娜日苏 董雨萌
(1.内蒙古农业大学草原与资源环境学院,内蒙古呼和浩特010011;2.植物学国家级实验教学示范中心,内蒙古呼和浩特010011)
21世纪初欧盟禁止饲用抗生素利用以来,国内在猪、鸡、羊的养殖中以中药代替抗生素的研究增多[1-4],但中草药生产上广泛应用还存在问题[5]。2020年我国开始全面禁止饲用抗生素的应用,因此,天然植物性饲料添加剂的需求也来越多大,传统民族药物代替饲用抗生素的研究成为热点,肉羊饲喂中的中草药饲料添加剂利用研究也不少[6-7]。同时,蒙古族的传统蒙药作为饲用添加剂利用研究也有报道,如恩克奥恩等[8]研究发现蒙药材饲料添加剂对羔羊有显著的增重效果;蒙药植物的抑菌效果及提高家畜免疫活性等作用方面也有很多报道,根据战永波[9]报道,大部分蒙药植物具有良好的抑菌作用,还可以提高机体非特异性免疫功能;乌日娜等[10]研究表明,蒙药复方对大肠杆菌具有良好的体内外抑菌效果;胡海等[11]研究发现,蒙药复方丹参制剂可以提高小鼠免疫功能。
苦参(Sophora flavescens Ait.)是一种豆科槐属植物。其根入中药,用于清热除湿、祛风杀虫、抑制皮肤真菌等。苦参为蒙医最常用的药用植物之一,其根用于抗炎、抗病毒、保肝、调血脂等,主要化学成分有苦参碱、槐定碱等多种生物碱[12]。在民间,蒙古族牧民利用苦参单剂治疗家畜感冒和瘟疫。前人研究表明,苦参做饲料添加剂对育肥猪有增重效果[13],也能防止鸡的疾病[14],可见,苦参有抑菌效果并能提高饲养动物的生长性能。但是,前期研究中,还未发现苦参代替饲用抗生素在肉羊生长中的研究报道。因此,本研究以肉羊为饲养动物,分别饲喂苦参提取液和饲用抗生素,从生长性能、免疫功能、抗菌能力三个方面对饲养效果进行比较,明确苦参替代饲用抗生素用于肉羊饲养中的应用效果,为提高饲料安全、民众健康服务。传统资源利用方式用于现代化养殖业,把文化资源变成经济资源,也有利于地区发展。
试验地点位于宁夏回族自治区吴忠市盐池县。选取3 月龄、体重18 kg 左右、生长发育正常、健康的滩羊20 只,随机分为4 组,每组5 只。试验前驱虫并注射疫苗。
苦参购于自内蒙古呼和浩特市赛罕区国大药房。100 g 苦参用200 mL 纯化水浸泡24 h,煎熬30 min,过滤,再加100 mL 纯化水煎熬30 min,再过滤,两次取得的液体混合后煎熬至100 mL,制成100%苦参提取液。
试验用抗生素为30%金霉素预混剂,内蒙古正大饲料公司提供。
采用单因素试验设计,将20 只肉羊分为4 组,即对照组(CK)、抗生素组、苦参1组、苦参2组。对照组饲喂基础日粮(TMR),饲喂量见表1。抗生素组在基础日粮(TMR)里添加175 mg/kg 金霉素预混剂;苦参1 组、苦参2组分别添加基础日粮鲜重1%的苦参提取液和2%的苦参提取液。对照组、苦参1 组加相应量的纯净水使各组添加液体量相等。预试期为7 d,正试期为14 d。基础日粮的组成及营养成分参照国家肉羊饲喂标准《NY T 816—2004》配置,见表2。
表1 供试肉羊的基础日粮饲喂量
表2 供试肉羊的基础日粮(TMR)组成
供试肉羊采取小组舍饲管理,每5 只一栏,每次饲喂前打扫饲槽,每天8:00 和16:00 进行饲喂,自由饮水。
1.4.1 生长性能
分别在正试期第0 d和第14 d,于清晨6:00进行空腹称重,计算供试肉羊的平均日增重和总增重。
平均日增重=(试验结束体重-试验开始体重)/试验天数
1.4.2 免疫功能参数
在正试期最后1 d,于清晨6:00进行空腹颈静脉采血5 mL,后置于离心机中离心(3 000 r/min,12 min),分离血清至1.5 mL 离心管中冷冻,带回内蒙古农业大学兽医学院,用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产的免疫球蛋白测试试剂盒检测血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A等指标。
