杀虫气雾剂的液相测定方法及对蚊的趋避活性

黄 蕙 杨河川 许杰妤 王 芳 李 婷

(1.成都彩虹电器(集团)股份有限公司，四川成都，610045；2.四川省农药检定所，四川成都，610041)

高效氯氰菊酯为非内吸性但具备触杀和胃毒作用的杀虫剂，通过与害虫钠离子通道相互作用而破坏其神经系统的功能,用于公共卫生和畜牧业中防治多种害虫，如蝇、蟑螂、蚊、蚤、虱、臭虫、动物体外寄生虫如蜱、螨等[1]。右旋反式氯丙炔菊酯外观为浅黄色晶体，熔点90℃，在水中及其他羟基溶剂中溶解度很小，能溶于甲苯、丙酮、环己烷等大多数有机溶剂。对光、热稳定，在中性及微酸性介质中稳定，碱性条件下易分解。主要应用：对苍蝇和蟑螂有很好的击倒和杀死活性[2]。

致倦库蚊(Cuelx pipiens quinquefasciatus)是我国重要的家栖蚊种，作为卫生杀虫剂预防控制的主要靶标生物，是传播疾病的重要传播媒介[3]。致倦库蚊多在夜间出没，除了具有严重的骚扰性以外，还是传播乙型脑炎的“凶手”，对人类的健康造成严重威胁。

拟除虫菊酯类化合物是防治蚊虫的主要有效成分，具有高效低毒、低残留的特点，是目前防治卫生害虫的重要杀虫剂[4-6]。市场上主要常用的昆虫击倒剂为胺菊酯、烯丙菊酯，使用量大、使用时间长，蚊虫易产生抗性。所以使用新型击倒剂能够更有效地杀灭害虫。另外，右旋反式氯丙炔菊酯对蚊、蝇的致死活性较差，故应与其他致死剂复配使用为宜。根据右旋反式氯丙炔菊酯的卓越击倒活性、高效氯氰菊酯的触杀和胃毒作用特点，将两种拟除虫菊酯混配在一起作用机制互补，本文即是对采用拟除虫菊酯化合物为有效成分的气雾剂进行液相色谱检测，建立检测方法进行分离和定量分析，并进一步通过生物测试研究具体有效驱蚊活性配比。

1 材料与方法

1.1 供试昆虫

致倦库蚊(Cuelx pipiens quinquefasciatus)，引种于四川省疾病预防控制中心，羽化后第3—5天未吸血雌成虫。进行试验温度(26±1)℃，相对湿度65%±10%，保持室内空气流通。

1.2 供试样品及仪器

供试样品：杀虫气雾剂样品由我公司配制；正己烷(色谱级)和乙酸乙酯(分析纯)均为成都市科隆化学品有限公司；高效氯氰菊酯标准品(已知质量分数≥98%)为江苏扬农化工股份有限公司；右旋反式氯丙炔菊酯标准品(已知质量分数≥98%)为江苏扬农化工股份有限公司。

仪器：Waters 2695-2996液相色谱仪(带VWD检测器，沃特世)；色谱柱(50mm×4.6mm×5μm，Aglient Si不锈钢色谱柱，安捷伦)；微量注射器(10ul，安捷伦)。

1.3 实验方法

1.3.1高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯液相色谱分析

准确称取0.05g高效氯氰菊酯标准品(精确至0.0002g)和0.03g右旋反式氯丙炔菊酯标准品(精确至0.0002g)于25mL容量瓶中，用正己烷定容，摇匀；准确移取5.0mL于25mL容量瓶中，用正己烷定容，摇匀备用。取一罐气雾剂样品，将其置于约-15℃低温箱中放置4h取出，在罐的顶部开一个直径约0.2mm的小孔，在46℃水浴中放置1h，让抛射剂缓慢挥发掉，再将孔扩大，倒出料液。准确称取气雾料液5g(精确至0.0002g)于25mL容量瓶中，用正己烷定容，摇匀待分析。色谱条件：柱温(30±2)℃；流动相：正己烷+乙酸乙酯=98+2(v/v)；流速：1.5ml/min；检测波长：230nm；进样量：10ul。公式计算：产品中高效氯氰菊酯或右旋反式氯丙炔菊酯质量分数(%)=(样品峰面积×标准溶液中标准品的质量×标准品纯度质量分数×放完推进剂后药液质量)/(标准品峰面积×称取气雾剂样品的质量×(一整罐气雾剂样品质量-倒出料液后空罐质量)×5稀释因子)。

