中草药制剂对鸭生长性能、抗氧化及病毒性肝炎的保护作用

侯晓琪，袁 林

（1.贵州农业职业学院，贵州贵阳 551400；2.息烽县畜牧水产技术开发服务中心，贵州贵阳 551100）

老鼠簕是爵床科植物，它是红树林重要组成部分之一，其75% 乙醇提取物中已经鉴定出8 种化合物，分别为二十六烷酸、豆甾醇、三十四烷醇、豆甾醇-3- 吡喃葡萄糖苷、香草酸、4- 羟基2- 苯并恶唑啉酮和槲皮素（彭兴和龙盛京，2006）。这种植物有多种医学用途，包括治疗淋巴肿大、脾脏肿大、胃痛、咳嗽和哮喘，其提取物还被用于治疗瘫痪、蛇咬伤、风湿病等（彭兴和龙盛京，2004）。此外，Mani（2012）还报道，老鼠簕提取物具有显著的抗炎和胃保护作用，其中丁醇和氯仿提取物还具有抑制枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、曲霉菌、黑曲霉的作用。Babu 等（2002）也报道了老鼠簕的抗氧化活性和抑制肿瘤作用。但目前在医药上主要使用这种中草药来治疗肝炎。目前关于其在动物上的抗病毒活性研究有限，特别是针对鸭肝炎病毒。因此，本试验以商品肉鸭为动物模型，通过注射鸭肝炎病毒建立毒理模型，研究老鼠簕乙醇提取物对肉鸭生长性能、抗氧化及对鸭病毒性肝炎的保护作用。

1 材料与方法

1.1 试验日粮与动物分组 试验选择平均初始体重为（48.63±0.06）g 的肉鸭600 只，随机分为4 组，每组5 个重复，每个重复30 只。对照组肉鸭饲喂基础日粮（不处理），处理组肉鸭注射0.15 mL/ 只（LD50为104.38×0.2/mL）鸭肝炎病毒B，分别饲喂基础日粮+0、40 和80 mg/kg 中草药制剂。基础日粮组成及营养水平见表1，老鼠簕乙醇提取物的制备方法参考Babu 等（2001）的方法制备。

1.2 数据记录与样品采集 在试验第1、21、42天早上禁食前按照重复对肉鸭进行称重，每周统计1 次饲料消耗量，试验结束后计算1 ～21 d、22 ～42 d 和1 ～42 d 肉鸭的平均日增重、平均日采食量和料重比。分别在试验第21 和42 天时，每个重复随机选择8 只体重接近的肉鸭翅下静脉采血5 mL，25℃静置15 min，3000g下离心15 min，分离血清-20℃保存。同时在试验结束当天每个重复选择8 只体重接近的肉鸭进行屠宰，取右侧肝脏，-20℃保存。

表1 日粮原料组成及营养水平

1.3 样品测定 血清抗氧化酶活性，如谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量，肝脏谷草转氨酶（AST）和肝脏谷丙转氨酶（ALT）活性采用南京建成生物工程有限公司的试剂盒测定，具体方法参考试剂盒说明书。鸭病毒性肝炎OD 值参考上海研谨生物科技有限公司的试剂盒测定。肝脏病变的判定采用Wei 等（2015）的方法，即无病变（0）、轻微病变（＜1/3 区域）、中度病变（1/3 ＜病变区域＜2/3）、严重病变（＞2/3 区域）。

1.4 数据分析 试验数据采用SAS 软件单因素方差分析模型，采用Turkey 法进行多重比较，P＜0.05 表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 中草药制剂对肉鸭生长性能的影响 由表2 可知，试验处理对1 d 和21 d 肉鸭体重、1 ～21 d、1 ～42 d 平均日增重、1 ～21 d 饲料报酬及各阶段采食量无显著影响（P＞0.05）。T1 组肉鸭42 d 体 重、22 ～42 d 日 增 重 最 低（P＜0.05）。与对照组相比，T1 组肉鸭22 ～42 d 饲料报酬显著降低1.5%（P＜0.05），同时在整个试验阶段，T1 组肉鸭饲料报酬较其他组分别显著降低了8.33%、6.38% 和6.38%（P＜0.05）。