1.4.3 抗菌能力
正饲期第0 d 和第14 d,分别采集供试肉羊的粪便进行冷冻,带回实验室,样品稀释到最佳浓度后接种到LB培养基上,厌氧培养48 h后计数,统计。
用SPSS软件的单因素方差分析程序对试验数据进行方差分析和多重比较,并检验其显著性,数据结果均以“平均值±标准差”的形式表示。
表3 不同处理对肉羊生长性能的影响(kg)
由表3 可知,经过14 d 的饲喂对照组、抗生素组、苦参1 组、苦参2 组的平均总增重(末重减去始重的平均值)各组之间无显著性差异(P>0.05);日增重各组之间无显著性差异(P>0.05)。
表4 不同处理对肉羊免疫功能的影响
由表4 可知,血清中IgG、IgA 含量各组间无显著性差异(P>0.05);与对照组相比,苦参1组的IgM显著性增加(P<0.05)。
可见,添加1%含量苦参显著提高了IgM 含量;且具有提高IgG 的趋势,效果均优于抗生素组和苦参2组。
表5 正试前后肉羊粪便中大肠杆菌的数量对比(菌落数单位:×105 CFU/g)
由表5 可知,正试前,试验组的粪便中大肠杆菌数量与对照没有显著差异;正试结束后,试验组的粪便中大肠杆菌数量均减少,且有显著差异(P<0.05);正试前后大肠杆菌减少的幅度苦参1 组最大,苦参1 组和苦参2组减少的幅度大于抗生素组。
可知,添加1%和2%苦参添加剂能够提高肉羊的肠道抑菌能力,而且效果优于抗生素。
在试验期间,通过对肉羊的采食量、外观表象及粪便的状态等反映健康状况的指标进行观察,发现供试肉羊行为均无异常,也无腹泻、呕吐等症状的产生。结合前人研究及民间利用等判断,苦参没有明显的毒害作用,为安全的饲料添加剂。
本试验研究结果显示,抗生素组、两种浓度苦参组均显示了增重的趋势, 但无显著差异。分析原因,抗生素可以有效抑制有害菌的生长,利于动物生长;添加苦参提取液可以抑制有害菌的繁殖,其苦味可以健胃,促进食欲,有助于营养成分的吸收,从而产生了增重的效果[13-14]。但本试验可能由于试验周期较短,添加剂的饲喂效果尚未出现显著变化。
免疫球蛋白是机体免疫系统的一个重要组成部分,具有抗菌、抗病毒和中和毒素的功能,其浓度升高会增强机体的免疫功能[15]。IgG在血液中的含量最高,是动物机体感染免疫的主力军;IgM 是最早产生的抗体,在机体的早期防御中起着重要作用;IgA是外分泌液中主要的免疫球蛋白。本试验结果显示,抗生素组肉羊血清中IgG、IgA 含量具有降低趋势,而IgM含量具有增加趋势,原因是抗生素还具有一定的免疫作用[16];苦参1组显著增加IgM含量,具有增加肉羊血清中IgG 含量、降低IgA 含量的趋势,但效果不显著;苦参2组肉羊血清中IgG含量无显著变化,IgM含量有增加趋势,IgA含量有降低趋势。综上所述,苦参对肉羊血清中IgG、IgM含量的生成具有促进作用,表明苦参能够提高肉羊的免疫力,这可能是苦参中的活性成分促进了免疫因子的产生,进而提高机体的免疫力。前人研究指出苦参素通过体液免疫、细胞免疫及与免疫相关的信号通路改善免疫性[17]。添加2%苦参提取物能够降低粪便中大肠杆菌数量,这与苦参的传统药用利用知识和前人研究相符[12-14]。粪便中大肠杆菌数量,苦参2组的效果优于抗生素组,分析原因,苦参本身具有抑菌能力的同时,如上所述能够提高机体的免疫力,从而达到抑菌效果,为双重影响的结果,这正是天然植物添加剂的优点。
近年来苦参的人工种植面积不断增加。市场价格为7~10 元/kg,按日粮的1%计算,饲喂60 d 需增加7~10 元/只的苦参原料费。苦参的药用部位是根,地上部位是非药用部位,但是也含有苦参碱等有效成分,具有良好的普及推广前景。
本试验研究苦参提取物替代抗生素对肉羊的生长性能、血清免疫球蛋白、粪便中大肠杆菌数量的影响,结果发现添加1%苦参显著提高了IgM含量,苦参添加组肉羊的抗菌能力均显著提高,并且苦参组优于抗生素组,1%苦参组优于2%苦参组。总之,1%苦参提取物替代饲用抗生素的效果良好,可提高肉羊免疫功能和抗菌能力。