天水市2020年上半年重大动物疫病免疫抗体抽检分析

王 玙，王建强

(天水市动物疫病预防控制中心，甘肃 天水 741000)

实施动物免疫接种是我国目前控制重大动物疫病最根本、科学和直接有效的措施之一，确保免疫质量成为防控重大动物疫病工作的重中之重,而免疫抗体监测是检验免疫质量直接有效的方法，也是衡量基层动物防疫人员工作效果的主要考核技术指标。为贯彻落实《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》，切实做好2020年天水市动物疫病强制免疫工作，面掌握天水市春季动物防疫工作情况，科学评价天水市重大动物疫病集中免疫工作质量和效果，于2020年5 ～6月，在全市34个自然村和27个畜禽养殖场随机采集猪牛羊鸡血清样品共计425份，进行了口蹄疫、高致病性禽流感、猪瘟、小反刍兽疫4个主要动物疫病的9种免疫抗体检测，以便对免疫抗体合格率不达标或略高于70%的养殖场户查漏补缺及时整改。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 检测试剂 小反刍兽疫病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒(试剂盒厂家：青岛立见诊断技术发展中心，试剂盒批号：020171906)；口蹄疫O型间接血凝抗体检测试剂盒(试剂盒厂家：中国农业科学院兰州兽疫研究所，试剂盒批号：20200428201)；口蹄疫A型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒(试剂盒厂家：中国农业科学院兰州兽疫研究所，试剂盒批号：20200303103-2)；猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒(试剂盒厂家：哈尔滨元亨生物药业有限公司，试剂盒批号：CSFV20161112)；禽流感H5亚型(Re-11)血凝抑制试验抗原(试剂盒厂家：哈尔滨维科生物技术有限公司，试剂盒批号：2019007)；禽流感H7亚型(Re-2)血凝抑制试验抗原(试剂盒厂家：哈尔滨维科生物技术有限公司，试剂盒批号：2019004)。

1.1.2 检测样品 于2020年5月份在全市春季统一集中免疫后3周左右后进行采样，要求每个县(区)随机选取至少4个中小规模养殖场(鸡场、猪场、牛场、羊场各一个，猪存栏量在100～1 000头，牛存栏量在20～200头，羊存栏量在100～1 000只，禽存栏量在1 000～ 10 000羽)和2个自然村进行随机采样，每个养殖场至少采集血清样品10份，每个自然村样品来源不少于3家养殖户，兼顾猪牛羊。全市共在34个自然村和27个规模养殖场采集猪牛羊鸡血清样品425份，其中猪103份、牛105份、羊105份、鸡112份，全部低温条件下送市动物疫病预防控制中心兽医实验室于6月上旬统一做重大病免疫抗体监测。

1.1.3 疫苗种类 猪口蹄疫O型灭活苗(O/Mya98/XJ/2010株+O/GX/09-7株)(疫苗厂家：金宇保灵，疫苗批号：19136023)；口蹄疫O型-A型二价灭活疫苗(OHM/02株+AKT-III株，悬浮培养)(疫苗厂家：中牧股份兰州生物药厂，疫苗批号：1911002)；重组禽流感(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株)(疫苗厂家：乾元浩生物股份有限公司，疫苗批号：2019228)；猪瘟耐热保护剂活疫苗(疫苗厂家：山东绿都生物科技有限公司，疫苗批号：1907033)；小反刍兽疫活疫苗(疫苗厂家：天康生物股份有限公司，疫苗批号：20210326)。

1.2 方法

猪瘟免疫抗体采用ELISA检测方法(GB/T 16551-2008)；牛羊口蹄疫O型免疫抗体采用正向间接血凝试验(GB/T 18935-2003)；猪口蹄疫O型免疫抗体采用正向间接血凝试验和非结构蛋白抗体阻断ELISA(GB/T 18935-2003)；牛羊口蹄疫A型免疫抗体采用液相阻断ELISA检测方法(GB/T 18935-2003)；禽流感H5(Re-11)亚型、H7(Re-2)亚型免疫抗体采用血凝与血凝抑制试验检测方法(GB/T 18936-2003)；羊小反刍兽疫免疫抗体采用阻断ELISA检测方法(GB/T 27982-2011进行)。在所有试验对照均符合试剂盒说明书时，试验结果成立，结果判定参照试剂盒说明书。

2 结果

2.1 全市整体情况

4个主要动物疫病的9种免疫抗体检测结果及数据统计分析显示，猪0型口蹄疫检测103份，平均样本合格率为81.6%；猪瘟检测103份，平均样本合格率为89.3%。牛O型口蹄疫检测105份，平均样本合格率为78.1%；牛A型口蹄疫检测95份，平均样本合格率为63.2%。羊0型口蹄疫检测105份，平均样本合格率为84.8%；羊A型口蹄疫检测105份，平均样本合格率为69.5%；羊小反刍兽疫检测102份，平均样本合格率为95.1%。禽流感H5亚型检测112份平均样本合格率为92.0%；禽流感H7亚型检测112份，禽流感为93.8%。具体见表1。

