长链非编码RNA AGAP2-AS1在胶质瘤增殖过程中作用机制的研究

曹艳菲 陈刚 周晓娜 寇筱囡 贾凌筱 张丽娜

作者单位：1 大庆油田总医院检验科，黑龙江 大庆 163000；2 神经外科

胶质瘤在临床多见，其相关研究众多，涉及面较广。长链非编码RNA在肿瘤患者中的研究不断增多的同时，其相关方面在胶质瘤中的表达研究仍相对匮乏。关于长链非编码RNA AGAP2-AS1对ERK/MAPK信号通路的影响研究可见[1]，但是其通过影响ERK/MAPK信号通路来达到促进胶质瘤增殖的研究有待深入探究[2]，其对于胶质瘤细胞的克隆形成能力的针对性研究意义较高。因此本研究就长链非编码RNA AGAP2-AS1在胶质瘤增殖过程中的作用机制进行细致探究，现报道如下。

逆变器转化效率通常会受以下两种因素影响：①把直流电流快速转换成交流正弦波，在一定程度上会给功率半导体整体发热产生很大损失。②逆变器MPPT中的控制算法会严重影响整个转换效率[3]。光伏电池阵列中的输出电流与电压会随日照的温度变化发生巨大变化，且随用电设备负载率的变化发生较大波动。逆变器的MPPT算法在一定程度上可以对电流与电压进行有效控制，使光伏系统能够快速达到最大输出功率，并且能够在短时间内跟踪到最大电力点，转化效率也将得到进一步提高。当负载率在63%左右时，在此条件下的逆变器电气效转换效率呈现的是一种最高状态。

1 资料与方法

1.1 一般资料

（1）选取2018年12月—2019年11月期间的30例脑胶质瘤患者标本为观察组，同时期的30例脑外伤患者标本为对照组。对照组中包括男性20例，女性10例，年龄为20～63岁，平均年龄（38.7±7.0）岁。观察组中包括男性19例，女性11例，年龄为21～62岁，平均年龄（38.9±7.1）岁；分级：Ⅰ～Ⅱ级者15例，Ⅲ～Ⅳ级者15例。两组的年龄与性别比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）中科院细胞库人神经胶质瘤细胞U87及人神经胶质细胞瘤细胞U251细胞。

1.2 方法

将两组的组织标本采用实时定量PCR法进行组织AGAP2-AS1表达的检测，严格按照相关标准操作，同时采用免疫组化法检测组织Ras及ERK1/2蛋白表达情况，根据阳性细胞数及着色强度计分，最终分值0～5分，0～1分为-，2～3分为+，4分为++，5分为+++；将U87及U251细胞进行转染，按照转染试剂说明书进行转染混合液的配置，以完全培养基进行培养，转染后进行siRNA AGAP2-AS1相对表达量的检测；于转染完成后48 h采用克隆形成实验克隆形成能力的检测，以5×103个细胞于培养皿中进行培养，至肉眼可见克隆集落，固定染色，进行克隆形成能力的检测。然后比较两组的组织RNA AGAP2-AS1 mRNA表达量、Ras及ERK1/2蛋白表达情况，并比较观察组中不同分级胶质瘤的RNA AGAP2-AS1 mRNA表达量、Ras及ERK1/2蛋白表达情况，比较转染siRNA AGAP2-AS1与siRNA-NC的U87及U251细胞克隆数。

1.3 统计学分析

采用软件SPSS 23.0进行统计学处理，计量资料表示为（±s），进行t检验，计数资料表示为（n，%），进行χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组的组织AGAP2-AS1 mRNA表达量、Ras及ERK1/2蛋白表达情况比较

观察组的AGAP2-AS1 mRNA表达量为（0.013±0.002），对照组为（0.005±0.001），观察组显著高于对照组，差异有统计学意义（t=19.595，P=0.000）；观察组的Ras及ERK1/2蛋白表达显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 不同分级胶质瘤的AGAP2-AS1 mRNA表达量、Ras及ERK1/2蛋白表达情况

经实时定量PCR法检测显示，转染siRNA AGAP2-AS1的U87及U251 AGAP2-AS1表达量下调80%；转染siRNA AGAP2-AS1的U87及U251细胞克隆数显著低于siRNA-NC，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

一直以来，无论是市场营销学理论界还是教科书，都把市场营销分为传统和现代两大观念，作为市场营销学的经典理论被广泛应用。

表2 不同分级胶质瘤的AGAP2-AS1 mRNA表达量、Ras及ERK1/2蛋白表达情况比较 [例（%）]

表3 转染siRNA AGAP2-AS1与siRNA-NC的U87及U251细胞克隆数比较

2.3 转染siRNA AGAP2-AS1与siRNA-NC的U87及U251细胞克隆数比较

Ⅲ～Ⅳ级者的AGAP2-AS1 mRNA表达量为（0.019±0.003），Ⅰ～Ⅱ级为（0.008±0.002），Ⅲ～Ⅳ级显著高于Ⅰ～Ⅱ级，差异有统计学意义（t=11.858，P=0.000）；Ⅲ～Ⅳ级者的Ras及ERK1/2蛋白表达显著高于Ⅰ～Ⅱ级者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

电力系统的静态电压稳定裕度是指在临界状态下系统有功功率与正常状态下系统有功功率的差值，用于衡量系统电压稳定性。当系统静态电压稳定裕度越大，表示系统具有越强的承载极限负荷的能力。这里采用的配电网静态电压稳定指标为

3 讨论

胶质瘤在临床并不少见，而关于本病发生发展的研究是热点。近年来关于长链非编码RNA在各类种类中的作用机制研究不断增多[3-5]，各类长链非编码RNA在胶质瘤中的表达变化研究虽可见，但是长链非编码RNA AGAP2-AS1在胶质瘤增殖过程中的作用机制研究极为不足。Ras及ERK1/2蛋白作为ERK/MAPK信号通路的关键性蛋白指标，其在依赖蛋白的肿瘤细胞增殖及血管生成方面具有影响作用，其中ERK1/2被磷酸化为p- ERK1/2后可进入胞核，并可启动细胞增殖相关的基因，因此对其表达的变化研究有助于了解胶质瘤增殖相关方面的变化[6]。另外，siRNA AGAP2-AS1的U87及U251细胞克隆数也有助于了解胶质瘤的增殖情况[7]，对其检测价值较高。

本研究就长链非编码RNA AGAP2-AS1在胶质瘤增殖过程中的作用机制进行探究，结果显示，胶质瘤患者的RNA AGAP2-AS1 mRNA表达量、Ras及ERK1/2蛋白表达显著升高，分级较高的胶质瘤患者的RNA AGAP2-AS1 mRNA表达量、Ras及ERK1/2蛋白表达高于分级较高者，同时转染siRNA AGAP2-AS1的U87及U251细胞克隆数显著低于siRNA-NC，因此认为长链非编码RNA AGAP2-AS1在胶质瘤增殖过程中的作用突出，Ras及ERK1/2蛋白作为胶质瘤发生发展的重要蛋白，RNA AGAP2-AS1可能通过调控了Ras及ERK1/2蛋白的表达情况来影响细胞的增殖情况[8-12]。综上所述，笔者认为长链非编码RNA AGAP2-AS1可通过调控ERK/MAPK信号通路影响胶质瘤的增殖，下调AGAP2-AS1可显著影响胶质瘤细胞的克隆形成能力。