不同水平维生素D3对产蛋期种鹅繁殖性能、血清生殖激素及抗氧化指标的影响

邢 月，王宝维*，葛文华，孔 敏，王焕森，刘晨龙，凡文磊，张名爱，汪 超

（1.青岛农业大学优质水禽研究所，国家水禽产业技术体系营养与饲料研究室，山东青岛 266109；2.重庆市畜牧科学院，重庆 402460）

维生素D3是一种重要的营养元素，在种禽的钙磷吸收、骨骼发育及蛋壳形成过程中发挥重要作用。目前，国外关于种鹅维生素D 需要量研究报道很少，美国NRC标准中种鹅维生素D3营养需要量的建议为200 IU/kg饲料，澳大利亚建议种鹅营养需要量为1 400 IU/kg 饲料。王迪[1]根据生长性能试验结果建立的回归方程确定鹅饲粮维生素D3最适添加量为0～4 周471.70 IU/kg、5～15 周548.63 IU/kg。解俊美[2]研究表明，添加适量维生素D3可显著增强蛋雏鸭血清和肝脏总抗氧化能力，提高血清睾酮含量。白建[3]研究表明，蛋鸡饲粮中添加240 IU/kg 维生素D+3.8%钙可改善蛋品质。雷立宁等[4]研究表明，海兰褐壳蛋鸡饲粮添加过量维生素D3会明显增加软壳蛋、破蛋的概率。何颖辉[5]研究表明，饲粮维生素D 添加量是蛋鸡产软壳蛋的重要影响因素之一。目前，关于种禽维生素D3的营养需要量主要集中于鸡和鸭，种鹅的维生素D3营养需要量还缺乏系统研究。本试验以产蛋期五龙鹅为研究对象，旨在研究饲粮中添加不同水平的维生素D3对种鹅繁殖性能、血液生殖激素及抗氧化力的影响，以便精准确定种鹅产蛋期饲粮中维生素D3的适宜添加水平，为完善我国种鹅营养需要量数据库提供技术支撑

1 材料与方法

1.1 试验动物及设计 试验选择34 周龄体况相近的五龙鹅种鹅180 只，随机分为6 组（0、100、200、300、400、500 IU/kg 组），每组6 个重复，每重复5 只（1公4 母）。试验预试期1 周，正试期10 周。各组试验鹅由青岛农业大学优质水禽研究所育种基地提供，饲养方式采用开放式鹅舍地面平养，试验用维生素D3（有效成分500 000 IU/g）购自浙江博朗药业有限公司。

1.2 试验饲粮 试验用基础饲粮参照NRC（1994）家禽营养需要量中推荐的种鹅饲粮营养水平设计配方。种鹅的饲粮组成和营养成分见表1。

表1 基础饲粮组成及营养成分（风干基础）

1.3 饲养管理 试验种鹅采用地面饲养方式，全期自由采食，自由饮水。试验前对鹅舍进行充分冲洗和严格消毒，试验期内每周消毒2 次。

1.4 繁殖性能的测定 繁殖性能指标测定与计算方法按照《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》（NY/T 823-2004）标准进行。每天08:00 捡蛋，记录产蛋数、耗料量、合格蛋数。每重复随机挑选种蛋20 个，每组挑选120 个，6 组共720 个蛋，30 d 入孵1 次，共入孵2 次，入孵蛋为最近10 d 产出的新鲜种蛋，分别记录入孵蛋数、无精蛋数、死胚蛋数、出雏数、健雏数、弱雏数。计算料蛋比、产蛋率、种蛋合格率、受精率、受精蛋孵化率、健雏率。

1.5 血清生殖激素含量的测定 试验结束时，各组每重复抽取体重相近的母鹅2 只，每组12 只，共72 只，翅静脉采血，3 000 r/min 离心制得血清样品，分装，-40℃冷冻保存。血清雌二醇、睾酮、催产素、黄体生成素、孕酮、促卵泡素含量均采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验测定，所用试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。

1.6 血清抗氧化指标的测定 血清总抗氧化能力采用比色法测定，血清总超氧化物歧化酶活性采用羟胺法测定，血清谷胱甘肽过氧化物酶活性采用比色法测定，血清丙二醛含量采用硫代巴比妥酸反应法测定。上述所用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.7 统计分析 采用SPSS 22.0 软件的单因素方差分析（One-Way ANOVA）和Duncan's 多重比较方法，分析饲粮不同维生素D3添加水平的影响及各项指标间的差异。其中，P<0.05 表示差异显著，P<0.01 表示差异极显著。数据以均值和均值标准误差（SEM）表示。采用SPSS 22.0 软件的曲线估计对繁殖性能进行二次曲线拟合，获得最适添加量。

