邢 昕,许金鹏,王爱华
安徽中医药大学第一附属医院检验中心输血科,安徽合肥 230000
输血前血型鉴定试验常规要求ABO定型必须同时做正定型和反定型,正、反定型不一致时,常提示标本为疑难血型[1]。对于ABO正、反定型不一致的疑难血型标本,医院输血科或血库工作人员常常是求助于试剂充足、设备完善及经验丰富的血站血型参比实验室,但日常工作中,输血科工作人员可以结合临床资料,尤其是临床检验结果,对正、反定型不一致的原因做出合理的解释,根据检验异常指标有针对性地处理标本干扰,从而正确判定血型。现将3例疑难血型鉴定过程报道如下。
患者1:女,49岁,在无明显诱因下出现双下肢水肿,就诊于当地诊所,查尿常规显示尿蛋白2+。后水肿进行性加重,伴活动后胸闷、乏力及肉眼血尿,就诊于本院,查血常规血红蛋白(Hb)41 g/L,无既往病史。为纠正贫血,送检血型,结果显示,正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集为AB型Rh(D)阳性,反定型A1细胞、B细胞全凝集为O型,不规则抗体筛检阳性。
患者2:男,52岁,反复上腹部胀痛7个月余,于外院检查结果显示,肝功能异常,高尿酸血症及蛋白尿,全腹部CT示双侧胸腔积液。对症处理后未见明显好转,遂就诊于本院,查体见贫血貌,双下肢水肿;查血常规显示Hb 51 g/L,无既往病史。为纠正贫血,送检血型,结果:正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集为AB型Rh(D)阳性,反定型A1细胞、B细胞全凝集为O型,不规则抗体筛检阴性。
患者3:男,79岁,2年前因“胸闷20 d,发热1 d”在外院确诊恶性淋巴瘤,定期化疗复查。4 d前出现胸闷气喘,咳嗽咳痰及低热,就诊于本院,查血常规显示Hb 55g/L,既往有输血史。为纠正贫血,送检血型,结果显示,正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集为AB型Rh(D)阳性,反定型A1细胞、B细胞全凝集为O型,不规则抗体筛检阴性。
2.1正反定型结果不一致 3份患者标本试管法血型血清学结果均为:正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集为AB型Rh(D)阳性,反定型A1细胞、B细胞全凝集为O型,见表1。
2.2结合临床异常指标最终血型鉴定结果
2.2.1患者1血型鉴定结果 患者1生化和免疫自身抗体检测结果见图1,直接抗人球蛋白(GLO)试验(DAT)阳性,56 ℃热放散处理,盐水试管法血型鉴定为O型Rh(D)阳性,见表2。
表1 3份标本血型鉴定及不规则抗体鉴定结果
图1 患者1生化和免疫自身抗体检测结果
表2 患者1处理前、后试管法血型鉴定结果
2.2.2患者2血型鉴定结果 患者2生化检测结果见图2,GLO明显增高,清蛋白/球蛋白(A/G)比例倒置,盐水稀释法后,血型鉴定为AB型Rh(D)阳性,见表3。
图2 患者2生化检验结果
2.2.3患者3血型鉴定结果 患者3血常规检测结果见图3,平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)异常增高,37 ℃水浴后血型鉴定为B型Rh(D)阳性,见表4。
图3 患者3血常规检验结果
表3 患者2处理前、后试管法血型鉴定结果
表4 患者3处理前、后试管法血型鉴定结果
疑难血型[1]是一种血型难以鉴定或判定的现象,在鉴定血型时,标本如果受多种因素干扰使结果难以判定,便呈现疑难血型现象。医院输血科或血库在遇到正、反定型不一致的疑难血型时,解决办法多为送检血液中心的血型参比实验室,造成工作人员缺乏思考和实验能力。在兰炯采等[2]提出的“疑难血型3步分析法”中,其中第2步为复习临床信息,从而设计针对性试验(第3步),作为掌握第一手临床资料的输血科或血库,亦可以根据实验室异常检验结果,分析标本本身的特殊性,进而解释正、反定型不一致的原因,并正确鉴定血型。
本文中3例患者的正、反定型不一致标本均为正定型抗-A、抗-B及抗-D全凝集为AB型Rh(D)阳性,反定型A1细胞、B细胞全凝集为O型,查阅临床相关实验结果,3例标本影响因素各不相同,采用不同的试验方法处理后,血型结果也完全不同。
患者1因“双下肢水肿原因待查”入院,DAT抗-IgG强阳性,不规则抗体阳性,乳酸脱氢酶(LDH)和间接胆红素(IBIL)水平升高,查阅自身抗体检测结果:免疫荧光法均质型滴度1∶1 000,抗干燥综合征A抗体(抗SSA),抗核糖体P蛋白抗体(抗RPP)阳性等,自身抗体阳性伴DAT阳性的疾病多见于自身免疫性疾病[3-4],其中DAT是诊断自身免疫性溶血性贫血的重要依据[5];正定型全凝集,反定型O细胞不凝集,考虑为自身抗体被吸附在自身红细胞上干扰正定型,需通过放散试验来处理红细胞[6]。56 ℃热放散处理10 min后,正、反定型一致,镜下无凝集,血型鉴定为O型Rh(D)阳性。患者2因“上腹部胀痛”入院,DAT和不规则抗体都为阴性,反定型A1细胞、B细胞和O细胞都有凝集,镜下观察可见红细胞缗钱状排列,查阅生化结果可见GLO明显增高,A/G比例倒置,考虑该病例血型正、反定型不符应该是患者血清中球蛋白水平异常增高,引起反定型红细胞在盐水介质中相互粘连而呈现缗钱状凝集,使用盐水稀释法处理反定型后[7-8],正、反定型一致,血型鉴定为AB型Rh(D)阳性。第3例患者恶性淋巴瘤确诊2年余,血常规原始结果可见MCHC异常增高,红细胞计数、Hb、平均红细胞血红蛋白含量和MCHC明显矛盾[9],观察血液标本试管壁呈细沙状,首先考虑到的是冷凝集素的影响,冷凝集素是一种冷反应型抗红细胞抗体,多为IgM 抗体,健康人血清中水平和效价均低,在某些病理情况下如淋巴系统恶性肿瘤、病毒感染、支原体肺炎和传染性单核细胞增多症等[10],患者体内的冷凝集素效价会增高;低效价冷凝集放置37 ℃可排除干扰,高效价冷凝集正定型用温盐水反复洗涤自身细胞,反定型用O型红细胞反复吸收自身抗体,以消除干扰[11-12]。本病例(患者3)中标本37 ℃水浴5 min后立即鉴定,正、反定型一致,镜下无凝集,血型为B型Rh(D)阳性。
ABO血型鉴定是输血科(血库)最基本也是最重要的一项工作,遇到疑难血型时,工作人员不应盲目的依赖于血型参比实验室,应充分利用临床资料和检验结果的线索作用,分析干扰因素,设计试验方法。只有通过平时工作中的不断学习积累,疑难血型鉴定和输血就不会成为困扰输血科(血库)的难题。