气相色谱法测定食用油中3种合成抗氧化剂

◎ 龙 亮

（阳西美味鲜食品有限公司，广东 阳江 529800）

植物油是日常消费量最大的食用油脂，而大多数植物类油脂的性质并不稳定，在受热、光照等条件下会出现氧化反应[1]，导致油脂口感下降、营养价值降低，严重时还会对人体健康造成不良影响[2]。为防止食用油脂在储存和使用过程中发生氧化酸败，保证油脂的质量安全，向油脂中添加合成抗氧化剂是最有效的[3]手段。本文主要利用气相色谱法对食用油抗氧剂的检测方法进行探索。

1 材料与方法

1.1 仪器与设备

6890N气相色谱仪（FID检测器，安捷伦科技有公司）、飞鸽牌TDL-5C离心机（上海安亭科学仪器厂）及VM-B漩涡混匀器（上海皓庄仪器有限公司）。

1.2 材料与试剂

甲醇，色谱纯；叔丁基对苯二酚-TBHQ标准品：规格0.25 g，纯度99.25 %；叔丁基对羟基苯甲醚-BHA标准品：规格0.1 g，纯度99.81 %；2，6-二叔丁基 -4-甲基苯酚-BHT标准品：规格0.25 g，纯度98.81%。 试剂均购自上海安谱实验科技股份有限公司。

抗氧化剂标准储备液（1 mg·mL-1）配制：分别称取以上3种抗氧化剂标准品各50.0 mg，用甲醇溶解定容至50 mL，摇匀，0～4 ℃避光保存。

抗氧化剂标准工作液：临用前用甲醇稀释至适当浓度。

1.3 色谱条件

色谱柱：DB-1701（14%-氰丙基-苯基）-二甲基聚硅氧烷色谱柱，30 m×0.320 mm×0.25 μm。

升温程序：初始柱温100 ℃，保持1 min，以 10 ℃·min-1升温至230 ℃，（后运行温度240 ℃，运行时间6 min）；进样口温度：230 ℃；检测器温度：250 ℃；进样量：1 μ L，不分流进样；载气：氮气，纯度≥99.999 %，流速1 mL·min-1。

1.4 试验步骤

1.4.1 标准曲线制作

将抗氧化剂（BHA、BHT和TBHQ）标准储备液稀释成1 mg·L-1、5 mg·L-1、10 mg·L-1、20 mg·L-1和 50 mg·L-1标准系列质量浓度上机测定，根据峰面积绘制标准曲线[4]。

1.4.2 样品前处理

准确称取2 g植物油样于12 mL离心管中。10 mL甲醇分3次加入提取（3 mL、3 mL、4 mL），并分别在混匀器上快速混匀1 min，离心5 min（2 000 r·min-1），吸取上清液共3次合并于25 mL具塞试管中，于混匀器混匀后分装样品瓶上机测定。同时进行空白试验。

1.5 回收率的测定

取玉米油低浓度阳性样品进行加标（BHT、BHA、TBHQ），根据称取的样品质量，加入相应体积抗氧化剂标准储备液（1 mg·mL-1），使加标水平为5.0 mg·kg-1。混匀后再分别对加标试样重复测定6次，再根据测定结果分别计算3种抗氧化剂的回收率。

2 结果与分析

2.1 标准曲线

将抗氧化剂标准储备液稀释成1 mg·L-1、5 mg·L-1、10 mg·L-1、20 mg·L-1和50 m·L-1，5个标准系列质量浓度上机测定，根据峰面积（响应）绘制校正曲线，结果图1～图3所示。BHT、BHA、TBHQ标准曲线的相关系数分别为0.999 94、0.999 96、0.998 61，标准要求标曲相关系数≥0.995，符合要求，曲线均可以使用。

图1 BHT标准曲线图

图2 BHA标准曲线图

图3 TBHQ标准曲线图

2.2 回收率试验

取玉米油阳性样品进行加标（BHT、BHA、TBHQ）， 加标水平为5.0 mg·kg-1。再分别对加标试样进行6次平行试验，计算回收率，试验数据见表1。根据 GB/T 27404—2008要求，被测组分含量为1～100 mg·kg-1时，回收率要求为90%～110%，本实验测定回收率为91.3%～109.4%，符合要求。

表1 回收率试验结果表

2.3 检出限与定量限试验

表2 检出限与定量限试验结果表

取玉米油阳性（BHT、BHA、TBHQ）低浓度样品进行6次独立试验，通过计算其标准偏差（SD），测定该方法的检出限与定量限，试验数据详见表2。

2.4 外部比对结果

与采用相同检测方法的外部实验室和本实验室进行比对，验证该方法的准确性，试验数据如表3所示，结果满足精密度小于20%的要求。

表3 外部比对结果表

3 结论

经对以上试验数据进行分析可知，本实验室采用气相色谱法对植物油中的抗氧化剂BHT/BHA/TBHQ进行测定，该方法灵敏度高、回收率试验再现性强、检出限低，能够准确测定出食用油中抗氧化剂的含量。