大黄素对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用及对MAPK通路的影响

新乡医学院第三附属医院 河南，新乡 450003

急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是临床上病情凶险、并发症多、病死率高的急腹症，临床表现为腹痛、呕吐、发热以及淀粉酶和脂肪酶升高，约有20%的患者由于病情较重而发展为重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）[1]。SAP可导致胰腺及其周围组织坏死，这种坏死和炎症反应可能涉及到远端器官，导致多器官衰竭[2]。急性肺损伤是SAP患者死亡的重要原因，可进一步发展为急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS），而ARDS是SAP最严重的肺部并发症[3]。有研究显示，丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK） 信号通路参与多种原因诱导的肺损伤，抑制MAPK信号通路的活化则可缓解肺组织病理性损伤，抑制炎症反应，减少细胞凋亡[4-5]。大黄是我国传统中药材，具有清热泻火、凉血解毒、利湿退黄的作用，与其他药物配伍可用于治疗Ap、急性胆囊炎、急性肠梗阻等急腹症[6-7]。大黄素（Emodin）是大黄的主要有效成分，研究证明大黄素可显著减轻AP模型大鼠胰腺组织损伤，降低血清淀粉酶和脂肪酶的水平，是治疗SAP的有效天然产物[8]，但目前大黄素在SAP合并肺损伤中的作用研究较少，其机制尚不清楚。本研究通过建立SAP肺损伤大鼠模型，以MAPK信号通路为切入点，观察大黄素对SAP大鼠肺损伤的影响并初步探究其机制，为AP及其并发症的药物治疗提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 实验动物 无特定病原体（specific pathogen free，SPF）级SD大鼠80只，雌雄各半，6周龄，体质量180～220g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司[实验动物生产许可证号码：SCXK（京）2017-0011]，饲养于河南省实验动物中心实验室独立动物房[实验动物使用许可证号码：SYXK（豫）2016-0002]。饲养条件：室温（22±2）℃，湿度（50±10）%，每天定时换气，保持12h:12h光暗照明，食水不限。研究方案获本院伦理委员会批准。

1.2 药品与试剂 大黄素购于上海一基实业有限公司（纯度＞98%，批号：518-82-1）；牛黄胆酸钠、苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色试剂盒、中性树胶、羧甲基纤维素钠（carboxymethylcellulose sodium，CMC-Na）均购于北京索莱宝科技有限公司（批号：T8510、G1121、G8590、IS9000）；脂肪酶、淀粉酶、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）酶联免疫吸附检测（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒均购于武汉伊莱瑞特生物科技有限公司（批号：EEL-M2448c、E-EL-R2545c、E-EL-R2856c、E-ELR0015c）；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）检测试剂盒均购于南京建成生物工程研究所有限公司（批号：A001-3-2、A003-1-2）；B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein gene，Bax）、磷酸化p38丝裂酶原激活蛋白激酶 （phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase，p-p38 MAPK）、磷酸化细胞外信号调节激酶（phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2，p-ERK1/2）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（phosphorylated c-Jun N-terminal kinase，p-JNK） 兔源单克隆抗体均购于美国CST公司 （批号：3498、5023、4511、4370、4668）；羊抗兔二抗购于达文生物有限公司（批号：DW-GAR007）；RevertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit购于美国Thermo Scientific公司 （批号：K1622）；蛋白定量试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司（批号：AR0146）。

1.3 仪器 GEM Premier 3000血气分析仪购于Instrumentation Laboratory Company公司；DW-86L626超低温冰箱为海尔集团产品；IX53显微镜购于日本奥林巴斯公司；G:BOX多功能凝胶成像系统购于Syngene公司；Multiskan MK3酶标仪购于Thermo Fisher Scientific公司；TGL16MB高速冷冻离心机为长沙湘智离心机仪器有限公司产品。

