王世旗,胡欢鑫,阮坤祥,田克恭
(1.普莱柯生物工程股份有限公司,河南 洛阳 471000;2.国家兽用药品工程技术研究中心,河南 洛阳 471000)
1990年在加拿大首次报道了猪圆环病毒病,它是由猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)感染引起,随后在美国、中国和其他国家的猪群中陆续发生[1],严重影响了全世界生猪生产。病毒分类学上,PCV2属于圆环病毒科[2],近年来发现PCV3与猪皮炎肾病综合征以及繁殖障碍等有关[3]。
由PCV2开放阅读框2编码的PCV2衣壳蛋白能够自组装成病毒样颗粒(virus-like particle,VLP),类似于天然PCV2病毒粒子的二十面体[4]。血清学检测结果表明,使用体外组装的PCV2 VLP免疫仔猪后,在仔猪体内产生的高滴度中和抗体可为仔猪提供强大的免疫保护,使其免受同源基因型PCV2的感染[5]。已有研究表明,由PCV2衣壳蛋白自组装成的VLP基因工程疫苗较全病毒灭活疫苗具有更好的预防效果[6, 7]。PCV2基因工程亚单位疫苗圆柯欣由PCV2 VLP组装而成,蛋白纯度高,辅以水佐剂用于免疫。
在临床生产中,为研究圆柯欣免疫后的安全性和对生产性能的影响,本研究将圆柯欣单次免疫和将全病毒灭活疫苗进行常规两次免疫,之后评估猪群在这两种免疫方式下的应激率(包括:呕吐、发烧、死亡、精神沉郁、不食)、死淘率(包括保育和育肥阶段试验猪的死亡与淘汰)和日增重指标(保育猪和育肥猪),旨在为养殖场PCV2疫苗的选择和免疫程序的优化提供依据。
PCV2基因工程疫苗(圆柯欣,250 mL/瓶)和PCV2灭活疫苗(圆健,250 mL/瓶)均由普莱柯生物工程股份有限公司提供。
本试验在国内6个猪场进行(河南开封、河南洛阳、湖北安陆、山东寿光、福建龙岩和四川绵阳,以下标记为猪场A、B、C、D、E和F)。共选取14~19日龄待免疫仔猪20770头,分为组1和组2,组1为猪圆环病毒2型基因工程疫苗(圆柯欣)免疫组,共13680头;组2为猪圆环病毒2型灭活疫苗(圆健)免疫组,共7090头。
本试验中,圆柯欣疫苗对单次免疫进行评价,圆健疫苗以两次免疫进行评价。圆柯欣和圆健疫苗免疫的试验猪来源和数量如表1所示。组1试验猪每头免疫PCV2亚单位疫苗圆柯欣1.0 mL,颈部肌肉注射。组2试验猪每头免疫PCV2全病毒灭活疫苗1.0 mL,颈部肌肉注射,间隔2周后进行二次免疫。
表1 试验猪来源与免疫数量
本试验所采集数据包括:试验猪在试验期的免疫应激率、死淘率、日增重,并对圆柯欣和圆健免疫组的组间数据进行对比分析。
数据采集时间自免疫后开始计算(开始统计免疫应激情况、死淘率和日增重),至保育结束(部分试验只涉及保育阶段)或者育肥猪出栏(部分试验只涉及育肥阶段)为止。
如表2所示,圆柯欣免疫组只有1头仔猪出现应激,应激率为0.0073%,明显低于全病毒灭活疫苗免疫组的应激率(0.212%,共15头仔猪出现应激反应),安全性良好。
表2 免疫后应激率统计
死淘率包括猪群在保育和育肥这两个阶段的试验猪死亡率和未死亡带来的淘汰率。本试验中,如表3所示,圆柯欣免疫组死淘率为2.12%,低于全病毒灭活疫苗免疫组3.31%的死淘率。
表3 免疫后死淘率统计
从日增重方面来看,如表4所示,在统计的保育猪中,圆柯欣免疫组仔猪平均日增重(342克),较全病毒灭活疫苗免疫组平均日增重(317克)增加25克。另外,在统计的育肥猪中,圆柯欣免疫组仔猪平均日增重(1985克),较全病毒灭活疫苗免疫组平均日增重(1968克)增加17克,经济效益明显。
表4 免疫后日增重指标统计
PCV2衣壳蛋白可组装成VLP[8],圆柯欣即由大肠杆菌表达系统表达的PCV2衣壳蛋白组装成的VLP制备而成。衣壳蛋白是PCV2的主要免疫原性蛋白,刺激机体产生免疫反应[5],从而达到保护动物免受PCV2感染的目的。基于PCV2衣壳蛋白构建而成的亚单位疫苗成分纯度高,较全病毒灭活疫苗而言,免疫成分更单一纯净,安全性更高。
在整个试验期间,从免疫应激和死淘率方面来看,圆柯欣免疫组应激率仅为0.0073%,明显低于全病毒灭活疫苗免疫组的应激率,表明其具有良好安全性,且同时具有较全病毒灭活疫苗免疫组更低的死淘率,这可为猪场带来明显的经济效益。从平均日增重来看,在疫苗免疫后,无论是保育期间还是保育转育肥期间,圆柯欣免疫组比全病毒灭活疫苗免疫组平均日增重均显著增加,此可为猪场带来巨大收益,圆柯欣的使用可具有较高的投入产出比。
已有研究表明,免疫PCV2疫苗能够增强猪瘟疫苗的免疫效果[9],这两种疫苗联合免疫可产生针对两种病原的免疫抗体[10]。PCV2疫苗与猪肺炎支原体疫苗联合免疫具有与两种疫苗单独免疫相同的效果[11]。圆柯欣也同样适合联合免疫,如联合猪瘟活疫苗和猪肺炎支原体灭活疫苗的三疫苗一次性注射联合免疫,各疫苗的免疫效力均不受影响[12, 13]。联合免疫的应用在非洲猪瘟威胁下实用性强,可减少动物接触和应激,从而降低发病风险,并转化为实际经济效益。