龙九味之五味子研究进展

武天元，张树明

(1黑龙江中医药大学药学院·黑龙江 哈尔滨 150024；2黑龙江省中医药科学院·黑龙江 哈尔滨 150036)

五味子始载于《神农本草经》，现己正式列入了中国、日本、韩国、俄罗斯、美国、欧洲等世界药典。具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效，为临床常用中药，市场需求量较大。根据五味子产地分布，黑龙江省为主产区，且药材质量较优，被国内外中医药学者所追捧。同时黑龙江省为了打造中医药大省强省，将五味子列入重点发展的“龙九味”之一。为了更好的了解五味子近年研究，课题组以中国知网数据库为依托，以“五味子”为关键词检索了近十年五味子炮制相关研究，对其进行分析后概述如下。

1 五味子炮制工艺研究

五味子在《神农本草经》中为上品，但该书中未记载炮制方法。在汉代《金匮玉函经》中为最早出现其炮制“曰:‘碎’”，梁代《本草经集注》中“曰:‘打破’”。而后五味子的多种炮制方法陆续出现，如炒法、焙法、烧法、炮法、烘法、蒸法、熬膏、制炭、蜜制、酒制、糯米炒、麸炒、盐蒸、蜜酒合制等。“炒”法为孙思邈首次在《银海精微》中提出。“蜜制”为《雷公炮炙论》中最早记载“凡用，以铜刀劈作两片，用蜜浸蒸……”。醋五味子出现在《全国中药炮制规范》，该法为近代炮制方法的发展，在古代文献中未见记载。对不同炮制品由于各地用药习惯不同而存在区域使用差异，常用的有醋五味子、五味子、酒五味子、蜜五味子、炒五味子，但2020版《中华人民共和国药典》仅有醋五味子为五味子饮片[1]。

近十年对五味子的炮制工艺主要集中在醋制和酒制工艺,仅一篇文章为五味子盐炙工艺研究。其中醋制工艺包括醋蒸工艺及高压醋蒸工艺研究：许世泉等[2]以五味子总木脂素、五味子醇甲及五味子乙素为指标确定最佳高压醋蒸工艺为加入30%醋，拌匀闷润3 h，蒸制1 h；高慧等[3]以6种木脂素类成分含量为指标考察蒸制及烘制时间对醋五味子的影响确定最佳炮制工艺为加20%米醋闷润1.5 h,蒸制3 h,于50 ℃烘制1 h；刘炬灼等[4]以8种木脂素的含量及总和作为评价指标，通过正交试验和BBD-RSM优化五味子的炮制工艺，确定醋蒸炮制工艺最佳条件为醋的用量30 g/100 g，闷润时间1 h，蒸制时间5 h。酒制工艺包括酒蒸工艺及高压酒蒸工艺研究研究：刘炬灼等[4]采用正交试验和BBD-RSM优化了酒蒸五味子炮制工艺，并以8种木脂素的含量为评价指标，确定用酒量20 g/100 g、闷润2 h、蒸制3 h为最佳工艺。高压酒蒸五味子工艺翟德银等[5]研究认为在辅料用量相同时，在压力0.07 MPa、温度100 ℃、时间60 min条件下的蒸制五味子五味子醇甲含量较高。

另外除醋制、酒制五味子的工艺研究外逄世峰等[6]以五味子醇甲和五味子醇乙含量为评价指标通过正交试验法确定五味子盐炙最佳工艺为加盐1%、闷润1 h、炒制80 s，该工艺稳定可行,重现性好。

2 五味子炮制品的主要化学成分

五味子含有多种化学成分。其中木脂素类成分主要存在于种子中总含量为2%～8%，有150多种，以联苯环辛二烯类为主要骨架，包含五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酚等。而有机酸类成分主要有酒石酸、苹果酸、柠檬酸等，并且五味子中总氨基酸含量较高、种类较多有16种。所含多糖类成分以鼠李糖、木糖、葡萄糖为主，总多糖含量约为11.98%(也有报道约为6.57%)。挥发油类成分以倍半萜类为主，含有α-依兰烯、γ-姜黄烯、β-雪松烯等。

对于五味子炮制品成分研究多与生品对照或各炮制品之间对照，所测成分也较为多种。周艳等[7]研究，与生品相比醋蒸法、酒蒸法、酒浸法、蜜炒法、蜜蒸法、清炒法、酒蜜蒸法、清蒸法的五味子中五味子醇甲、五味子甲素、戈米辛N、五味子乙素和五味子丙素的含量均有不同程度的提高，以酒浸法的炮制品中总木脂素含量最高。这与周进东等[8]研究五味子经醋制和酒制后与生品相比6种木脂素(五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素及五味子丙素)的含量均有所增加且酒制品中的含量高于或等于醋制品中的含量，与李海涛等[9]研究酒蒸和酒浸五味子中五味子醇甲、醇乙、甲素、乙素等木脂素类成分含量和溶出率均最高，与初洪波等[10]研究的醋制、酒蒸等不同手段均可明显提高炮制品中五味子醇甲含量，与白晶等[11]研究得到的生品、醋制、酒制、蜜制五味子中酒五味子所含木脂素含量最高基本一致。除此之外逄世峰等[12]研究蜜炙和酒炙五味子的木脂素类成分含量和溶出率有不同程度的提高，醋五味子只有五味子乙素含量增加其余木脂素含量均减少。