1.4 方法

1.4.1 分组与造模 将80只SD大鼠随机分为对照组、模型组、大黄素高剂量组和大黄素低剂量组，每组20只。除对照组外，其余组大鼠均使用牛磺脱氧胆酸钠建立SAP大鼠模型[9]。造模方法：大鼠提前12h禁食，腹腔注射10%水合氯醛麻醉，麻醉剂量为0.3mL·100g-1，仰卧位固定，腹部备皮、消毒，沿腹中线打开腹腔，暴露胰腺，找到十二指肠乳头，在十二指肠乳头旁用26G留置针穿破肠壁，进入胰管，微血管钳夹闭肝门处胰管，以0.1mL·min-1的速度泵入3.5%牛磺脱氧胆酸钠，剂量为0.1mL·100g-1，2min后取下微血管钳。观察大鼠胰腺组织变化，如胰腺出现充血、水肿、点状出血、皂化斑和坏死等现象则说明造模成功，随后将胰腺复位，缝合腹部。对照组大鼠仅开腹，适当翻动胰腺后关腹。模型组、大黄素高、低剂量组均造模成功，造模完成后无大鼠死亡。

1.4.2 给药方法 于造模完成大鼠苏醒后的1h及6h给药。根据预实验结果，大黄素高、低剂量组大鼠分别以60mg·kg-1、30mg·kg-1大黄素（临用前用0.5% CMC-Na混合均匀）灌胃，给药体积为1mL·100g-1，对照组和模型组大鼠灌服等量0.5% CMC-Na。

1.4.3 血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量检测 造模12h后大鼠腹主动脉穿刺取血，4℃静置2h，3 000r·min-1离心10min，离心半径为12.5cm，分离血清检测大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6的含量，操作按照试剂盒说明进行。

1.4.4 氧分压（partial pressure of oxygen，PaO2）、二氧化碳分压（partial pressure of carbon dioxide，Pa-CO2）、氧合指数（oxygenation index，OI）、肺组织湿干重比（wet-to-dry weight ratio，W/D）检测 大鼠腹主动脉取血3mL，采用血气分析仪检测PaO2、PaCO2，并计算OI。OI=PaO2/FiO2，FiO2即吸氧浓度，未吸氧情况下FiO2值为空气中氧浓度0.21。随后分离各组大鼠右上肺叶用于W/D检测，其余肺叶一部分以4%多聚甲醛固定用于HE染色，另一部分-80℃冻存用于ELISA、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）和Western blot。以吸水纸擦干肺组织表面水分后称重，记录为湿重（wet weight，W），随后将肺组织放入80℃恒温干燥箱中烘干，24h后称重，记录为干重（dry weight，D），并计算W/D。

1.4.5 HE染色观察肺组织病理变化 取各组大鼠肺组织，以4%多聚甲醛固定48h，蒸馏水洗涤，梯度乙醇脱水，制作组织蜡块，冰上预冷4μm切片，二甲苯脱蜡30min，梯度乙醇复水，使用苏木精和伊红染液分别染细胞核和细胞质，脱水、透明后中性树胶封片，镜下观察各组大鼠肺组织病理变化。

1.4.6 肺组织SOD活力、MDA含量检测 取适量大鼠肺组织，加入预冷的磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffer saline，PBS），冰上研磨匀浆，10 000r·min-1离心10min后取上清液，离心半径为12.5cm，EP管分装，-80℃保存。按照试剂盒说明书步骤测定肺组织SOD活力和MDA含量。

1.4.7 RT-qPCR检测肺组织Bcl-2、Bax mRNA表达 称取0.1g大鼠肺组织，冰上研磨，加1mL Trizol裂解液提取组织总RNA，使用RevertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit逆转录试剂盒合成cDNA，作为荧光定量模版。引物由日本Takara公司设计合成，所有样品均以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）为内参。反应体系：dNTPs 0.5μL，5×Buffer5μL，Taq酶0.3μL，MgCl21.5μL，cDNA模板2μL，上下游引物分别为1μL，加去离子水至总体积25μL。反应条件：95℃预变性5min，95℃变性30s，62℃退火30s，72℃延伸30s，重复40个循环，最后72℃延伸10min，4℃ 5min终止反应。反应完成后，从PCR仪导出并确认各基因扩增曲线和熔解曲线。实验重复3次，采用2-△△CT的方法计算目的基因mRNA相对表达水平。引物序列见表1。