2 结果

2.1 饲粮中添加不同水平维生素D3对种鹅繁殖性能的影响 由表2 可知，饲粮中不同水平维生素D3对种鹅的受精率、健雏率影响不显著。300、400、500 IU/kg组的产蛋率高于0 IU/kg 组（P<0.01），400 IU/kg 组高于100 IU/kg 组（P<0.01），300、500 IU/kg 组高于100 IU/kg 组（P<0.05）；500 IU/kg 组的料蛋比低于0、100、200、300 IU/kg 组（P<0.01）及400 IU/kg 组（P<0.05）；300、400、500 IU/kg 组的种蛋合格率高于0 IU/kg 组（P<0.01）及100、200 IU/kg 组（P<0.05）；200、300、400、500 IU/kg 组的孵化率高于0、100 IU/kg组（P<0.05）。

对0～500 IU/kg 组产蛋率、种蛋合格率、孵化率（Y）分别与饲粮维生素D3添加水平（X）进行二次曲线拟合，建立回归方程：

由上述曲线回归方程得出，饲粮维生素D3添加水平在466 IU/kg 时，种鹅的种蛋合格率较高；而产蛋率和孵化率与饲粮维生素D3添加水平间的曲线拟合度低（R2<0.700），二次性关系不显著，没有参考价值，因此没有选择。另外，由于本批试验种鹅品种且刚进入产蛋期，故存在受精率较低的情况。在维生素D3添加水平为400 IU/kg 时，种鹅的料蛋比、产蛋率、孵化率及健雏率均达最佳，此时种鹅的繁殖性能良好。

2.2 饲粮中添加不同水平维生素D3对产蛋期种鹅血清激素指标的影响 如表3 所示，饲粮不同维生素D3添加水平对产蛋期种鹅的催乳素、黄体生成素、促卵泡素含量无显著影响；0 IU/kg 组的孕酮含量低于其他各组（P<0.01）；400 IU/kg 组的睾酮含量高于0 IU/kg 组（P<0.01）及100、200、500 IU/kg 组（P<0.05）；300、400 IU/kg 组的雌二醇含量高于0 IU/kg 组（P<0.01）及100、200、500 IU/kg 组（P<0.05）。结果表明，随饲粮维生素D3添加水平的增加，血清孕酮、睾酮、雌二醇均呈先增加后降低趋势，饲粮维生素D3添加水平为400 IU/kg 时，种鹅血清孕酮和睾酮含量均能达到最高。

2.3 饲粮中添加不同水平维生素D3对产蛋期种鹅血清抗氧化指标的影响 由表4 可知，饲粮中添加不同水平维生素D3对种母鹅血清丙二醛及总抗氧化能力影响不显著；400 IU/kg 组的总超氧化物歧化酶活力高于0 IU/kg 组（P<0.01）及 100 IU/kg 组（P<0.05），200、500 IU/kg组高于0 IU/kg 组（P<0.05）；500 IU/kg 组谷胱甘肽过氧化物酶活力高于0 IU/kg 组（P<0.01）及100 IU/kg组（P<0.05），200、300、400 IU/kg 组谷胱甘肽过氧化物酶活力高于0 IU/kg 组（P<0.05）。结果表明，饲粮维生素D3添加水平为400 IU/kg 时，总超氧化物歧化酶活力及谷胱甘肽过氧化物酶活力均可达到最大值。

