复发性流产与精子畸形率和DNA完整性的相关性分析

姜丽丽 罗 慧 胡雅平 李朝彬 李 涛 李 想 冯永琦*

1.陕西省宝鸡市妇幼保健院(721000)；2.陕西省榆林市星元医院

复发性流产也叫做习惯性流产，受年龄、环境、身体素质、疾病等多重因素影响，占所有流产因素的20%[1]。病因未完全阐明，目前研究侧重于母体方面，并认为50%以上与胚胎染色体异常有关，但仍有较多复发性流产无法找到病因[2]。胚胎由男性提供一半遗传物质，因此精子状态也可能是复发性流产的重要影响因素[3]。文献[4-5]提示精子畸形率和DNA损伤极有可能造成男性不育，且随着年龄的增大，精子畸形和DNA完整性下降的可能性也越高。本研究对复发性流产与精子畸形率和DNA完整性的相关性进行分析，为临床复发性流产的治疗和预防提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年6月-2019年6月本院治疗复发性流产患者的配偶男性为流产组。纳入标准：与同一配偶发生≥2次流产。排除标准：①染色体异常、有免疫系统疾病；②配偶妊娠期综合征及其他疾病；③生殖系统疾病；④心血管疾病或其他重大疾病。同时选取有正常生育史男性为对照组，其女方在一年内均有正常生育。本研究获得医学伦理委员会的批准，受试者均知情同意。

1.2 实验方法

精液收集后保存于液氮中待检，每个样品共取5000～10000条精子。常规分析男子精液，检测仪器为北京伟力科技发展公司生产的伟力WLJY-9000彩色精子质量检测系统，通过Kruger标准评定精子畸形率。样本吖啶橙染色精子DNA染色体检测选用Calibur公司生产的流式细胞仪，488nm波长测定DNA完整性。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 两组精液常规参数比较

流产组150例，年龄(28.9±3.1)岁，女方年龄(22～28)岁；对照组150例，年龄(28.8±3.2)岁，女方年龄(22～28)岁。两组无差异(P>0.05)。对照组精子活率、A级百分比、精子浓度、前向运动精子均高于流产组(P<0.05)。见表1。

2.2 两组精子畸形率比较

流产组头部畸形率、尾部畸形率均高于对照组(P<0.05)，精子颈部和中断两组无差异(P>0.05)。见表2。

表1 两组精液常规参数比较

表2 两组精子畸形率比较

2.3 两组精子DNA完整性比较

流产组精子碎片率(DFI)值(28.5±2.35%)高于对照组(13.4±1.27%)(t=69.23，P=0.000)。

2.4 复发性流产与精子畸形率和DNA完整性的相关性分析

Spearman相关数据分析显示，精子畸形率(r=-0.347,P=0.026)、精子活动率(r=-0.534,P=0.008)和DFI(r=0.512,P=0.000)与复发性流产相关。

3 讨论

临床对复发性流产病因确定者仅占50%，主要包括染色体异常、母体生殖道异常、母体内分泌异常、免疫功能异常、生殖道感染、宫颈机能不全及血栓形成倾向等[6-7]。目前关于复发性流产的病因男方因素研究相对较少，精子异常可能影响胚胎继续发育进而导致胚胎停育或流产[8-9]。

精液常规分析是临床评估男性生育力的基本检测手段，对男性“少精弱精症”诱发的不育具有一定诊断价值[10-11]。 但在女性流产中，精液常规参数与胚胎丢失的相关性尚存在分歧[12]。本研究发现对照组精子活动、A级百分比、精子浓度和前向运动率均高于流产组。精子载有男性的遗传信息，无损伤、高质量的精子是父系遗传信息完整传递给子代的前提[13-14]。本研究流产组头部畸形率、尾部畸形率均高于对照组，精子颈部和中断无差异，精子畸形率略高于对照组，DFI值高于对照组，表明流产组DNA碎片化程度较大。精子DNA损伤即精子DNA发生单链或双链断裂，主要由精索静脉曲张、化疗、放疗、吸烟、氧化应激反应、电离辐射、鱼精蛋白缺乏等原因造成[15]。DNA受损的精子仍可受精，而精卵结合后卵母细胞具有修复精子DNA的功能，如完全修复，则受精卵继续发育，可正常妊娠分娩[16]。但如果精子DNA损伤严重，或卵母细胞修复能力减弱，结果可能导致流产、胚胎停育或畸形[17-18]。说明健康男性的精子质量普遍高于具有复发性流产史男性，这也提示精子质量对改善复发性流产有潜在作用。

本研究发现精子畸形率、精子活动率和DFI与复发性流产相关，提示提高男性精子质量可以有效避免复发性流产的发生。为预防复发性流产，建议孕前检查精子畸形率和DNA完整性。自然受精和体外受精需要精子识别并穿透包绕卵子的颗粒细胞和透明带的黏液基质，透明质酸是卵子和透明带黏液基质的主要成分，精子与卵子透明质酸结合，继而实现穿透与受精。但是精子仅在成熟后才能获得与透明质酸结合的能力，不成熟的精子不具备与透明质酸结合的能力，导致受精失败，而精子畸形率或DNA完整性较差多会造成患者精子成熟可能性较低，这也可能是导致复发性流产的原因之一[19-20]。

综上所述，复发性流产与精子畸形率和DNA完整性密切相关，提高男性精子质量可以有效避免复发性流产的发生。