李红 郭华伟 肖强 殷坤山 唐美君
关键词茶尺蠖;产卵条;制作;灰茶尺蠖
在昆虫大量饲养过程中,取卵是一项重要的技术环节。根据昆虫的习性,用简便的方法获得大量的卵是昆虫大量饲养能否成功的关键。产卵条制作就是一项实现昆虫大量饲养的关键技术。产卵条的制作虽然简单,但意义重大,在整个饲养过程中起着十分重要的作用。
茶尺蠖Ectropis obliqua Prout和灰茶尺蠖E.grisescens Warren是茶园发生最普遍的害虫,是研究者最主要的研究对象。在各项研究过程中均需进行茶尺蠖或灰茶尺蠖的大量饲养。用产卵纸条供其产卵不但取卵方便,而且还便于卵的冷藏存放,在茶尺蠖病毒生产过程中也十分有用。
过去鳞翅目昆虫饲养常用瓦楞纸供其产卵,但茶尺蠖在瓦楞纸上产卵极少。前人对茶尺蠖产卵条已有报道,但在应用时发现,该产卵条产卵效果时好时坏。本研究对该产卵条作了改进,并进行了对比试验,找到一种产卵效果更佳的产卵条制作方法,并在茶尺蠖和灰茶尺蠖的饲养中应用,效果很好。现将研究结果总结如下,为茶尺蠖和灰茶尺蠖的大量饲养提供依据。
1材料与方法
1.1供试虫源
茶尺蠖为浙江余杭(119.90°E,30.39°N)种群,灰茶尺蠖为浙江乐清(121.08°E,28.36°N)种群,均为田间采集幼虫在养虫室用新鲜茶叶连续饲养多代的健康虫种。饲养条件:温度(23±1)℃;光周期L//D=12 h//12h;相对湿度75%~80%。
1.2产卵条
设计制作了4种产卵条,其中A为将纸片3次折叠,形成4层纸3条缝的产卵条;B为将纸片2次折叠,形成3层纸2条缝的产卵条;C为将纸片1次折叠,形成2层纸1条缝的产卵条(同参考文献[4]);D为无缝的产卵条,做法是将产卵条B的两条缝隙用胶水紧密粘合起来,自然晾干。
将A4打印纸先裁切成一定大小的小纸片,折叠后两端用订书机订合,形成长100mm、宽18mm的纸条。以B为例,先裁切成长100minx宽54mm的纸片,折叠订合后形成长100mm×宽18mm的产卵条(图1)。A和C的起始纸片大小分别为长100mmx宽72mm、长100mmx宽36mm,D的起始纸片大小同B。
1.3单一卵条的产卵试验
用同一批饲养的茶尺蠖成虫进行产卵试验,将上述A、B、C、D4种产卵条分别放人500mL养虫瓶中,每瓶中放人1个产卵条,接入1对刚羽化未交配的成虫进行配对产卵,瓶内放入一片茶叶保湿,用白纸和牛皮筋将瓶口封住。1个养虫瓶为1个重复,每处理9次重复。饲养条件为:(22.54±0.5)℃,L//c=10 h//14 h。3 d后取产卵条检查记录着卵量。
1.4不同产卵条的选择性试验
在同一个养虫瓶中放人2种不同产卵条,共设A+B、B+C、A+C 3种组合,每瓶接入2对刚羽化未交配的茶尺蠖成虫进行配对产卵试验,瓶内放人1片茶叶保湿,用白纸和牛皮筋封住瓶口。1个养虫瓶为1个重复,每处理6次重复。饲养条件同1.3。3 d后取产卵条检查记录着卵量。
1.5产卵条B在茶尺蠖和灰茶尺蠖大量饲养中的应用
茶尺蠖和灰茶尺蠖的大量饲养:每批次50~100瓶,每瓶接入一对成虫,并放置1~2个产卵条B取卵,以确保每批次的幼虫数量达1~2万头。成虫配对及饲养方法同1.3。每天定时取出有卵的产卵条,连续取3 d。将同一天取的卵条集中放置在同一个养虫瓶中冷藏保存,每瓶保存25~30张卵条。成虫产卵结束后,分别从不同时问点保存的卵条中抽取5张,茶尺蠖和灰茶尺蠖各取15张,检查着卵量。
1.6卵量检查及数据统计
用医用微型剪刀将卵条从卵块附近的空白处剪开,并剪取有卵的纸片,卵块朝上放在解剖镜载物台de,开启透射灯,光线自下而上,透过纸片和卵粒进行观察和计数。所得数据用DPS软件进行方差分析和多重比较。