表1 引物序列Tab.1 Primer sequences

1.4.8 Western blot检测肺组织Bcl-2、Bax、p-p38 MAPK、p-ERK1/2、p-JNK蛋白表达 称取0.1g大鼠肺组织，研磨后离心取沉淀，加入裂解液提取肺组织蛋白，二喹啉甲酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度，配置15%的分离胶和5%的浓缩胶进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis，SDS-PAGE），上样后80V电泳2h，60V转膜2h，5%脱脂奶粉封闭2h，随后将膜放入10mL Bcl-2、Bax、p38 MAPK、p-p38 MAPK、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK兔源一抗稀释液中，稀释比例均为1:1 000，4℃孵 育12h。次日以Tris-Tween缓冲盐溶液（Tris buffered saline tween，TBST）洗涤3次，每次10min，然后加入羊抗兔二抗（稀释比例1:2 000）中，37℃孵育2h，TBST清洗3次后滴加电化学发光液，反应1min后置于凝胶成像系统显影。以GAPDH为内参蛋白，采用Image J软件分析各条带灰度值，计算蛋白的相对表达量，蛋白相对表达量=目的蛋白灰度值/内参蛋白灰度值。

1.5 统计学分析 采用SPSS 25.0统计软件进行统计学分析，实验重复3次，计量资料以±s表示，多样本比较采用单因素方差分析，两样本比较采用SNK-q检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量比较 各组间总体比较，血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量差异均有统计学意义（P＜0.01）。进一步比较显示，与对照组比较，模型组、大黄素高、低剂量组大鼠血清中脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组比较，大黄素高、低剂量组脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量均降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与大黄素高剂量组比较，大黄素低剂量组脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 各组大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量比较（±s，n=3）Tab.2 Comparison of serum lipase，amylase，TNF-α，IL-6 content in each group（±s，n=3）

表2 各组大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量比较（±s，n=3）Tab.2 Comparison of serum lipase，amylase，TNF-α，IL-6 content in each group（±s，n=3）

注：与对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，#P＜0.05；与大黄素高剂量组比较，△P＜0.05Note:Compared with control group，*P＜0.05;compared with model group，#P＜0.05;compared withe modin high-dose group，△P＜0.05

组别 脂肪酶（U·mL-1） 淀粉酶（U·mL-1） TNF-α（ng·L-1） IL-6（ng·L-1）对照组 29.41±4.26 105.52±8.67 30.95±4.68 49.84±4.87模型组 278.36±11.41* 588.97±15.26* 85.65±8.65* 120.36±10.62*大黄素高剂量组 65.11±7.69*# 184.26±13.52*# 55.48±6.36*# 76.95±7.21*#大黄素低剂量组 103.67±9.54*#△ 257.89±14.66*#△ 64.73±5.88*#△ 85.44±8.97*#△F值 72.61 58.42 92.91 86.94 P 值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.2 各组大鼠肺组织W/D及PaO2、PaCO2、OI比较 各组间总体比较，W/D、PaO2、PaCO2、OI差异均有统计学意义（P＜0.01）。进一步比较显示，与对照组比较，模型组、大黄素高、低剂量组W/D和PaCO2显著升高，PaO2和OI显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组比较，大黄素高、低剂量组W/D和PaCO2均降低，PaO2和OI均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与大黄素高剂量组比较，大黄素低剂量组W/D和PaCO2升高，PaO2和OI降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 各组大鼠肺组织W/D及PaO2、PaCO2、OI比较（±s，n=20）Tab.3 Comparison of W/D，PaO2，PaCO2，OI of lung tissues in each group（±s，n=20）

表3 各组大鼠肺组织W/D及PaO2、PaCO2、OI比较（±s，n=20）Tab.3 Comparison of W/D，PaO2，PaCO2，OI of lung tissues in each group（±s，n=20）

注：1mmHg=0.133kPa。与对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，#P＜0.05；与大黄素高剂量组比较，△P＜0.05Note:1mmHg=0.133kPa.Compared with control group，*P＜0.05;compared with model group，#P＜0.05;compared with emodin high-dose group，△P＜0.05

组别 W/D PaO2（mmHg） PaCO2（mmHg） OI对照组 4.12±0.44 92.26±7.11 35.28±2.88 439.33±16.51模型组 6.23±0.38* 52.95±3.65* 60.84±4.95* 252.14±10.36*大黄素高剂量组 4.86±0.39*# 85.62±5.84*# 40.88±2.54*# 407.71±9.17*#大黄素低剂量组 5.26±0.25*#△ 70.48±4.17*#△ 51.61±3.77*#△ 335.62±10.65*#△F值 13.41 24.44 16.95 28.94 P 值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.3 各组大鼠肺组织病理学变化比较 HE染色结果显示，对照组大鼠肺组织结构正常，肺泡完好，无增厚和炎症细胞浸润；与对照组比较，模型组大鼠肺泡壁明显增厚，肺间质充血、水肿，并有大量炎症细胞浸润；与模型组比较，大黄素高、低剂量组大鼠肺组织肺损伤改善，肺泡壁增厚和肺组织充血现象减轻，炎症细胞浸润减少。见图1。

