份/盒;条型筒装：100人份/盒（25人份/筒×4筒）;HBeAg（生产厂家：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司﹐批准文号：国食药监械（准）字2014第3401095号;规格：2×50人份/盒、2×100人份/盒。）;HBeAb（生产厂家：深圳市新产业生物医学工程股份有限公司，批准文号：国食药监械（准）字2013第3400473号（变更批件）;规格：100测试/盒），HBsAb（生产厂家：艾康生物技术（杭州）有限公司;批准文号：国食药监械（准）字2010第3400379号;规格：50人份/盒、100人份/盒（25人份/筒×4筒），HBcAb（湖北中保龙医药有限公司;批准文号：生产厂家：苏械注准20152401292;规格：48/96T）;化学发光免疫分析法检测试剂盒：HBsAg（生产厂家：艾康生物技术（杭州）有限公司;批准文号：国食药监械（准）字2010第3400516号;规格：条型单人份包装：50人份/盒;条型筒装：100人份/盒（25人份/筒×4筒）;HBeAg（生产厂家：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司﹐批准文号：国食药监械（准）字2014第3401095号;规格：2×50人份/盒、2×100人份/盒。） HBeAb（生产厂家：深圳市新产业生物医学工程股份有限公司，批准文号：国食药监械（准）字2013第3400473号（变更批件）;规格：100测试/盒）;HBsAb（生产厂家：艾康生物技术（杭州）有限公司;批准文号：国食药监械（准）字2010第3400379号;规格：50人份/盒、100人份/盒（25人份/筒×4筒）;HBcAb（生产厂家：湖北中保龙医药有限公司;批准文号：苏械注准20152401292;规格：48/96T）。

1.2.3 检测方法

采集患者清晨空腹静脉血，进行离心处理（3500 rpm，时间：15分钟）获得血清。

（1）酶联免疫吸附法：使用相关试剂盒和酶标仪予以检测，操作人员需要严格依照试剂盒使用说明和酶标仪操作方法进行相关检测﹐测定指标为HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

（2）化学发光免疫分析法：使用相关试剂盒予以检测，操作人员需要严格依照试剂盒使用说明进行相应操作，测定指标为HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

1.3 疗效标准

对比两种方法的检测结果。（1）酶联免疫吸附法阳性判定标准：检测值≥上限参考值;HBsAg参考值0.2 ng/ml;HBsAb参考值10.0 mlU/ml;HBeAg参考值0.05 NCU/ml;HBeAb参考值2.0 NCU/ml;HBcAb参考值为1.5 NCU/ml。（2）化学发光免疫分析法的阳性判定标准：测定值≥上限参考值，测定参考值与酶联免疫吸附法相同。

1.4 统计学方法

研究所得到的数据均采用SPSS 23.0软件进行处理，（±s）用于表示计量资料，用t检验;（%）用于表示计数资料，用χ2检验。当所计算出的P<0.05时则提示进行对比的对象之间存在显著差异。

2结果

在60例患者中，采取酶联免疫吸附法检测HBsAg 阳性为40例，占比为66.67%;HBsAb阳性22例，占比为36.67%;HBeAg阳性为50例，占比为83.33%;HBeAb阳性为57例，占比为95.00% ;HBcAb阳性为45例，占比为75.00%。化学发光免疫分析法检测HBsAg 阳性为50例，占比为83.33%;HBsAb阳性33例，占比为55.00%;HBeAg阳性58例，占比为96.67%;HBeAb阳性59例，占比为98.33%;HBcAb阳性53例，占比为88.33%。χ2检验值：HBsAg（χ2=44.44，P=0.035）、HBsAb（χ2=4.062，P=0.044）、HBeAg（χ2=5.926，P=0.015）、HBeAb（χ2=0.209，P=0.648）、HBcAb（χ2=3.562，P=0.048）。由此可见，酶联免疫吸附法与化学发光免疫分析法的HBeAb陽性检出率比较差异不具备统计学含义（P>0.05）。化学发光免疫分析法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb阳性检出率相比较酶联免疫吸附法较高（P<0.05）。

3讨论

临床上常见的乙肝病毒感染检测指标分别为HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb五项，能够较好地表达患者体内乙肝病毒水平和机体反应情况。上述检测指标可分为定性以及定量，定性检查则是明确指标的阴、阳性结果，而定量检查则是上述指标的精确数值。上述指标在乙肝患者诊断、治疗中具有重要的作用，有助于医生为患者制定治疗方法。

酶联免疫吸附法属于一种定性法，其原理是经试剂使抗原、抗体结合某种固相载体表面，且保持其免疫活性，促使抗原、抗体和某种酶连接为酶标抗原以及抗体，能够保留免疫活性以及酶的活性。化学发光免疫分析法囊括两个部分，分别为免疫反应系统以及化学发光分析系统。其中化学发光分析系统则是经化学发光物质经催化剂的催化以及氧化剂氧化，产生激发态中间体。此种激发态中间体处于稳定基态期间可发射出光子，经发光信号对仪器测量光量子产额进行测量。免疫反应系统则是将发光物质直接在抗原、抗体上予以标记，以及酶作用在发光底物。由于反应原理不同，所以具备不同灵敏度以及检测限。出来上述差别，两种方法检测过程也存在差异。酶联免疫吸附法需要进行手动加样、明确孵育时间和手动洗板等，这就受到操作人员手法不同影响，引起结果存在差异[2]。本次研究结果中，酶联免疫吸附法与化学发光免疫分析法的HBeAb阳性检出率比较差异不具备统计学含义（P>0.05）。化学发光免疫分析法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb阳性检出率相比较酶联免疫吸附法较高（P<0.05）。结果可见化学发光免疫分析法的检测效果优于酶联免疫吸附法。

综上所述，化学发光免疫分析法具有较高的敏感度，检测准确度较高，有助于乙肝患者的治疗，在乙肝病毒感染性标志物检测中具有重要意义。

参考文献

[1]黄光豪.酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法检测孕妇乙型肝炎表面抗原结果的比较[J].医学食疗与健康，2020，18（6）：2.

[2]李丹.乙肝病毒血清学检验中化学发光免疫分析技术与酶联免疫吸附试验检验效果对比分析[J].医药前沿，2020，10（1）：2.