1.3.2高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯杀虫气雾剂对蚊的趋避活性

按照GB/T 13917-2009相关规定进行试验。

(1)室内药效：采用拉板无色透明有机玻璃圆筒装置，将致倦库蚊30只通过放虫孔分别释放于带拉板封盖的圆筒内。待试虫回复正常活动后将待测气雾剂筒放至水平状，喷嘴垂直向下，通过喷药孔喷施药剂(1.0±0.1)g，喷雾后立即用胶塞将喷药孔塞住。于1min后将拉板抽掉，立即计时，每隔一定时间记录被击倒的试虫数。20min后将全部供试昆虫转移至清洁的养虫笼中进行标准饲养，24h检查记录试虫死亡数。

(2)模拟现场：在模拟现场距离地面1.5m、两相邻墙壁0.5m，垂直相交的4个点及中央共计挂挂笼5个，每个笼内释放试虫20只。待试虫恢复正常活动后，试验人员穿戴好防护服装，站于模拟现场的中央，手持气雾剂罐，按0.3g/m3剂量，喷嘴向上45度进行喷雾，喷雾时应转身360度。施药完毕，试验人员立即离开现场，关闭门窗并计时。1h将被击倒的试虫收集至清洁养虫笼中，用5%糖水棉球喂养。未被击倒的试虫不收回，计入24h活虫数，24h检查死试虫数。

2 结果与讨论

2.1 高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯气雾剂正相液相色谱法的可靠性验证

2.1.1 分析方法的线性相关性

分别配制5个不同质量浓度的高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯标准溶液，按上述操作条件分别测定，以质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制工作曲线。结果表明样品峰面积与浓度呈现良好的线性关系。高效氯氰菊酯线性方程：y=6E+06x+17121,R2=0.998；右旋反式氯丙炔菊酯线性方程：y=3E+06x-78927,R2=0.997。

2.1.2 分析方法的精密度试验和准确度

高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯的测定采用正相液相色谱法。随机取一个样品，对高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯平行测定。本方法对高效氯氰菊酯平行测定的标准偏差为0.003899，变异系数为3.48%；对右旋反式氯丙炔菊酯的平行测定的标准偏差为0.001967，变异系数为3.66%，精密度较好。取经分析已知高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯准确含量的样品，分别加入已知含量高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯，分别测定高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯的回收率。高效氯氰菊酯的添加回收率在99.13%—100.65%之间，平均回收率99.96%，RSD为0.68%；右旋反式氯丙炔菊酯的添加回收率在99.32%—100.55%之间，平均回收率99.8%，RSD为0.55%。

2.2 5个配比高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯杀虫气雾剂对蚊的趋避活性

5个浓度高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯杀虫气雾剂对蚊的室内和模拟现场药效如表1。根据试验结果，按照GB/T 13917.2-2009、GB/T13917.10-2009规定的方法及评价标准进行了评价，配方①杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效不合格、模拟现场为B级产品；配方②杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效及模拟现场均为B级产品；配方③杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效及模拟现场均为B级产品；配方④杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效及模拟现场均为A级产品；配方⑤杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效为A级产品、模拟现场为B级产品。0.10%高效氯氰菊酯·0.05%右旋反式氯丙炔菊酯杀虫气雾剂对致倦库蚊的室内药效和模拟现场试验最佳。

表1 5个不同配比杀虫气雾剂对致倦库蚊药效试验结果

3 讨论与结论

本试验首先建立了液相色谱法检测杀虫气雾剂产品中有效成分高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯的分析方法，该分析方法准确可靠，可应用于生产质量控制。另外，按照GB/T 13917.2-2009、GB/T13917.10-2009规定的方法及评价标准进行了评价，配方①杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效不合格、模拟现场为B级产品；配方②杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效及模拟现场均为B级产品；配方③杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效及模拟现场均为B级产品；配方④杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效及模拟现场均为A级产品；配方⑤杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效为A级产品、模拟现场为B级产品。根据以上实验结果，筛选确定了用于趋避致倦库蚊杀虫气雾剂的最佳配比为高效氯氰菊酯：右旋反式氯丙炔菊酯为0.10%：0.05%，该配比的杀虫气雾剂对致倦库蚊室内药效及模拟现场均为A级产品。本文研究的内容基本确立了高效氯氰菊酯及右旋反式氯丙炔菊酯经复配后能对致倦库蚊起到良好的驱避效果，并且能对其质量进行有效把控，可以进一步完善产品，投放市场。