表1 9种免疫抗体检测全市整体情况 %

2.2 规模场情况

所抽检规模场中，猪0型口蹄疫场合格率为71.43%，平均样本合格率为82.67%；猪瘟场合格率为85.71%，平均样本合格率为96.0%。牛O型口蹄疫场合格率为85.71%，平均样本合格率为83.75%；牛A型口蹄疫场合格率为71.43%，平均样本合格率为62.67%。羊0型口蹄疫场合格率为85.71%，平均样本合格率为86.25%；羊A型口蹄疫场合格率为57.14%，平均样本合格率为73.75%；羊小反刍兽疫场合格率为100.00%，平均样本合格率为98.75%。禽流感H5亚型场合格率为100.00%，平均样本合格率为96.92%；禽流感H7亚型场合格率为100.00%，平均样本合格率为98.46%。具体见表2。

表2 9种免疫抗体检测规模场情况 %

2.3 散养户情况

所抽检散养户中，其中猪型口蹄疫场点合格率为80.00%，平均样本合格率为78.57%；猪瘟场点合格率为100.00%，平均样本合格率为71.43%。牛O型口蹄疫场点合格率为40.00%，平均样本合格率为60.0%；牛A型口蹄疫场点合格率为50.00%，平均样本合格率为65.0%。羊0型口蹄疫场点合格率为80.00%，平均样本合格率为为80.0%；羊A型口蹄疫场点合格率为20.00%，平均样本合格率为56.0%；羊小反刍兽疫场点合格率为80.00%，平均样本合格率为81.82%。禽流感H5亚型场点合格率为71.43%，平均样本合格率为85.11%；禽流感H7亚型场点合格率为57.14%，平均样本合格率为87.23%。具体见表3。

3 结果分析

3.1 不同病种之间免疫抗体水平存在不平衡现象

一是从全市整体来看，各类动物疫病免疫抗体之间的合格率存在较大差异。其中羊小反刍兽疫免疫抗体合格率为95.1%远高于其他病种，高致病性禽流感H5亚型和H7亚型次之，分别为92.0%和93.8%，猪瘟和猪牛羊O型口蹄疫也都在70%以上，体现了良好的免疫效果，能够有效防范此类重大动物疫病的发生。但牛羊A型口蹄疫整体达不到70.0%，针对A型口蹄疫抗体不合格的场户需进行及时补免。具体见图1。

图1 不同病种免疫抗体水平情况比

3.2 采样场点之间免疫抗体水平存在不平衡现象

采样场点之间的区别主要是指规模场和散养户之间的区别。从检测结果来看，无论不同病种之间还是同病种不同亚型之间，规模养殖场的场合格率和平均样本合格率普遍高于散养户，也有个别病种散养户免疫抗体合格率高于养殖场的情况。散养户免疫抗体水平偏低的主要原因是散养畜禽饲养者免疫意识差，其次是农村居住不集中，交通不便，饲养分散范围广，给免疫工作带来很大困难。具体见表4。

表4 9种免疫抗体不同场点情况 %

3.3 同病种不同亚型之间免疫抗体水平存在不平衡现象

同病种不同亚型之间免疫抗体水平差异较大，主要表现在牛羊O型和A型口蹄疫之间。比如牛羊O型免疫抗体合格率分别为78.1%和84.8%，而牛羊A型分别为63.2%和69.5%。主要原因是检测方法和检测结果判断标准不同引起，因为牛羊口蹄疫疫苗是口蹄疫O型-A型二价灭活疫苗，所以存在较低的漏免现象。从检测方法来看，牛羊O型口蹄疫免疫抗体采用了正向间接血凝检测方法，敏感性相对较低，首孔抗体滴度从1∶2开始，结果判断人为主观性偏高，而牛羊A型口蹄疫免疫抗体采用了液相阻断ELISA检测方法，敏感性较高，首孔抗体滴度从1∶16开始，结果判断相对客观。从判断标准来看，牛羊O型口蹄免疫抗体效价以≥1∶32为合格，而牛羊A型口蹄疫免疫抗体效价以≥1∶128为合格，相对O型来说，A型判断标准高于O型2个滴度，这是此次检测O型口蹄疫免疫抗体水平高于A型的主要原因。

4 结论

从监测结果分析，2020年上半年天水市高致病性禽流感、口蹄疫、猪瘟、小反刍兽疫等主要动物疫病防制工作总体取得了良好成绩，除了牛羊A型口蹄疫外，其他各类动物疫病免疫抗体合格率都在70%以上，体现了良好的免疫效果，能够有效防范此类重大动物疫病的发生。而牛羊A型不合格的主要原因是检测方法和检测结果判断标准不同引起，抗体效价尚未达到检测结果判定合格标准的要求。为降低疫情发生风险，针对A型口蹄疫抗体不合格的场户需进行及时补免以确保免疫抗体合格率处于较高水平。