μ阿片受体1基因rs1799971多态性和酒精依赖关系的Meta分析

王玲丽，赵志强，靳新荣

(乌鲁木齐市第四人民医院新疆精神卫生中心 a.精神科；b.成瘾医学科，新疆 乌鲁木齐 830002)

酒精依赖是由于长期过度饮酒所导致的对酒精渴求的心理状态，患者往往无法控制其饮酒行为并且会出现戒断症状。随着现代社会生活节奏的加快和生活方式的变化，酒精依赖的患病率也逐渐增高。文献报道[1-2]酒精依赖在欧洲人群中的患病率约为8.7%，在我国人群中的患病率则高达11.56%。酒精依赖不仅给患者自身健康带来极大危害，还会导致一系列家庭和社会问题，其已经发展为亟待解决的公共卫生问题[3]。酒精依赖的发生受遗传和环境因素的共同影响。随着遗传学和分子生物学技术的发展，研究人员越来越关注遗传因素和酒精依赖的关系。Kendler等[4]报道瑞典男性同卵和异卵双胞胎长期的随访研究发现，遗传因素在酒精依赖的发生中所起的作用占50%以上。大量基因及多态性位点和酒精依赖的发生相关[5]。μ阿片受体1(mu opioid receptor 1，OPRM1)基因位于6号染色体长臂，编码人类μ阿片受体。μ阿片受体属于G蛋白偶联受体家族，其在物质依赖相关的犒赏通路上发挥重要作用。Bergen等[6]在1997年首次报道了OPRM1基因的rs1799971多态性和酒精依赖的遗传关联，但是并没有发现两者存在显著的关联。此后，该位点受到了广泛的关注，来自不同国家和地区的研究人员不断尝试重复Bergen等[6]的研究，但是并没有获得一致的结论。考虑到单项研究的样本量小，统计学把握度较低，并且人群代表性不佳，本研究将通过Meta分析的方式，对现有研究成果进行数据合并，以期得到更加可靠的结果。

1 资料与方法

1.1纳入与排除标准 纳入标准：关于OPRM1基因rs1799971多态性和酒精依赖的病例-对照研究或队列研究；病例组符合酒精依赖的诊断标准；文献能获得全文，并且提供了基因型频率，从而能够计算P值、比值比(OR)和95%可信区间(95%CI)；纳入文献必须是经过同行评议并且已经在公开刊物上发表的学术论文。排除标准：不能获得全文或数据不完整的研究；会议摘要、综述、述评、病例报道、动物研究及毕业论文。重复发表的文献，纳入最新发表的研究。

1.2检索策略 本研究检索包括PubMed、Web of Science、EMBASE、中国知网和万方数据库。英文数据库的检索：(Polymorphism OR SNP OR Mutant OR Variant) AND (Alcohol Dependence OR Alcohol addiction OR Alcohol use disorder OR Alcohol abuse OR Alcohol misuse OR problem drinking OR harmful drinking OR alcoholics OR alcoholism) AND (Opioid receptor mu 1 OR OPRM1 OR mu opioid receptor 1)。中文数据库检索:(“酒精依赖”或“酒精有害使用”或“酒精使用障碍”)与“OPRM1”。时间为建库到2020年7月10日。由两位作者分别独立完成。

1.3文献筛选和信息提取 按照纳入和排除标准，由两位作者分别独立完成文献的筛选。确定文献符合要求后，提取以下信息：第一作者的姓名、发表年份、国家、种族、参与者性别、诊断标准、研究类型、参与者的基因型频率、以及哈代-温伯格遗传平衡(Hardy-Weinberg equilibrium，HWE)检测结果[7]。在此过程中如果遇到分歧，由两位作者共同商讨解决。

1.4方法学质量评价 使用纽卡斯尔-渥太华量表(Newcastle-Ottawa Scale，NOS)对纳入文献的方法学质量进行评估。NOS由人群选择(4个条目，共4分)、研究对象之间的可比性(1个条目，共2分)和暴露因素(3个条目，共3分)3个方面构成。当纳入文献评分超过5分时，表明其质量良好。此过程由两位作者独立完成，如有分歧，通过商讨解决。

