叶酸结合蛋白1、间皮素在卵巢癌组织中的表达及临床病理意义

汪冠军，宋立强

(西平县人民医院病理科，河南 西平 463900)

卵巢癌是妇科3大恶性肿瘤之一，预后最差，近20 a来其发病率以每年0.1%的速度增长，且在初期临床症状较少，诊断较为困难，早期得到救治较少，5 a生存率仅为20%～30%，严重威胁女性的生命安全[1-2]。卵巢癌的早期筛查主要依赖于定期普查，且患者经治疗后复发率较高，复发后并无有效的治疗方法，因而分析有效的生物标志物对疾病的预防、预后评估均具有一定的价值[3-4]。叶酸结合蛋白1(folate binding protein 1, FOLR1)、间皮素(mesothelin, MSLN)在卵巢癌的进程中研究相对较少，其表达机制目前尚存在争议[5]。基于此，本研究旨在分析FOLR1、MSLN蛋白在卵巢癌组织中表达的变化及临床病理意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料回顾性分析2017年7月至2019年9月西平县人民医院收治的90例卵巢癌患者的临床资料。所有患者均符合卵巢癌相关诊断标准[6]，B超、CT等影像学及组织活检确诊，并排除子宫内膜异位症、转移癌患者。病理类型：浆液性囊腺癌56例，子宫膜样癌27例，黏液性囊腺癌7例；分化程度：中低分化75例，高分化15例；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期30例，Ⅲ～Ⅳ期60例；淋巴结转移：有24例，无66例。收集上述患者术后切除癌组织，质量分数4%中性多聚甲醛溶液固定24 h(标本离体到固定时间需<0.5 h)，石蜡包埋，4 μm连续切片。同时选择交界性卵巢肿瘤组织标本15例、正常卵巢组织标本30例作为对照。

1.2 标本处理方法标本切片后进行免疫组化染色：将组织放置于60 ℃烤箱中拷片(>30 min)，采用二甲苯(或二甲苯替代品)为石蜡切片脱蜡，再用无水乙醇梯度稀释液回水。苏木素-伊红染色：利用细胞内外的酸碱度与苏木素、伊红进行化学反应，细胞核与苏木素呈蓝色，细胞质与伊红呈红色。采用中性树胶、甘油等封片。每张切片随机选择5个高倍镜视野，若细胞膜着色则表示蛋白表达。并根据染色强度进行计分，棕褐色3分、棕黄色2分、浅黄色1分、未着色0分；再根据染色阳性率计分，无阳性0分、1%～25% 1分、26%～50% 2分、51%～75% 3分、76%～100% 4分。将染色强度与染色阳性率计分的乘积作为最终判断蛋白表达的结果，≤4分表示蛋白表达阴性，>4分则表示蛋白表达阳性。免疫组染色化试剂盒购自美国Thermo Fisher Scientific公司。

1.3 指标评价按照上述方法检测和比较分析不同卵巢组织中FOLR1、MSLN蛋白的表达，并分析FOLR1、MSLN表达与卵巢癌患者临床病理参数的关系。

1.4 统计学处理采用SPSS 23.0进行数据处理，计数资料用百分数表示，比较用χ2检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 FOLR1、MSLN蛋白在不同卵巢组织中的表达卵巢癌组织中FOLR1、MSLN的阳性率分别为86.67%、61.11%，明显高于交界性卵巢肿瘤组织(6.67%、13.33%)、正常卵巢(3.33%、0.00%)，差异均有统计学意义(χ2=84.053，P<0.001；χ2=40.218，P<0.001)。见表1。

表1 FOLR1、MSLN蛋白在不同卵巢组织中的表达 n(%)

2.2 FOLR1、MSLN蛋白表达与卵巢癌临床病理参数的关系卵巢癌组织中FOLR1表达与其临床分期关系密切(χ2=18.281，P<0.001)；卵巢癌组织中MSLN表达与其临床分期、淋巴结转移关系密切(χ2=11.314，P=0.001；χ2=6.800，P=0.009)。见表2、3。

3 讨论

卵巢癌早期症状不明显，缺乏特异性症状，临床早期诊断较为困难，约2/3患者就诊时已经处于晚期，而早期发现、诊断及治疗可降低病死率，因而卵巢癌的早期诊断是临床治疗的关键，寻找准确率较高的诊断方法极为重要[7]。随着对肿瘤发病机制的深层次研究，发现多种基因共同参与肿瘤的发生、发展这一过程，因而寻找敏感的生物标志物对于疾病的诊断、治疗、预后等均具有一定的价值。FOLR1蛋白属于糖基化磷脂酰基醇偶联蛋白，对叶酸与其衍生物的亲和力较高[8]。既往研究[9-10]发现，在恶性肿瘤组织中FOLR1蛋白呈现高表达，在正常组织中表达较低，且发现上调FOLR1的表达可增加叶酸的摄取量，从而保证机体的需求。根据上述研究可推测出FOLR1蛋白在卵巢癌组织中呈高表达。本研究结果显示，FOLR1蛋白表达从正常卵巢组织、交界性卵巢肿瘤组织到卵巢癌组织的阳性率不断增加，且卵巢癌组织中FOLR1蛋白阳性率高于交界性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织。这也验证了之前的推测。

表2 FOLR1蛋白表达与卵巢癌临床病理参数的关系 n(%)

表3 MSLN蛋白表达与卵巢癌临床病理参数的关系 n(%)

MSLN蛋白属于一种细胞表面糖蛋白，在多种实体瘤组织中均有表达，与细胞的存活、增殖、黏附以及肿瘤的进展均具有一定的关系，且有研究指出MSLN蛋白除了可以用于评估肿瘤治疗的效果，也可作为潜在的肿瘤治疗靶点[11-12]。本研究结果还显示，MSLN蛋白在卵巢癌组织中的阳性率明显高于交界性卵巢肿瘤组织、正常卵巢组织，提示了MSLN蛋白作为卵巢癌的早期诊断标志的可行性。

梁振等[13]研究发现，FOLR1、MSLN蛋白表达与卵巢癌患者临床病理参数具有一定的关系。本研究通过分析FOLR1、MSLN蛋白与卵巢癌患者临床病理参数的关系发现，卵巢癌组织中FOLR1蛋白表达与其临床分期关系密切，MSLN蛋白表达与其临床分期、淋巴结转移关系密切，由此提示FOLR1、MSLN蛋白表达的异常可提示卵巢癌病情程度，从而评估患者的预后。目前，关于卵巢癌的肿瘤标志物较多，且大多采用血清标本检测，而通过检测人体组织中的生物标志物相对稳定，可降低外在因素的影响，进行预后更为准确的评估，也为临床治疗方式的选择提供新的思路[14-15]。

综上所述，FOLR1、MSLN蛋白表达与卵巢癌患者临床病理参数具有相关性，共同参与疾病的进程，通过检测FOLR1、MSLN蛋白表达可评估卵巢癌的治疗及预后情况。