葛叶粉对肉鸡生长性能及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响

龚建平，龙 伟，吕亚宁，吴 东，黄玉林，陈小连

（1. 江西中医药大学药学院，江西 南昌 330004；2. 江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心，江西 南昌 330006；3. 江西省农业科学院畜牧兽医研究所，江西 南昌 330200）

野葛(Pueraria lobata)是豆科葛属多年生缠绕性藤本植物，具有较高的药用和食用价值，我国卫生部已将葛根列入“既是食品又是药品的物品名单”中。随着人们对野葛研究的不断深入和葛根深加工产品的进一步开发利用，野葛种植面积越来越大。葛的根、茎、叶和花均可入药或开发为保健食品，然而人们对葛资源的利用仍然以其传统药用部位根部入药或制作葛粉，生产和收获时野葛的茎和叶多作废弃物丢掉，造成资源的极大浪费和生态环境的污染[1]。已有研究表明，葛叶中含有17.6%～21.2%的粗蛋白质、2.36%～2.74%的粗脂肪、1.12%～1.38%的钙、0.15%～0.29%的磷、粗纤维含量较低(8.85%～12.3%)，含有16 种氨基酸、多种矿物元素和维生素且含量较高[2-4]。另外，葛叶中还含有丰富的异黄酮类物质[5]，主要有葛根素、大豆苷、大豆苷元等多种生物活性物质[6-7]。《本草图经》中记载葛“叶主金刃疮，山行伤刺血出，卒不可得药，但叶敷之，甚效”，葛叶具有收敛止血、消肿止痛的功效[8]。葛叶的饲用价值较高，已在猪、兔、羊等动物饲粮中应用，可一定程度提高动物生长性能和养殖效益[9-12]，然而有关葛叶在肉鸡饲粮中的应用还未见报道。为此，在肉鸡饲粮中添加葛叶粉，研究葛叶粉对其生长性能、血清生化、抗氧化和免疫指标的影响，可为葛叶在肉鸡生产中的应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

葛叶粉由新鲜野葛叶片经日光晒干、粉碎制成，由德兴市宋氏葛业有限公司提供，经试验和检测，干物质含量92.29%，总能16.31 MJ·kg−1，禽代谢能4.60 MJ·kg−1，粗 蛋 白 含 量17.06%，粗 纤 维 含 量15%，粗脂肪含量4.2%，粗灰分含量14.6%，钙含量0.79%，总磷含量0.17%，蛋氨酸含量0.097%，赖氨酸含量0.129%，胱氨酸含量0.146%。

1.2 试验动物与分组

选择在同一条件下饲养的体重相近[(325.59 ±1.84) g]的21 日龄新广麻鸡母鸡384 只，随机分为4 组，每组6 个重复，每个重复16 只，各组试验鸡初始体重无显著差异(P ＞ 0.05)，分别饲喂含0 (对照组)、1%、2%和3%葛叶粉的试验饲粮，试验期共49 d。试验在江西省农业科学院畜牧兽医研究所试验鸡场开展，采用三层立体网养，试验鸡自由采食和饮水，按常规程序接种免疫。试验饲粮组成和营养水平如表1 所列。

1.3 测定指标与方法

1.3.1 生长性能

试验期间以重复为单位记录试验鸡的采食量、称量试验鸡21 日龄、42 日龄和70 日龄空腹体重，计算各阶段试验鸡的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料肉比(F/G)。

表1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the experimental diets (air-dry basis)

1.3.2 血样采集与血清制备

试验期末于试验鸡禁食12 h 后，每重复选取2 只接近平均体重的鸡，翅静脉采血5 mL，分离出血清，于−20 ℃保存待测。

1.3.3 血清指标测定

采用试剂盒法测定血清生化指标，包括总蛋白(total protein, TP)、白 蛋 白(albumin, ALB)、尿 素 氮(blood urea nitrogen, BUN)、甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、碱 性 磷 酸 酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷草转氨酶(aspartate transaminase, AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)和抗氧化指标，包括总抗氧化能力(total antioxidant capacity, TAOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)活力及丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量，所用试剂盒购于南京建成生物工程研究所；免疫指标包括免疫球蛋白A (IgA)、IgG、IgM、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6 (IL-6)等，所用试验盒购于美国R & D Systems 公司。

