不同炮制方法对草果中挥发性成分的影响

迟玉广 李中阳 黄爱华

摘要 [目的]研究草果的不同炮制方法对其挥发油的含量及成分的影响，为临床用药提供依据。[方法]将草果依法炮制处理后，采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，并利用GC-MS技术分析测定其中挥发性成分及相对含量。[结果]草果生品、炒制品和姜炙品的挥发油提取率分别是0.025 1～0.026 8、0.021 7～0.022 0和0.015 8～0.018 9 mL/g，并分别鉴定出了52、46、47个组分，其中，以1，8-桉油素、香叶醇等5个成分含量较高，占峰面积总和的50%以上;与炮制品相比，生品中1，8-桉油素相对含量较高，而香叶醇在姜炙品的相对含量则明显高于其他2个样品。[结论]不同炮制方法对草果挥发油提取率及其主要挥发性成分的相对含量存在一定的影响。

关键词 草果;炮制方法;挥发性成分;GC-MS

Abstract [Objective]To study the effects of different processing methods of Amomum tsao-ko on the content and composition of its volatile oil， to provide the basis for clinical medication.[Method]After the Amomum tsao-ko was processed according to law， the volatile oil was extracted by steam distillation， and the volatile components and relative content were analyzed and determined by GC-MS technology.[Result]The extraction efficiency of Amomum tsao-ko from raw， fried and ginger made were 0.025 1-0.026 8，0.021 7-0.022 0 and 0.015 8-0.018 9 mL/g， and 52， 46， 47 kinds of compounds in three Amomum tsao-ko volatile oils were identified，respectively.Among them， the content of 5 components including 1，8-cineole and geraniol were relatively high， accounting for more than 50% of the total peak area.Compared with processed products，the relative content of 1，8-eucalyptin in raw products was higher.The relative content of geraniol in ginger products was obviously higher than that in other two samples.[Conclusion]Different processing methods have different effects on the extraction efficiency and the relative content of the main volatile components in Amomum tsao-ko.

Key words Amomum tsao-ko;Processing methods;Volatile component;GC-MS

草果又名草果仁、草果子、老蔻，为姜科植物草果Amomum tsao-ko Crevost et Lemaire的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采摘，除去杂质，晒干或低温干燥，或用沸水烫2～3 min后，再晒干或烘干，主产于云南、广西、贵州等省。草果味辛、性温，归脾、胃经，具有燥湿温中、截疟除痰等功效，用于寒湿内阻、脘腹胀痛、痞满呕吐、疟疾寒热、瘟疫发热等[1]。

现代药理研究证明，草果中的挥发油是其最主要活性成分之一，具有多种功效[2]。因此，在《中国药典》中，测定挥发油总量是评价草果品质的重要指标之一。草果挥发油的成分主要为萜类化合物，包括单萜烯类、含氧单萜类、倍半萜烯烃类及含氧倍半萜类等，其中果仁和果壳挥发油中以1，8-桉油素含量最高[3]。目前国内外关于草果挥发性成分的研究主要集中在成分分析[3-5]、提取方法研究[6-8]、药理药效研究[9-10]、检测方法及指纹图谱分析[11-12]等方面，而关于不同炮制方法对草果中挥发性成分的影响方面的研究鲜有报道。该研究拟在前人研究的基础上，将草果运用炒制、姜炙2种传统炮制方法炮制后，分别用水蒸气蒸馏法提取其中挥发油，并利用GC-MS联用技术对草果炮制品和生品中的挥发性成分进行相对含量及成分的比较研究。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

电子天平（杭州友恒称重设备有限公司）;TC-15套式恒温器（海宁市新华医疗器械厂）;KQ-200DE型数控超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）;气质联用仪（单四极杆）Agilent7890B-5975A（美国安捷伦科技有限公司）;挥发油提取器一套。

草果药材（产品批号：160501，产地：云南）;蒸馏水;生姜汁（自制）;无水乙醚（分析纯）;无水硫酸钠（分析纯）。

1.2 草果的加工与炮制

称取3份80～90 g的草果，除杂，按照文献[13-15]方法炮制，重复3次，具体方法如下：

①生品。取一份除杂后的草果，去壳和隔膜，取仁，打成粗粉，密封保存备用。②炒制。取一份除杂后的草果，放入熱锅内，用武火炒至外表黑褐，发泡，有香气时取出，放凉，筛去灰屑，去壳和隔膜，取仁，打成粗粉，密封保存备用[13-14]。③姜炙。取一份除杂后的草果，去壳取仁，加入6 g姜汁拌匀，稍闷润，待姜汁被吸尽后，置炒制容器内，用文火加热，炒至深黄色而姜汁微干，取出晾凉，打成粗粉，密封保存备用。