图1 各组大鼠肺组织病理变化（HE染色，200×）Fig.1 Pathological changes of lung tissues in each group （HE staining，200×）

2.4 各组大鼠肺组织SOD活力、MDA含量比较 各组间总体比较，大鼠肺组织SOD活力、MDA含量差异均有统计学意义（P＜0.01）。进一步比较显示，与对照组比较，模型组、大黄素高、低剂量组大鼠肺组织SOD活力降低，MDA含量升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组比较，大黄素高、低剂量组SOD活力升高，MDA含量降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与大黄素高剂量组比较，大黄素低剂量组SOD活力降低，MDA含量升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 各组大鼠肺组织SOD活力、MDA含量比较（±s，n=3）Tab.4 Comparison of SOD activity and MDA content in lung tissues in each group（±s，n=3）

表4 各组大鼠肺组织SOD活力、MDA含量比较（±s，n=3）Tab.4 Comparison of SOD activity and MDA content in lung tissues in each group（±s，n=3）

注：与对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，#P＜0.05；与大黄素高剂量组比较，△P＜0.05Note:Compared with control group，*P＜0.05;compared with model group，#P＜0.05;compared with emodin high-dose group，△P＜0.05

组别 SOD（U·mg-1） MDA（μmol·g-1）对照组 36.28±4.27 132.95±13.24模型组 20.22±3.44* 201.28±15.38*大黄素高剂量组 29.96±3.79*# 152.69±14.87*#大黄素低剂量组 25.80±2.81*#△ 180.67±15.65*#△F值 55.39 82.64 P 值 ＜0.01 ＜0.01

2.5 各组大鼠肺组织Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达水平比较 各组间总体比较，肺组织Bcl-2、Bax mRNA和蛋白表达水平差异均有统计学意义（P＜0.01）。进一步比较显示，与对照组比较，模型组、大黄素高、低剂量组大鼠肺组织Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平均降低，Bax mRNA和蛋白表达水平均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组比较，大黄素高、低剂量组Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平升高，Bax mRNA和蛋白表达水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与大黄素高剂量组比较，大黄素低剂量组Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低，Bax mRNA和蛋白表达水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表5、图2。

表5 各组大鼠肺组织Bcl-2、Bax mRNA表达水平比较（±s，n=3）Tab.5 Comparison of Bcl-2 and Bax mRNA expression levels in lung tissues in each group （±s，n=3）

表5 各组大鼠肺组织Bcl-2、Bax mRNA表达水平比较（±s，n=3）Tab.5 Comparison of Bcl-2 and Bax mRNA expression levels in lung tissues in each group （±s，n=3）

注：与对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，#P＜0.05；与大黄素高剂量组比较，△P＜0.05Note:Compared with control group，*P＜0.05;compared with model group，#P＜0.05;compared with emodin high-dose group，△P＜0.05

组别 Bcl-2 mRNA Bax mRNA对照组 1.12±0.09 0.35±0.02模型组 0.26±0.02* 1.06±0.08*大黄素高剂量组 0.63±0.05*# 0.52±0.06*#大黄素低剂量组 0.44±0.03*#△ 0.81±0.07*#△F值 15.36 21.84 P 值 ＜0.01 ＜0.01

图2 各组大鼠肺组织Bcl-2、Bax蛋白表达水平比较Fig.2 Comparison of Bcl-2 and Bax protein expression levels in lung tissues in each group

2.6 各组大鼠肺组织p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平比较 各组间总体比较，肺组织蛋白pp38MAPK/p38MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK比值差异有统计学意义（P＜0.01）。进一步比较显示，与对照组比较，模型组、大黄素高、低剂量组大鼠肺组织蛋白p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK比值升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）；与模型组比较，大黄素高、低剂量组p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK比值降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）；与大黄素高剂量组比较，大黄素低剂量组p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK比值升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见图3。

图3 各组大鼠肺组织p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平比较Fig.3 Comparison of p38 MAPK，ERK1/2 and JNK protein phosphorylation levels in lung tissues in each group