1.4 数据处理和统计分析方法

采用Excel 对数据进行整理，SPSS 21.0 统计软件进行单因素方差分析，对组间差异进行LSD 多重比较，P ＜ 0.05 表示差异显著，P ＞ 0.05 表示差异不显著，结果以平均值 ± 标准差表示。

2 结果与分析

2.1 饲粮中添加葛叶粉对肉鸡生长性能的影响

试验结果(表2)显示，肉鸡饲粮中添加1%～3%葛叶粉对肉鸡前期、后期及全期的平均日增重 、平均日采 食量和料肉比均无显著影响(P ＞ 0.05)。

2.2 试验饲粮中添加不同比例葛叶粉对肉鸡血清生化指标的影响

试验结果(表3)显示，与对照组相比，肉鸡饲粮中添加1%的葛叶粉对肉鸡血清生化指标无显著影响(P ＞ 0.05)；添加2%葛叶粉显著提高肉鸡血清ALB 和LDL 含量、降低TG 含量和AST 活性(P ＜ 0.05)；添加3%葛叶粉显著提高肉鸡血清TP、ALB 和LDL含量，显著降低BUN、TG、TC 和HDL 含量、AST 和ALT 活性(P ＜ 0.05)。

表2 葛叶粉对肉鸡生长性能的影响Table 2 Effects of kudzu leaf meal on the growth performance of broilers

表3 葛叶粉对肉鸡血清生化指标的影响Table 3 Effects of kudzu leaf meal on the serum biochemical indexes for broilers

2.3 试验饲粮中添加不同比例葛叶粉对肉鸡血清抗氧化性能的影响

试验结果(表4)显示，与对照组相比，添加1%～3%葛叶粉对肉鸡血清SOD 活性无显著影响(P ＞ 0.05)，可显著提高肉鸡血清T-AOC 和GSHPx 活性(P ＜ 0.05)，添加3%葛叶粉可显著降低血清MDA 含量。

表4 葛叶粉对肉鸡血清抗氧化性能的影响Table 4 Effects of kudzu leaf meal on the serum antioxidant function of broilers

2.4 试验饲粮中添加不同比例葛叶粉对肉鸡血清免疫性能的影响

试验结果(表5)显示，与对照相比，添加1%葛叶粉显著提高肉鸡血清IgM 含量(P ＜ 0.05)；添加2%葛叶粉显著提高肉鸡血清IgM 含量、降低IL-1β 含量；添加3%葛叶粉显著提高血清IgG、IgM 含量、显著降低了IL-1β 和IL-2 含量。添加葛叶粉对肉 鸡 血 清IgA、TNF-α、IL-6指 标 无 显 著 差 异(P ＞0.05)。

表5 葛叶粉对肉鸡血清免疫指标的影响Table 5 Effects of kudzu leaf meal on the serum immune function of broilers

3 讨论与结论

已有研究表明，葛根中的主要活性成分葛根素、大豆苷、大豆苷元在葛叶中同样存在，且含量较高[6]，部分葛叶中总黄酮含量还高于葛根。曾慧婷等[1]研究表明，野葛和赣葛2 号葛叶中总黄酮含量分别为1.83%和2.38%，分别比根中总黄酮含量高49.3%和13.3%。葛叶中还含有较高的粗蛋白、微量元素和维生素，由此可见，葛叶具有较大的开发利用价值。目前关于葛叶粉对肉鸡生长性能的影响尚未见报道。在本研究中，肉鸡饲粮中添加1%～3%葛叶粉对肉鸡ADG、ADFI 和F/G 均无显著影响，说明葛叶粉的添加不会影响肉鸡饲料的适口性，添加量不超过3%对肉鸡的生长无不良影响，从饲料资源的开发利用来看，在肉鸡饲粮中适量的葛叶粉是可行的。本研究结果与野葛提取物对动物生长性能的影响结果类似。田青[13]和刘瑞玲[14]报道，葛根素可一定程度提高肉鸭的生长性能，但与对照组差异不显著。刘博等[15]研究发现，在AA 肉鸡基础饲粮中添加10 mg∙kg−1葛根总黄酮，对肉鸡ADFI 无显著影响，但提高了肉鸡的ADG，降低了肉鸡的F/G，而添加250 mg∙kg−1和1 250 mg∙kg−1葛根总黄酮，对AA肉鸡的生长性能无显著影响。高靖等[16]研究表明，葛根提取物对哺乳母猪的采食量、料乳比等生长性能无显著影响。吕梦云[5]报道，葛藤黄酮提取物对肉鸡的生产性能无显著影响，也有其他黄酮类提取物对肉鸡生长性能无显著影响的报道[17-19]。