1.5遗传模型的选择 根据《实用循证医学方法学》[8]中关于基因关联研究Meta分析的相关报道，本研究选择常用的5种遗传模型进行分析。假设A是突变等位基因，G是野生等位基因，则等位基因模型为A vs. G、纯合子模型为AA vs. GG、杂合子模型为AG vs. GG、显性模型模型为AA+AG vs. GG，隐性模型为AA vs. AG+GG。

1.6统计学方法 应用RevMan5.3进行Meta分析。各纳入研究结果间的异质性采用χ2检验和I2检验，当各研究间有统计学同质性(P≥0.1或I2≤50%)，采用固定效应模型对各研究进行分析；如各研究间存在统计学异质性(P<0.1或I2>50%)，分析其异质性来源。若无明显临床异质性，可谨慎采用随机效应模型进行分析[9]。采用漏斗图法评估发表偏倚[10]。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1文献检索结果 系统检索获得1 044篇相关文献。通过筛选，最终得到22篇符合要求的文献[6, 11-31]。文献筛选的具体过程见图1。

2.2纳入文献的基本特征 纳入的22篇文献中，包括24项独立研究。其中18项研究[6, 12, 14, 16-19, 21-23, 25-26, 28-31]在高加索人群中开展，其他6项研究[11, 13, 15, 20, 24, 27]在亚洲人群中实施。Bergen等[6]的研究包括3项独立研究。除Rouvinen-Lagerström等[31]的研究为队列研究外，其余研究均为病例-对照研究。4项研究[12, 16, 23, 29]不符合 HWE。诊断标准主要使用DSM-Ⅲ-R、ICD-10和DSM-Ⅳ。 所有研究的NOS评分均>5分，可视为高质量研究。纳入文献的基本特征见表1。

2.3Meta分析和亚组分析结果

2.3.1OPRM1基因rs1799971多态性和酒精依赖的关系 等位基因和隐性模型检测到异质性，采用随机效应模型分析，其余遗传模型采用固定效应模型分析。结果显示rs1799971位点AG-基因型携带者发生酒精依赖的风险较高(P<0.05)，图2。其他遗传模型差异无统计学意义(P>0.05)。见图3～6。

表1 纳入文献的基本特征及质量评价

图2 AG-基因型携带者和GG-基因型携带者的比较 注： AA-基因型携带者的数量(Events)，AA-基因型、AG-基因型和GG-基因型携带者的总数(Total)

图3 A-等位基因携带者和G-等位基因携带者的比较 注： AA-基因型携带者的数量(Events)，AA-基因型、AG-基因型和GG-基因型携带者的总数(Total)

图4 AA-基因型携带者和GG-基因型携带者的比较 注： AA-基因型携带者的数量(Events)，AA-基因型、AG-基因型和GG-基因型携带者的总数(Total)

图5 AA-基因型携带者和AG-基因型携带者与GG-基因型携带者的比较 注： AA-基因型携带者的数量(Events)，AA-基因型、AG-基因型和GG-基因型携带者的总数(Total)

2.3.2亚组分析 亚洲人群等位基因模型和隐性模型检测到明显的异质性，采用随机效应模型分析，其余遗传模型采用固定效应模型分析。结果显示rs1799971位点AG-基因型携带者发生酒精依赖的风险较高(P<0.05)。其他遗传模型未发现统计学相关性，高加索人群五种遗传模型rs1799971多态性和酒精依赖的发生风险无相关性，无论是在男女混合亚组，还是男性亚组，rs1799971多态性和酒精依赖均无相关性。见表2。

表2 Rs1799971多态性和酒精依赖关系的Meta分析结果

2.4敏感性分析及发表偏倚评估 在排除不符合HWE的研究后，剩余研究的OR值和95%CI并没有发生明显改变，说明其对总体的效应值没有影响。因此，在最终的数据合并过程中并未将不符合HWE的研究排除。逐个去除其余单项研究后，总体的效应值方向未发生改变，表明研究结果具有良好的稳定性。漏斗图结果显示各项研究较为均匀地分布在漏斗图的中线两侧，提示不存在显著的发表偏倚。见图7。