3 讨 论

3.1 饲粮中添加不同水平维生素D3对产蛋期种鹅繁殖性能的影响 迄今为止，种鹅繁殖性能的研究大都集中于温度、湿度、孵化器、种蛋的遗传性、应激以及饲养密度等方面，对于种鹅的营养元素，特别是维生素D3对繁殖性能的影响研究较少。康乐等[6]研究指出，严重缺乏维生素D3时可导致产蛋后期蛋鸡停产。杨丽娜[7]研究表明，维生素D 对雏鸡健康孵化有重要影响。赖思纯等[8]研究表明，饲料中缺乏维生素A、维生素D会导致蛋鸡出现严重的孵化率下降。许英民[9]指出，维生素D 缺乏可导致母鹅产出薄壳、软壳蛋，新鲜蛋内蛋黄波动性增大，出雏率降低。Deluca 等[10]研究表明，母鸡缺乏维生素D 时所产蛋孵化时上喙发育不全，胚胎正常率极低，向胚胎中注射25-羟基维生素D3或维生素D3，胚胎正常率大幅增加，尤其是注射维生素D3组，胚胎正常率提高80%以上。弓浩杰等[11]研究表明，添加25-羟基维生素D3也可提高产蛋后期蛋鸡产蛋性能。还有研究表明，饲粮添加维生素D 对蛋鸡产蛋率未产生明显影响[12-13]。本研究结果表明，维生素D3对产蛋期种鹅产蛋率、种蛋合格率和孵化率影响显著；随着维生素D3添加水平的增加，种蛋受精率和健雏率也有提高趋势，但本研究维生素D3的添加水平与NRC 标准接近，而与其他研究结果差异较大。本试验结果表明，种鹅维生素D3添加水平在400～500 IU/kg 效果较好，对种鹅繁殖性能有明显促进作用，是采用开放式地面鹅舍饲养获得的参数，其中地面啄食及自然光照等因素或有一定影响，而密闭鹅舍维生素D3需要量还有待于继续研究。

表2 饲粮中添加不同水平维生素D3对产蛋期种鹅繁殖性能的影响

表3 饲粮中添加不同水平维生素D3对产蛋期种鹅生殖激素的影响

表4 饲粮中添加不同水平维生素D3对产蛋期种鹅血清抗氧化指标的影响

3.2 不饲粮中添加不同水平维生素D3对产蛋期种鹅血清生殖激素含量的影响 赵珍丽等[14]研究指出，维生素D3可能在禽类的生殖周期中发挥一定的重要作用。解俊美[2]对蛋雏鸭的研究表明，随维生素D3添加水平的增加，血清睾酮含量呈先增加后降低的趋势，550 IU/kg 添加组睾酮含量显著高于110、220、1 000 IU/kg 组。邱凌云[15]研究指出，添加25-羟基维生素D3使罗曼粉壳蛋鸡血清促卵泡素含量显著增加。本试验也研究表明，随饲粮维生素D3添加水平的增加，血清孕酮、睾酮、雌二醇均呈先增加后降低趋势。维生素D3本身不具有生物学活性，经肝脏中的25-羟化酶、肾脏中的1-α羟化酶进行2 次羟基化形成活化形式1,25-二羟基维生素D3。Deluca 等[10]发现，雌二醇对成熟雄鸡的1-α羟化酶有明显的促进作用，若同时加入睾酮、孕酮、雌二醇能够最大程度地促进1-α羟化酶发挥作用。这表明成熟种禽的生殖激素在维持自身生殖系统的同时，也可促进维生素D3的代谢，保证机体摄入足量的钙来满足产蛋等需求。

3.3 饲粮中添加不同水平维生素D3对产蛋期种鹅抗氧化指标的影响 在机体抗氧化方面，刘禹辰等[16]研究表明，产蛋后期蛋鸡应用含维生素D3液态维生素制剂会使总抗氧化能力下降，丙二醛含量增加。解俊美[2]研究表明，添加220、550 IU/kg 维生素D3可显著增强蛋雏鸭血清超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性及血清和肝脏总抗氧化能力。张淑云等[17]研究指出，随维生素D3添加水平增加，生长肉鸡血清总超氧化物歧化酶、总抗氧化能力、丙二醛活力变化不显著。MukhopaDhyay 等[18]研究指出，维生素D3可以提高谷胱甘肽过氧化物酶和还原性酶类活力。李万佳等[19]研究指出，饲粮维生素D 添加水平对生长獭兔血清总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力影响极显著，随维生素D 添加水平增加呈先升高后降低的趋势。本试验发现添加不同水平维生素D3对血清总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力有影响。结合前人结论，添加适量的维生素D 对总超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性有一定诱导力，参与维持体内自由基产生与消除的动态平衡。

4 结 论

本试验条件下，饲粮中添加适宜水平的维生素D3能够显著提高产蛋期种鹅产蛋率、种蛋合格率和孵化率，降低料蛋比；饲粮中适宜维生素D3添加水平能够显著提高产蛋期种鹅血清孕酮、睾酮、雌二醇含量；饲粮中适宜维生素D3添加水平可提高种鹅血清抗氧化指标；建议种鹅产蛋期饲粮中维生素D3添加水平为400～500 IU/kg。