在关注酒制五味子成分的同时学者对醋制五味子的成分同样关注，学者研究表明五味子醋制后木脂素总含量(1.05%～1.36%)比炮制前的 (0.98%～1.29%)升高 ,但木脂素类成分的组成及含有量无明显差异。[13]黑龙江产地的6种木脂素成分总量最高，同时发现醋五味子木脂素成分中五味子醇甲含量最高，但其他成分也不低。[14]辽宁产的五味子药材中木脂素类物质含量最高，黑龙江产的含量较低。这可能与地域气候、采收时节有关； 醋五味子中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素的含量较生品均有减少，其中以五味子醇乙的含量减少最显著(减少约1/3)[15]。

在对五味子不同炮制品木脂素成分测定的同时，有学者也对其他成分进行了测定。有机酸测定：与生五味子比较醋五味子、酒五味子中原儿茶酸和柠檬酸含量均降低[16]；五味子清蒸、醋蒸和蜜蒸与生品比较柠檬酸的含量均明显减少、L-苹果酸的含量变化不大、5-羟甲基糠醛从无到有，其中蜜蒸五味子的含量增加最明显[17]；陈昌利等[18]研究发现蜜蒸五味子的总有机酸含量为9.27%比生五味子总有机酸含量13.76%有所下降，因此该作者认为有机酸类作为五味子饮片的主要成分之一，应纳入其饮片的质量评价指标。5-HMF测定：醋五味子、酒五味子和蜜炒五味子随炮制时间的延长及炮制温度的升高五味子中5-HMF含量明显增加，并且5-HMF含量随蜜用量增加逐渐升高、随酒和醋用量的增加而逐渐降低[19]。挥发油测定：韩红祥等[20]利用气相色谱-质谱联用技术测得五味子生品、醋五味子、酒五味子和蜜炒五味子的挥发油得率分别是1.66%、1.50%、1.40%和 1.34%；从各挥发油中分别检出 46种、49 种、48 种和50种。重金属测定：在五味子及醋制、酒制、蜜制、蒸制品中中铅含量均降低、汞含量均升高、镉含量仅在酒制品中升高、砷仅在酒制品中被检测到、铜含量无明显变化未超出标准限度[21]。黄酮类测定：炮制对五味子中总黄酮、总三萜、水溶性总蛋白含量均有影响，总黄酮、水溶性总蛋白含量为五味子>酒五味子>醋五味子，总三萜含量为醋五味子>五味子>酒五味子。[22]多糖测定：醋五味子总多糖较生五味子含量下降了9.46%[23]。

学者除对五味子炮制品成分含量变化研究外，还进行了炮制后可能出现的新成分及复方中用不同炮制品对其成分的影响也进行了研究。李林福等[24]从五味子酒制品中分离并鉴定了2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4氢-吡喃-4-酮、3,5-二羟基-2-甲基-4氢-吡喃-4-酮、5-羟甲基糠醛、五味子甲素、β-谷甾醇，schisdilactoneH、丁二酸、麦芽酚等8个化合物。陈佩东等[25]应用柱色谱法分离、核磁共振等波谱鉴定化学结构，从醋蒸五味子中得到除五味子醇甲外的南五味子乙素、β-谷甾醇、狼毒甲素、(NH) 2-羟基喹啉-4-羟酸(Ⅴ) 4个化合物。苏联麟等[26]采用UPLC-Q/TOF-MS解析生、醋五味子饮片中主要的木脂素类成分，五味子醋制前后其化学成分发生了一系列复杂的变化，经研究分析确定五味子乙素和5-羟甲基糠醛可作为五味子醋制前后代表性的潜在质量标志物。高慧等[27]以五味子醇甲、芍药苷的含量为指标，比较生五味子、酒五味子对小青龙汤复方化学成分的影响，用酒五味子比用生五味子的小青龙汤中五味子醇甲、芍药苷的含量略有降低，分别为0.0502%、0.0146%。

3 五味子炮制品药理作用

五味子及其炮制品具有多种药理活性，以往保肝作用研究较多，但近年来其药理作用研究有所延伸，其中包括降糖作用：五味子及其炮制品对α-葡萄糖苷酶的抑制作用随着提取溶剂极性的增大而增强，并且醋制的正丁醇和水提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性要明显强于蒸制提取物[28]。五味子醋制后降低糖化血红蛋白含量优于生五味子，但对血清胰岛素未见显著抑制作用[29]。虽然生五味子、醋五味子均表现出明显的降血糖作用，但作用趋势存在显著差异[30]。 醋蒸、酒蒸、蜜炙及生药北五味子乙醇提取物均可降低糖尿病大鼠血糖、血脂水平，有明显抗氧化应激作用，而醋蒸炮制下北五味子乙醇提取物作用更好[31]。调节免疫作用：五味子均能不同程度促进未活化脾淋巴细胞及Con A和LPS诱导的T,B淋巴细胞的增殖，同等剂量下酒五味子增殖效果最佳，优于生五味子、醋五味子[32]。五味子不同炮制品可改善肾阴虚、肾阳虚小鼠激素水平，增加脏器指数，其中酒制品作用最好[33-34]。含酒五味子的五子衍宗丸、六味丸对肾阳虚、肾阴虚小鼠的激素水平、脏器指数改善作用优于含生五味子的复方[35]。

4 结语

五味子从古至今应用具有上千年的历史，充分证明了其临床疗效的优越性和研究开发的价值重要性。五味子含有上百种化学成分、众多活性成分，使其具有保肝、降糖、抑菌、抗肿瘤、调节免疫、抑制过敏性哮喘、抑制胃肠推进等多种药理作用，并且多种不同的炮制方法又使多种成分及药理作用发生变化。今后，在以往研究基础之上，随着先进的研究方法及仪器设备不断出现，对五味子的药理作用及活性成分将越来越多的被发现，在中医药理论的指导下五味子的临床应用越来越广泛，疗效逐步提升，同时以五味子为原料开发的新产品将逐渐增多。