孕妇生殖道B群链球菌培养筛查方法对比分析

黄思杰

摘要：目的：对孕妇B群链球菌（GBS）培养筛查方法进行对比分析。方法：选取2019年10月～2021年10月在营山县中医医院进行产前GBS普筛的200名孕妇为研究对象，所有孕妇均应用四种GBS培养方法，包括血琼脂培养、显色琼脂培养、普通增菌液培养以及显色增菌液培养，对比四种GBS培养方法的阳性检出率，阳性检出时间。调查GBS阳性及阴性孕产妇的妊娠结局及新生儿结局。结果：显色增菌液培养的阳性率最高（9.5 %），其次为普通增菌液培养（7.5 %）、显色琼脂培养（5.5 %），血琼脂培养阳性率最低（2.5 %）。显色增菌液培养阳性检出时间最短，其次为显色琼脂培养。GBS阳性孕产妇的不良妊娠结局率为63.16 %，明显高于GBS阴性孕产妇的9.94 %（P < 0.05）;GBS阳性孕产妇新生儿不良结局率为57.89 %，明显高于GBS阴性的2.76 %（P < 0.05）。结论：显色增菌液培养GBS的阳性率最高，阳性检出时间最短，可作为预测孕产妇及新生儿结局的重要依据。

关键词：生殖道B群链球菌;培养筛查;阳性率;妊娠结局

B群链球菌（GBS）是一种寄居于女性生殖道的条件致病菌，也被称为无乳链球菌，GBS感染是引起新生儿感染、死亡的重要原因。孕妇感染GBS后，可出现产褥感染、早产、胎膜早破等不良妊娠结局，同时也可能引起新生儿肺炎、脑膜炎、脓毒症。研究认为，大部分新生儿GBS感染均为母婴垂直传播所致，因此，做好GBS感染预防及治疗非常重要[1]。美国疾病控制预防中心（CDC）GBS防治指南指出，建议对孕35～37周孕妇进行普遍筛查，对存在潜在风险的孕妇应用抗生素预防[2]。在GBS培养筛查方法选择方面，以往主要应用血平板分离鉴定法，但耗时较长，技术要求较高，操作繁琐，且具有一定假阳性率。因此，为寻找更为准确、高效的GBS检测方案，本文将对孕妇GBS培养筛查方法进行研究，现报道如下：

1 对象与方法

1.1 一般资料

选取2019年10月～2021年10月在营山县中医医院进行产前GBS普筛的200名孕妇。年龄23～34岁，平均年龄（29.29±4.60）岁;孕周35～37周，平均孕周（36.78±0.82）周。所有孕妇取材前至少2周无性生活，未使用抗生素，单胎妊娠，可配合检查及研究。

1.2 方法

所有孕妇均应用四种GBS培养方法。使用无菌拭子采集阴道分泌物，分别应用上海梅里埃公司的血琼脂平皿、郑州安图生物的显色琼脂平皿、珠海迪尔生物的普通增菌液、选择性显色液体培养基接种。将标本置于5% CO2培养箱，于37℃环境下培养，时间18～24 h，随后对血琼脂、显色琼脂上的可疑菌落进行分纯培养，例如革兰阳性球菌菌落、红色菌落。另外两者转种于血琼脂，置于5% CO2培养箱，于37℃环境下培养，时间18～24 h，分纯培养可疑菌落。

1.3 评价标准

（1）对比四种GBS培养方法的阳性检出率。（2）对比四种GBS培养方法的阳性检出时间。（3）调查GBS阳性及阴性孕产妇的妊娠结局及新生儿结局。

1.4 统计学处理

应用SPSS 22.0软件对临床资料进行统计分析，计数资料用（%）表示，行χ2检验;计量资料用（x±s）表示，行t检验;P < 0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 阳性检出率对比

200名孕妇，血琼脂培养GBS阳性5例，阳性率2.5 %;显色琼脂培养GBS阳性11例，阳性率5.5 %;普通增菌液培养GBS阳性15例，阳性率7.5 %;显色增菌液培养GBS阳性19例，阳性率9.5 %。可见显色增菌液培养的阳性率最高，血琼脂培养阳性率最低，差异明显（P < 0.05）。

2.2 阳性检出时间对比

血琼脂培养阳性检出时间为（72.92±3.89）h，显色琼脂培养为（52.53±5.66）h，普通增菌液培养为（71.67±3.90）h，显色增菌液培养为（39.62±3.72）h。可见显色增菌液培养阳性检出时间最短，明显低于显色琼脂培养、血琼脂培养、普通增菌液培养（P < 0.05）;其次为显色琼脂培养，明显低于血琼脂培养、普通增菌液培养（P < 0.05）;血琼脂培养、普通增菌液培养无明显差异（P > 0.05）。