3 讨论

AP是多种诱因导致胰酶在胰腺腺泡内激活所致的胰腺及全身炎症反应，临床表现为突发左上腹剧痛、恶心呕吐、尿和血清淀粉酶增高，其发病率逐年升高，部分患者病情较重，可发展为SAP，病死率可达15%[10]。SAP病情凶险，变化较快，引发的炎症级联反应可波及多个组织器官，其中肺脏是SAP发病过程中最易受到影响的重要脏器，SAP合并肺损伤是SAP患者死亡的主要原因[11]。研究表明，MAPK是典型的促炎信号通路，与机体的炎症反应和氧化应激损伤密切相关[12]。Wan等[13]研究证明，抑制MAPK信号通路可减轻胰腺组织损伤，改善肠道菌群失调，抑制炎症因子释放。大黄素是中药大黄的主要有效成分，研究显示大黄素治疗炎性疾病具有很好的效果，可降低AP大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β的水平，增强腹膜巨噬细胞的吞噬作用，减轻胰腺损害[14]。尽管已知大黄素对AP具有治疗作用，但其对SAP合并肺损伤是否具有改善作用尚不清楚，因此本研究建立了SAP大鼠肺损伤模型，以MAPK信号通路为切入点，研究大黄素对SAP大鼠肺损伤的影响及其作用机制。

肺组织是SAP发病过程中最易受累的器官，SAP患者肺损伤主要表现为PaO2和PaO2/FiO2降低，血清脂肪酶、淀粉酶和炎症因子TNF-α、IL-6等含量升高，肺组织结构模糊，并伴有水肿和炎症浸润等现象[15-16]。本研究结果显示，与模型组比较，大黄素可显著降低大鼠肺组织W/D和PaCO2，升高PaO2和OI，作用呈剂量依赖性。HE染色显示，模型组大鼠肺泡壁明显增厚，肺间质充血、水肿，并有大量炎症细胞浸润，大黄素可显著改善大鼠肺组织肺损伤，减轻肺泡壁增厚和肺组织充血现象，减少炎症细胞浸润。ELISA结果显示，模型组血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量均高于对照组，而大黄素可显著降低血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量，其中大黄素低剂量组作用弱于高剂量组，差异有统计学意义。

氧化应激是肺损伤的基本病理过程，伴随大量的炎症因子释放和活性氧产生[17]。Tian等[18]研究显示，大黄素对博来霉素诱导的大鼠肺损伤具有保护作用，能够增加SOD活力，降低MDA含量，抵抗氧化应激。与上述研究结果一致，本研究也发现大黄素可提高SAP大鼠肺组织SOD活力，减少MDA含量，表明大黄素可显著抑制氧化应激反应，对SAP大鼠肺损伤具有保护作用。

Takeyama[19]认为，细胞凋亡在SAP相关发病和死亡中起重要作用，控制细胞凋亡可能是改善SAP临床疗效的有效策略。本研究发现大黄素可显著提高大鼠肺组织Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平，降低Bax mRNA和蛋白表达水平，其中大黄素低剂量组作用弱于高剂量组，表明大黄素可调控并显著减轻SAP导致的肺组织细胞凋亡，而且作用呈现剂量依赖性。

目前，虽然SAP合并肺损伤的发病机制尚未完全阐明，但已有多项研究证明，MAPK信号通路在各种原因导致的肺损伤中发挥重要调控作用[20-21]。唐兴娟等[22]研究显示，丙泊酚通过抑制MAPK/ERK信号通路对SAP大鼠模型肺损伤具有保护作用，并能够降低炎症因子水平，减轻大鼠肺组织病变。本研究结果显示，与对照组比较，模型组肺组织p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平增加，而大黄素可显著降低p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平，其中大黄素低剂量组作用弱于高剂量组，表明大黄素可能通过抑制MAPK信号通路关键蛋白的活化而起到对SAP大鼠肺损伤的保护作用，而且作用呈现剂量依赖性。

综上所述，大黄素对SAP大鼠肺损伤具有保护作用，能够改善大鼠肺组织病理变化，抑制炎症反应和氧化应激损伤，其作用机制与抑制MAPK信号通路的活化有关。然而，抑制MAPK信号通路仅是大黄素发挥保护作用的机制之一，后续仍需大量的体内和体外实验对其作用机制加以深入探讨。