2结果与分析
2.1单一产卵条的产卵试验
试验结果(表1)表明,产卵条制作方法不同,产卵效果有显著差异(F=13.967,P=0)。供试的4种产卵条中产卵条B的着卵效果最好,与前人报道的产卵条相比,卵条上着卵量显著增加,提高45.95%。产卵条A的缝隙虽有3个,但卵条上着卵量与产卵条B相比略少,两者没有显著差异。试验还表明,产卵条D着卵量非常少,成虫将卵产于养虫瓶中,卵条上没有卵或只有极少的卵,可见缝隙对产卵的影响很大。
2.2不同产卵条的选择性试验
在同一个养虫瓶中放入2种不同产卵条,成虫有明显的选择喜好(图2)。B与C组合时,成虫偏好选择B产卵条产卵,两者产卵量有极显著差异(F=65.382,P<0.01),B卵條上的着卵量占总卵量的94.5%;A与C组合时,成虫偏好选择A产卵条产卵,两者产卵量有极显著差异(F=142.065,P<0.01);在A与B组合时,则出现A、B上卵量约各占一半,两者问无显著差异(F=0.152,P=0.7046)。
选择试验结果再次证明,产卵条B的产卵效果显著优于卵条C。同时在制作方法上,产卵条B比产卵条A简单。因此,产卵条B是产卵效果最好而且制作最简单的一种产卵条。
2.3产卵条B在茶尺蠖和灰茶尺蠖大量饲养中的应用
上述产卵试验结果表明,对于茶尺蠖,产卵条B的应用效果显著优于产卵条c和D,是筛选出的比较理想的产卵条。考虑到灰茶尺蠖和茶尺蠖为近缘种,外部形态和生活习性都十分近似,因此,将产卵条B也应用到灰茶尺蠖的饲养中。抽样调查结果显示,茶尺蠖每张卵条的着卵量在112~389粒之问,平均为195.9粒;灰茶尺蠖每张卵条的着卵量在119~396粒之间,平均为225.4粒。说明改进筛选出的产卵条B可适用于这2种尺蠖。
3结论与讨论
产卵条的制作对于昆虫大量饲养意义重大。昆虫人工饲养中常需根据昆虫习性选择利于产卵和卵孵化的基质,满足实际饲养需要。本研究根据茶尺蠖喜产卵于缝隙的习性,用普通A4打印纸制作了具有2条缝隙的产卵条,其着卵量高,且制作方法简单、成本低,可方便取卵和卵的冷藏等操作,对茶尺蠖和灰茶尺蠖大量饲养和茶尺蠖核型多角体病毒繁殖十分有益。
根据昆虫的产卵习性制作产卵条可以取得好的产卵效果,否则会出现不产卵或极少产卵的情况。对茶尺蠖产卵行为的研究表明,成虫产卵时会伸长产卵器,寻找裂缝,将卵产于裂缝中。所以产卵条的缝隙对其成虫产卵十分重要。如果没有裂缝虽偶也会产卵,但卵量极少。缝隙太大或者太小都不利于产卵。上述试验结果也证实了这点。成虫产卵器长3.4~4.7mm,具有伸缩性,直径0.5~0.6mm;卵长径约0.71mm,短径约0.47mm。本研究制作的产卵条(即产卵条B)缝隙大小为0.5~1mm,与产卵器直径基本吻合,成为成虫最适合的产卵场所,同时由于两边各有一个缝隙,提供了可选择场所,因此产卵量高。而过去的方法制作的产卵条(即产卵条c)常常出现缝隙过大(大于2mm)或过小(两层纸紧密贴合)的情况,不利于成虫产卵,这可能就是导致该产卵条产卵效果时好时坏的主要原因。
本产卵条不但具有制作简单且着卵量高的优点,还使得检查卵量和卵孵化率准确易行。本研究制作的产卵条裂缝大小合适,成虫所产卵块较薄,通常为1~2层卵(图3),这样使得卵量的检查变得容易,提高了产卵量和存活率计数的准确性。而产在缝隙大的卵条(产卵条c)或养虫瓶内的卵块则是多层卵叠在一起(图4),必须要用毛笔刷下或拨下卵粒才能进行观察,刷卵必会对卵粒有损伤,由拨、刷卵造成的死亡率至少为10%,影响试验的准确性,误差大。