2.3 孕产妇妊娠结局对比

GBS阳性孕产妇的不良妊娠结局率为63.16 %，明显高于GBS阴性孕产妇的9.94 %，差异明显（P < 0.05），见表1。

2.4  新生儿结局对比

GBS阳性孕产妇新生儿不良结局率为57.89 %，明显高于GBS阴性的2.76 %，差异明显（P < 0.05）。见表2。

3 讨论

女性在妊娠期机体及生殖道内环境均会出现明显改变，阴道上皮细胞糖原水平可出现明显升高，乳酸浓度也处于较高水平，因此为耐酸微生物的生长创造了良好的条件，导致其大量繁殖，并造成阴道内微环境破坏，阴道黏膜受损，机体免疫下降，更容易受到病原菌入侵，增加细菌感染风险。GBS是一种常见的条件致病菌，属于革兰阳性菌-无乳链球菌，主要存在于厌氧环境。研究发现，链球菌感染是导致围生期母婴感染、婴幼儿败血症、脑膜炎等并发症的重要危险因素[3]。主要是由于GBS对绒毛膜组织的吸附力、穿透力较强，因此更容易引起孕产妇不良结局，引起孕妇生殖道感染。同时若不能及时有效地控制GBS感染，还可能引起胎儿宫内生长受限、新生儿感染、智力发育迟缓、视听觉丧失等不良妊娠结局及远期后遗症[4]。由此可见，应对GBS感染提高重视程度，做好早期筛查，并采取恰当的干预措施。

在GBS培养方面，分子生物学方法虽然能够在短时间内完成检测，但操作复杂，成本较高，技术及设备要求较高，且无法针对菌种进行药敏试验，因此在一定程度上限制了其临床应用。传统微生物检验检出率不高，耗时较长，不适合高通量的GBS检测。因此，本文应用了四种GBS培养方法，结果显示，显色增菌液培养的阳性率最高（9.5 %），其次为普通增菌液培养（7.5 %）、显色琼脂培养（5.5 %），血琼脂培养阳性率最低（2.5 %）。显色增菌液培养阳性检出时间最短，其次为显色琼脂培养，与血琼脂培养、普通增菌液培养差异明显（P < 0.05），可见显色增菌液培养在检出阳性率及检出时间方面均更具优势。从整体上看，单纯平皿培养具有较高的漏检率，分析其原因，主要是由于阴道内杂菌较多，其生长会被其他杂菌抑制，导致漏检发生，而液体增菌能够使原始标本菌量扩大，从而达到提高阳性检出率的目的。同时，与普通增菌液相比，显色液体培养基的阳性检出率更高，主要是由于其中含有萘啶酮酸、庆大霉素，能够对阴道寄生的其他细菌产生抑制作用，因此GBS能够更好地生长，通过大量扩增提高培养阳性率[5]。此外从检出时间上看，可见显色培养的检出时间均短于普通培养，而显色培养方法中，显色增菌液培养的检出时间更短。主要是由于显色琼脂及增菌液均有能够促使GBS特异性显色的底物，培养物能够表现出不同的颜色，不需过多的操作和实验技能，可直接根据颜色判断结果，因此检测时间明显缩短。以往有研究显示，显色培养法的灵敏度、特异度均高于普通培养，但培养6 h灵敏度偏低，反应颜色较浅，培养12 h后可达到更高的灵敏度及特异度[6]。分析其对孕妇妊娠结局预测价值，在本次研究中，GBS阳性孕产妇的不良妊娠结局率为63.16 %，明显高于GBS阴性孕产妇的9.94 %（P < 0.05）;GBS阳性孕产妇新生儿不良结局率为57.89 %，明显高于GBS阴性的2.76 %（P < 0.05），可见GBS阳性孕产妇及新生儿不良结局的风险更高。显色增菌液培养能够更好地检出GBS感染情况，从而预测其不良结局风险，指导临床治疗。

综上所述，显色增菌液培养GBS的阳性率最高，陽性检出时间最短，可作为预测孕产妇及新生儿结局的重要依据。

参考文献

[1]张昭勇，杨宏伟，张吉才.围产期孕妇B群链球菌三种筛查方法的评估[J].临床误诊误治，2020，33（7）：54-57.

[2]徐少勇，钟群英.免疫层析法快速检测临产急诊入院孕妇生殖道B族链球菌（GBS）的价值分析[J].现代诊断与治疗，2019，30（15）：2633-2635.

[3]胡矩锋.孕晚期B群链球菌对母婴围产结局的影响[J].中国社区医师，2020，36（11）：15-16，18.

[4]马文静.孕期细菌性感染宫颈分泌物菌群分布特点及耐药性分析[J].医学理论与实践，2019，32（13）：2103-2104.

[5]孙雷，孙继文，邵坤.B族链球菌显色培养在产前筛查中的应用及孕妇妊娠结局预测价值[J].国际检验医学杂志，2021，42（20）：2515-2518.

[6]符叶，沈婕，管翠，等.三种培养法在妊娠晚期孕妇B族链球菌感染筛查中的应用[J].中华医院感染学杂志，2021，31（5）：753-757.