保定地区羔羊大肠杆菌病的流行病学调查与治疗

张 婷，李金贵，刘茂军，郑世学，马玉忠*

（1.河北农业大学 动物医学院，河北 保定 071001；2.扬州大学 兽医学院，江苏 扬州 225009；3.江苏省农业科学院，江苏 南京 210014）

羔羊大肠杆菌病是一种常见病，传染性强，致死率较高[1]。保定是全国育肥羊养殖规模较大的地区，年出栏量约为600万只。近期羔羊腹泻频发，根据临床症状，初步判定为大肠杆菌感染。本文对保定周边县（区）规模养殖场6家，唐县2家、徐水区1家、易县1家、曲阳县1家、满城县1家进行流行病学调查，并对大肠杆菌进行分离鉴别，用敏感药物进行治疗试验，以便为该地区羔羊大肠杆菌病的预防和临床诊治提供参考。

1 材料与方法

1.1 流行病学调查

采取走访调查、就诊统计形式，记录保定地区的患病羊场的发病情况。从发病的季节、发病羊的年龄这两个因素，分析保定地区大肠杆菌病的流行情况。

1.2 病料采集与分离培养

保定患病羔羊，采集心、肺、肝、脾、肾、肛门拭子等。进行细菌分离，将分离后的菌分别使用麦康凯培养基、血琼脂培养基进行鉴别，接种后置于37℃恒温培养12～18 h，观察记录菌落生长情况和形态。将麦康凯中培养基的红色单菌落，接种至伊红美蓝培养基。革兰氏染色后，在显微镜下观察细菌形态。

1.3 MALDI质谱鉴定

将分离出的疑似大肠杆菌经MALDI-TOF检测，使用Bruker Daltonik MALDI-TyperTM微生物鉴定系统，对检测菌株进行系统匹配并评分。

1.4 治疗

根据药敏试验和生产中的实际需求，本试验采用新霉素进行分组治疗，共分为4组：A组10只健康羊；B组患病羊10只，采用敏感抗生素进行治疗；C组患病羊10只，使用白头翁散进行治疗；D组为患病羊10只不给药。

记录治疗0 d、3 d、7 d的体温、腹泻情况、饮食情况。通过使用统计学软件SPSS分析体温变化、血常规变化，计算治愈率。

治愈率=（治愈数/总数）×100%

2 结果

2.1 发病情况

根据羔羊大肠杆菌病的发病情况（见表1），患病羊共1 870只，总发病率29.22 %（1 870/6 399），总死亡率为13.71%（877/6 399）。根据发病季节来看，夏季是一年中最易发病的季节，占总发病的44.17%（826/1 870），发病高峰期集中在7、8月份；春季次之，发病率为28.34%（530/1 870）；秋季和冬季的发病率分别为12.14%（227/1 870）和15.35%（287/1 870）。分别对2～4周龄、4～8周龄、9周龄的患病羔羊进行发病统计，2～4周龄羔羊发病率为20.75%（388/1 870），4～8周龄的羔羊发病数最多，发病率高达76.79%（1 436/1 870），9周龄以上的羊发病率较低，发病率为2.46%（46/1 870）。

表1 保定地区各养殖场发病情况

2.2 临床症状与病理变化

患病羔羊临床表现最明显的特征为腹泻，初期排出黄绿色或褐色的粥样便。患病羔羊有体温升高症状，严重的可能会出现全身皮肤发红。会出现咳嗽、呼吸困难的呼吸道症状。站立困难，有时会长时间坐卧不起，精神和食欲都会下降，眼眶凹陷。

表2 临床指标（n=10）

剖检腹泻严重濒死的病羊，可见腹部皮下水肿。皱胃黏膜出血，消化不完全，可见乳凝块；肠管水肿、出血，肠管内充气，腹腔有积液。

2.3 分离鉴定

血琼脂培养基中有菌落生长，未见溶血；麦康凯培养基中可见规则的红色圆形菌落，边缘规则，表面光滑；伊红美蓝培养基中长出紫黑色菌落，周围伴有绿色金属光泽。革兰氏染色镜检，可见阴性短杆菌，两端钝圆、颜色略微深。对疑似大肠杆菌进行MALDI检测，与大肠杆菌同源性进行匹配评分，确定检测菌株为大肠杆菌。

2.4 治疗

选取敏感抗生素新霉素进行治疗。治疗0 d、3 d、7 d的临床指标如表2，3 d时，B组体温、WBC均降低，C组恢复较慢，新霉素治疗的见效时间更短。经7 d治疗，B组体温、WBC与A组无差异，与D组差异极显著，治愈率为80%；C组的体温和WBC与A组无差异，与D组有显著差异，治愈率为80%；在这7 d中，B组、C组未出现患病羊的死亡，D组共有3只羊病死。B组、C组在7 d的治愈率相同，这两种药对大肠杆菌病的治疗都有明显效果。

3 讨论

大肠杆菌是肠道中常见菌，但致病性大肠杆菌可引起机体发病，对畜牧养殖业造成了很大的危害[2]。羊的养殖在畜牧业中占有很大比例，因此，对羔羊的大肠杆菌病的防控和大肠杆菌的检测有很大的意义[3,4]。本试验通过对保定地区大肠杆菌病的流行情况调查，为养殖业提供帮助，以减少大肠杆菌病带来的损失。

保定地区的羔羊大肠杆菌病散在发生，在唐县、徐水区、易县、曲阳县、满城县这些地区，一年四季都有发病。在保定地区的养殖场中，唐县的肉羊养殖规模较大，因此造成了相对较为严重的传播，大肠杆菌病的发病率在本次调查中最高。因此，需要加强防范，注重改善饲养条件和日常消毒。保定地区的四季特点明显，冬季寒冷干燥，夏季较热。虽然一年内均有羔羊感染大肠杆菌，但是发病的季节性明显，进入春季后发病率开始上升，夏季为高发季节，入秋之后发病趋势减缓，冬季、秋季发病较少。这一结果与栗子明[5]的研究结果相似。由此看来，需提前做好预防措施，保定地区夏季炎热，是羔羊大肠杆菌病的发病高峰期，可以在春季对畜舍进行彻底的消毒，大肠杆菌对一般的消毒剂都比较敏感。还可通过饲喂微生物制剂等，使羔羊的免疫能力提高。

大肠杆菌可根据溶血能力分为可溶血性和不溶血性2种[6]，王显峰[7]分离的羊源性大肠杆菌在鲜血琼脂培养基中出现了β溶血。本试验中的鲜血琼脂培养基均未出现溶血现象，说明本试验分离的为不溶血型大肠杆菌。本试验使用的MALDI-TOF鉴定大肠杆菌，在临床上对病原菌的鉴别更佳准确、便捷[8]。

本试验筛选出的敏感药物有：多粘菌素B、新霉素等，考虑到规模性养殖场的用药成本，本试验选择了敏感性较高且成本相对较低的新霉素。经过7 d的治疗，白头翁散、新霉素对羔羊大肠杆菌病均能有效治疗，新霉素的见效时间更快。相比于其他研究，本试验经过流行病学调查对保定的大肠杆菌发病特点有所了解，治疗方案更佳接近生产实际。所选取的抗生素，是经药敏试验筛出的敏感药物，更有针对性的用于该地区的大肠杆菌病治疗，且用药成本低。使用的白头翁散，既保留了白头翁对大肠杆菌的抑菌性，同时使用方便，易于在临床中给药。