血清生化指标是反映机体物质代谢变化和组织功能正常的重要指标之一[20]。本研究发现，添加3%的葛叶粉显著提高了肉鸡血清总蛋白和白蛋白含量、降低了血清尿素氮含量，说明葛叶粉促进了肉鸡体内蛋白质的合成代谢，蛋白质利用率提高，有利于机体生长，这与王芳芳等[21]对葛根异黄酮的研究结果一致。血清中甘油三酯、总胆固醇和脂蛋白含量是体内脂肪代谢的重要指标[22]。本研究中，添加3%的葛叶粉显著提高了肉鸡低密度脂蛋白含量，显著降低了甘油三酯、总胆固醇和高密度脂蛋白含量，表明葛叶粉促进了肉鸡脂类代谢，且对肉鸡无毒副作用，这可能与葛根提取物中黄酮类物质具有调节血清和肝脏脂质代谢的作用有关[23]。谷草转氨酶和谷丙转氨酶是机体内重要的转氨酶，当血清中两种酶含量升高，说明肝细胞受到一定程度的损伤[24]，因此也是反映肝脏和心脏健康状况的重要指标[25]。本研究添加葛叶粉显著降低了肉鸡血清谷草转氨酶和谷草转氨酶活性，提示葛叶粉具有一定保护肉鸡肝脏的作用，已有研究表明，葛根素对急性肝损伤具有保护作用[26]。

正常情况下，动物代谢过程产生的活性氧自由基会被体内固有抗氧化系统清除，自由基的生成和清除处于动态平衡中，一旦平衡被破坏，过量的自由基攻击细胞膜、蛋白质、DNA 等生物大分子，引起细胞损伤和凋亡[27]。机体内T-AOC、SOD、GSH-Px活力和MDA 含量反映了机体抗氧化能力及脂质过氧化程度。有研究表明，葛根素具有较强的抗氧化、抗肿瘤和抗凋亡效果，保护血管和神经活性[28]。徐晓虹[29]报道，葛根素能显著降低血清MDA 含量，使衰老小鼠体内血清SOD 的活性显著升高。李德生等[30]报道，在母猪饲粮中添加葛根素类异黄酮物质能够显著降低母猪血清中MDA 含量。本研究结果发现，添加1%～3%葛叶粉可显著提高肉鸡血清T-AOC 和GSH-Px 活性，且添加3%葛叶粉显著降低了血清MDA 含量，此结果与上述结论基本一致，其原因可能与葛叶中含有丰富的异黄酮类物质有关，其能够显著改善机体抗氧化水平。

血清免疫球蛋白和细胞因子是反映机体免疫功能的指标。已有研究表明，野葛提取物具有提高机体免疫力作用。徐洋等[31]研究表明，基础日粮中添加0.1%葛根素提取物，肉牛血清中IgG、IgM 含量相比对照组显著提高了9.45%、8.33%。葛根素对T 淋巴细胞免疫功能同样有促进作用[32]。徐松琪[33]发现，葛根提取物可提高哺乳母猪血清IgA 和IgG含量，吕梦云[5]研究表明，葛藤黄酮提取物显著提高了肉鸡免疫性能。在本研究中，添加葛叶粉显著提高了肉鸡血清IgG 和IgM 含量，显著降低了IL-1β和IL-2 含量，这提示饲粮中添加一定水平的葛叶粉具有改善肉鸡免疫功能的作用。

综上，饲粮中添加1%～3%葛叶粉对肉鸡生长性能无负面影响，能在一定程度上提高肉鸡抗氧化性能和免疫功能，有利于机体健康。葛叶粉可应用到肉鸡饲料中，添加3%效果更好。