1.3 挥发油提取

依照2015版《中国药典》四部通则2204，挥发油提取方法如下：取“1.2”项下3组样品粉末各50.0 g，加400 mL 蒸馏水浸泡1.5 h，用挥发油提取器按常规水蒸气蒸馏法提取5 h，读取挥发油量后用无水硫酸钠干燥，封装备用。

1.4 挥发油检测

对提取的草果挥发油利用GC-MS分析，检测方法如下。

1.4.1

气相色谱条件。HP-5MS毛细管色谱柱，30 m×250 μm×0.25 μm;进样口温度250 ℃;进样量1 μL;分流比为50∶1;汽化温度为 250 ℃;溶剂延迟3.0 min;柱初始温度80 ℃，保持3 min，以6 ℃/min升至180 ℃保持2 min;载气为He，流速为1.0 mL/min。

1.4.2

质谱条件。电离方式EI（70 eV）;离子源温度为230 ℃;四级杆温度为150 ℃;接口温度为280 ℃;质量扫描范围50～550 amu。

2 结果与分析

2.1 草果不同炮制品挥发油物理性状及提取率

挥发油提取器中提取液分上下两层，上层液均为橙黄色油状液体，香味辛辣浓烈;下层液均为白色浑浊液体，气味淡，草果生品与炮制品的挥发油物理性质无明显差异。测量上层橙黄色油相体积，计算挥发油提取率，结果得出生品、炒制品和姜炙品草果挥发油提取率分别为0.025 1～0.026 8、0.021 7～0.022 0和0.015 8～0.018 9 mL/g。

2.2 草果不同炮制品主要挥发性成分分析

利用上述方法分别对生品、炒制品和姜炙品挥发油样品进行GC-MS分析，得总离子流图，具体结果见图1。所得各组分经NIST数据库检索确定其化学成分，并使用面积归一化法，计算各化学成分在挥发油中的相对含量。结果显示（表1），草果生品、炒制品和姜炙品的挥发油中分别鉴定出了52、46、47个组分，分别占其挥发油总量的99.90%、99.98%和99.99%。其中，以1，8-桉油素、香叶醇、2-异丙基苯甲醛、α-松油醇和（E）-柠檬醛5种成分含量较高，占峰面积总和的50%以上。

2.3 炒制和姜炙工艺对草果挥发油提取率及成分的影响

挥发油提取率测定结果显示，炮制过后的各样品挥发油含量明显减少，其中以姜炙品最为明显，数据经单因素方差分析显著性差异明显（P=0.002）。可能是由于姜炙过程中，果仁经液体闷润，又加热挥干液体，导致了挥发油的损失。而炒制过程中，果仁不直接接触热源，果壳在其中起到了缓冲作用，使挥发油损失较少。

此外，通过对2种不同炮制品和生品草果挥发油主要化学成分的比较发现，3个挥发油样品中共有成分数量较多，共有40个，分别占生品、炒制品、姜炙品挥发油总量的96.16%、98.12%、97.69%。而通过对各样品特有成分分析发现，各样品特有成分数量相对较少，且相对含量偏低，其中，生品草果挥发油特有成分有7个，占其挥发油总量的1.22%;炒制草果挥发油特有成分有2个，占其挥发油总量的0.69%;姜炙草果挥发油特有成分有2个，仅占其挥发油总量的0.38%。由此说明，炒制和姜炙2种炮制工艺对草果挥发油中的化学成分种类无显著性影响。

2.4 不同炮制品中5种主要成分的相对含量差异分析

从图2可以看出，3个挥发油样品中均以1，8-桉油素含量最高，是草果挥发油中的最主要有效成分。其中，在生品草果中，1，8-桉油素相对含量最高，达26.99%，炒制品次之，姜炙品中相对含量最低，仅为22.89%，与挥发油提取率呈现相同规律。此外，除1，8-桉油素外，其他4种成分相对含量在生品草果中基本持平，而在2种炮制品中，香叶醇则较其他3种成分含量明显提高，其中以姜炙品中最为明显。

3 结论

（1）草果不同炮制品的挥发油提取率存在一定差异，经过炮制后挥发油提取率与生品相比有所下降，其中以姜炙品最为明显，由此推测姜炙后草果的辛燥之性有所缓和。

（2）3个挥发油样品中共检出58个化合物，其中以1，8-桉油素、香叶醇、2-异丙基苯甲醛、α-松油醇和（E）-柠檬醛5种成分相对含量较高。

（3）在5种主要挥发性成分中，1，8-桉油素的相对含量远高于其他成分，是草果中的最主要挥发性成分，且其在生品中相对含量明显高于2种炮制品，该结果说明生品草果的抗菌杀虫、截疟除痰的功效应当优于炮制品。

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