表2 中草药对肉鸭生长性能的影响

2.2 中草药制剂对肉鸭血清抗氧化和肝脏酶活的影响 由表3 可知，对照组与处理组对21 d 肉鸭血清GSH-Px 活性及21、42 d 肉鸭血清SOD活性的影响无显著差异（P＞0.05）。T1 组肉鸭42 d 血 清GSH-Px 活 性 最 低（P＜0.05），但21和42 d 血清丙二醛含量及肝脏AST 和ALT 活性最高（P＜0.05）。

表3 中草药对肉鸭血清抗氧化和肝脏酶活的影响

2.3 中草药制剂对鸭病毒性肝炎OD 值及肝脏病变的影响 由表4 可知，试验处理对21 和42 d鸭病毒性肝炎OD 值无显著影响（P＞0.05）。对照组肉鸭肝脏无病变的样品数显著高于处理组（P＜0.05），T2 组肝脏处于轻微病变数显著高于其他组（P＜0.05），而T1 组肝脏处于严重病变的样品数表现最高（P＜0.05）。

表4 中草药对鸭病毒性肝炎OD 值和肝脏病变的影响

3 讨论

鸭病毒性肝炎动物模型是一种简单、经济的动物模型，可以提供一种类似于人类肝炎病毒感染的体内试验系统，目前该动物模型正应用于抗肝炎药物筛选和治疗的研究（Kundgen 等，2002）。本研究以鸭病毒性肝炎动物模型为研究对象，研究了老鼠簕乙醇提取物对抗鸭病毒性肝炎病毒和保护肝脏的作用，本试验结果发现，感染了肝炎病毒的肉鸭（T1）42 d 体重、22 ～42 d 日增重最低，同时该组肉鸭22 ～42 d 饲料报酬显著降低，在整个试验阶段，T1 组肉鸭饲料报酬较其他组分别显著降低了8.33%、6.38% 和6.38%。结果说明，老鼠簕乙醇提取物可改善肝炎病毒对肉鸭生长的抑制作用，提高带毒肉鸭的饲料报酬。

血清抗氧化酶活性及丙二醛含量显示，T1 组肉鸭42 d 血清GSH-Px 活性最低，但21 和42 d血清丙二醛含量显著升高。田莹等（2007）报道了老鼠簕的多糖成分具有较强的抗氧化性和良好的还原力，主要机制是老鼠簕活性成分显著提高自由基清除效果，其中对羟基自由基的清除率达到80%，对超氧阴离子的抑制率为66.1%。此外，感染了肝炎病毒的肉鸭（T1 组）肝脏AST 和ALT 活性显著高于对照组和其他处理组，尽管感染肝炎病毒的肉鸭（T1 ～T3）组这两种酶活性无显著差异，但日粮添加老鼠簕提取物的肉鸭（T2和T3 组）两种酶活性在数值上都高于对照组。血清ALT 和AST 仍被认为是反映肝细胞损伤的基本指标，也是反映肝损伤的敏感指标（Pratt 和Kaplan，2000）。因此，本研究结果说明，老鼠簕提取物有助于缓解肝炎病毒对肝脏的损伤程度。

抗原检测结果显示，处理组抗原OD 值在数值上高于对照组，但无显著差异，说明老鼠簕提取物可能对两种抗原的活性无明显降低作用，这与Wei 等（2015）报道的结果一致。病理检查显示，T1 组肉鸭肝脏严重病变的数量达到50%，而感染组添加40 mg/kg 老鼠簕提取物组未发现肝脏严重病变，该组仅有50% 表现轻微病变，12.5% 表现为中度病变，说明日粮添加40 mg/kg 老鼠簕乙醇提取物对感染鸭病毒性肝炎病毒的肉鸭肝脏有一定的保护作用。

4 结论

综上所述，本研究发现，日粮添加中草药制剂对肉鸭病毒性肝炎无抵抗作用，但可以降低肝脏转氨酶、缓解病毒性肝炎所致的损伤作用，其保护作用可能与抗氧化活性升高有关。