图7 纳入研究的漏斗图

3 讨 论

酒精依赖是一种以精神和躯体依赖为特征的慢性精神疾病，其发生受遗传和环境因素的双重调控。大量的基础和临床研究表明遗传因素在酒精依赖的发生过程中占主导作用[5]。OPRM1基因rs1799971多态性被广泛报道和酒精依赖存在相关性。然而，由于遗传背景、研究样本量差异及临床异质性等原因，不同研究得到的结果并不一致。本研究对现有研究结果进行合并分析。合并后的结果显示总人群rs1799971多态性能够增加酒精依赖的发生风险。在实施亚组分析后发现，这种关联只存在于亚洲人群，具体表现为亚洲人群AG-基因型携带者发生酒精依赖的风险较高。造成这种结果的可能原因是这两个群体的遗传背景和生活地域存在差异，从而导致同一位点的突变产生不同的表型效应。由于亚洲人群的研究数量较少，可能存在一定的发表偏倚。本研究使用漏斗图法对发表偏倚进行评估，结果发现漏斗图对称性良好，没有显著的发表偏倚。此外，亚洲人群在等位基因和隐性遗传模型存在一定的异质性，这些异质性可能由亚洲不同种族的遗传背景差异导致。本研究借助敏感性分析来寻找异质性来源，但是并没有发现显著影响异质性的研究。考虑到纳入的亚洲人主要是东亚人群，且研究数量和样本量较少，本研究没有对亚洲人再进行亚组分析。

越来越多的研究表明内源性阿片犒赏通路参与犒赏效应，因此其在物质成瘾中发挥重要作用。酒精依赖的发病过程与阿片受体系统的激活密切有关。酒精能够提高阿片受体对内源性阿片类物质的敏感性并导致阿片受体的激活，产生吗啡样效应，从而为饮酒者带来欣快感。此外，酒精在体内代谢产生的乙醛能够与儿茶酚胺发生反应，生成阿片受体激动剂，进而激活犒赏通路[32]。

Huang等[33]发现，Rs1799971多态性会导致OPRM1基因编码的第40位氨基酸由天冬酰胺变成天冬氨酸，这一改变会引起大脑对阿片类药物的敏感性发生变化，rs1799971多态性会导致OPRM1的mRNA表达水平下降，rs1799971突变能够导致海马神经元细胞μ阿片受体功能的缺失。此外，rs1799971多态性还被报道和可卡因、尼古丁、大麻等成瘾性物质的易感性有关。Matthes等[32]报道了敲除OPRM1基因的小鼠对成瘾药物犒赏效应的敏感性低于野生小鼠。阿片受体拮抗剂已经成功应用于酒精依赖的临床治疗[34]。最新研究表明rs1799971位点突变可能是μ阿片受体纳曲酮治疗物质依赖的作用靶点[35]。Korucuoglu等[36]借助功能核磁共振对17 ～ 21岁的饮酒人员进行研究，发现rs1799971位点AG-基因型携带者在接受酒精刺激后，大脑皮层活动高于其他基因型携带者。Bach等[37]报道了rs1799971位点携带G-等位基因的酒精依赖患者，在接受治疗后复发的风险较高。以上研究均提示rs1799971多态性和酒精依赖之间存在相关性。

本研究也存在一定的局限性：①在部分遗传模型下检测到了显著的异质性。尽管实施了亚组分析，但是异质性并没有得到彻底解决。亚组分析结果显示异质性在高加索人群和男-女混合亚组中较高，提示种族和性别是异质性的重要来源。②纳入的研究对象只包括亚洲人和高加索人，因此目前的研究结果只适用于这两个种族，外部有效性仍有待探究。③纳入的部分研究发表在2010年之前，当时的检测手段相对落后，可能会导致研究结果的偏差。④纳入研究的发表年份跨度较大，不同研究使用的酒精依赖诊断标准并不一致，可能会引起选择偏倚。⑤本研究只对OPRM1基因的rs1799971多态性进行了分析，位点-位点之间的相互作用可能会掩盖或放大单一位点的效应。

综上所述，本研究表明OPRM1基因的rs1799971多态性和亚洲人群的酒精依赖风险存在相关性，AG-基因型携带者发生酒精依赖的风险较高。考虑到本研究存在一定的局限性，需要在更多人群中开展高质量研究来验证本研究的结果。