气相色谱-质谱法检测添加在饼干、巧克力、糖果中的△9-四氢大麻酚成分

张启福 邹晓莉 胡书豪 康 伦

①四川大学华西公共卫生学院 ②四川鼎诚司法鉴定中心 ③成都海关缉私局

本文建立了检测饼干、巧克力、糖果中△9-四氢大麻酚成分的GC/MS分析方法。实验过程中优化了色谱条件，并对提取溶剂进行了考察。样本经溶剂提取离心后，采用DB-17MS毛细管色谱柱程序升温分离，EI离子源、全扫描模式（SCAN）进行检验。在线性范围内的相关系数R>0.999，方法检出限为0.15 μg/g，样品加标回收率为82%～105%。应用本方法成功检出了案件中目标成分，该方法适用于巧克力糖果等复杂食品基质中添加大麻成分的快速鉴定。

大麻有镇静和兴奋功能，在医学上可用作止痛剂，大麻中精神活性最强成分为△9-四氢大麻酚，吸入大麻后会引起心理变化，对时间、空间发生错觉，同时对机体的平衡功能发生损害，滥用严重者还会导致中毒性精神病的发生[1]。近年来，随着快递行业的快速发展，国际邮政服务的质量与效率显著提升，这不仅给人们的生活带来便利，也推动了国民经济的发展，同时贩毒人员深谙寄递企业的监管漏洞，采取匿名投递、虚实相间等方式大肆进行毒品走私贩卖活动[2]，但将毒品添加在食品中进行走私贩卖的情况较为少见，且添加在糖果、巧克力中后易流向青少年群体，对社会危害巨大。

已报到的检测△9-四氢大麻酚的方法有气相色谱质谱法、反相高效液相色谱法、液相色谱质谱法等[3-6]，上述报道中的方法检测对象主要为尿液、火麻食品等[7-8]。将毒品加入食品中更具有隐蔽性，而在复杂基质中进行毒品分析具有一定的挑战性。本文在方法[9]基础上，对色谱条件和样品前处理条件进行了优化，成功检出了△9-四氢大麻酚成分。

1 案例

1.1 简要案情

2018年，四川某海关驻邮局办事处对来自加拿大的SPS快递包裹查验时发现其中10个包裹异常。因办案需要，委托方委托我中心对送检检材（见图1）中是否含有△9-四氢大麻酚成分进行检验鉴定。

图1

1.2 现场初步勘察

海关人员在工作中发现邮包中疑似含有大麻成分的饼干、糖果及巧克力，随即依法扣留，抽样送检进一步确认。

2 材料与方法

2.1 主要仪器与试剂

气相色谱/质谱仪（GCMS-QP2020，SHIMADZU，日本）；△9-四氢大麻酚标准品（THC，纯度＞99%，Cerilliant公司），SKF525A（纯度＞99%，Aladdin公司），实验所用甲醇、乙醇、乙腈均为色谱纯，购自成都市科隆化学品有限公司。实验用水均为超纯水（18.2 MΩ·cm）。

2.2 溶液配制

精密称取SKF 525A对照品50.0 mg，用甲醇配成1.0 mg/mL的内标储备溶液，置于冰箱中冷冻保存，保存时间12个月。将内标储备液用甲醇稀释5倍，得200 μg/mL 的内标工作液，置于冰箱中冷藏保存，保存时间3个月。

2.3 色谱质谱条件

DB -17MS毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；流量控制方式为线速度（37.2 cm/sec），流速为1.0 mL/min；不分流进样；进样口温度250 ℃；柱温箱升温程序：起始温度为90℃，保持1.5 min，以25 ℃/min 升温至280 ℃，保持6 min。进样体积1 μL。采用EI 离子源（70 eV），离子源温度230 ℃，接口温度280 ℃，溶剂延迟3.5 min。采用全扫描模式（SCAN）进行定性，质量扫描范围40～500 amu；选择离子检测模式（SIM）进行定量：内标物质（SKF525A）的m/z分别为86、99，定量离子m/z为86；△9-四氢大麻酚的m/z分别为231、271、299、314,定量离子m/z为299。上述两种物质的标准溶液的色/质谱图见图2、图3。

图2 SKF525A标准溶液总离子流图和质谱图

图3 △9-四氢大麻酚标准溶液总离子流图和质谱图

2.4 样品快速前处理

样本充分研磨混匀，分别称取约20 mg待测样本，加入5 ml甲醇，加入内标工作液20 μL，震荡3 min，5000r离心1 min，取上清液进行检验，进样量1 μL。

2.5 标准曲线的绘制

用甲醇将△9-四氢大麻酚标准应用液稀释为0.50、1.0、5.0、10、20 μg/ml的系列标准溶液，各加20 μL内标工作液（200 ug/ml）。取1 μL进气相色谱分析。以待测物的质量浓度（μg/mL）为横坐标、待测物和内标峰的面积比值为纵坐标绘制标准曲线。

3 讨论

3.1 方法的优化

（1）色谱条件的优化。

为改进待测物分离、改善峰型和减少分析时间，参考文献[3]实验采用程序升温模式，多次实验得到升温程序为：起始温度为90 ℃，保持1.5 min，以25 ℃/min 的速率升温至280 ℃，保持5 min。该升温程序下待测物与样品杂质分离良好，基线平稳，在15 min内可完成整个分析。以分离度、峰型和分离时间为考察指标，优化了其余色谱条件，进样口温度考察范围为200 ℃～300℃，最佳条件为250 ℃；分流比考察范围为不分流～50:1，最佳条件为不分流。

（2）样品前处理的优化。

本方法用溶剂直接提取待测物中的△9-四氢大麻酚成分，实验对提取溶剂的种类和加入量进行了考察。针对△9-四氢大麻酚具有一定的极性这一特点，分别考察了甲醇、乙醇、乙腈三种溶剂对样品的溶解度以及乳化情况，结果表明三种溶剂均不易产生乳化现象，采用甲醇时△9-四氢大麻酚的溶出最好。因此实验选取甲醇作为溶剂，并在1 ml～10 ml的范围内考察了溶剂体积对待测物提取效率的影响。结果表明，随着提取溶剂体积的增加，待测物的提取效率逐渐增加，当提取溶解达到4 ml后，提取效率趋于稳定，实验采用5 ml甲醇作为提取溶剂。

3.2 方法学评价

（1）线性范围和检出限。

按照2.4步骤绘制标准曲线，△9-四氢大麻酚在0.50 μg/mL～20 μg/mL浓度范围内线性良好，相关系数r=0.9999；以3倍噪声对应的待测物浓度作为检出限，检出限为0.15 μg/g。

（2）精密度检验。

将待检巧克力样品称取8份，按照上述方法进行样品前处理和色谱质谱分析，用测得的△9-四氢大麻酚含量的相对标准偏差（relateive standard derivation，RSD）考察方法的精密度，RSD值为1.75%。

（3）样本加标回收率。

取案件中的糖果、巧克力、饼干检材各15份，其中3份用于测定本底，另外12份分别添加0.50 μg/mL、5.0 μg/ml和10.0 μg/mL的△9-四氢大麻酚标准，均按照本方法进行样品处理和色谱质谱测定，计算得到的加标回收率范围为82%～105%。

3.3 样本定性结果

10份样本中，1号、2号、4号、6号、8号为软糖果，3号、7号、9号为饼干，5号、10号为巧克力，除7号检材外，其余检材中均检出△9-四氢大麻酚成分，检验结果与警方调查结果相吻合。

4 结语

建立的GC/MS方法灵敏，分离度高、重现性好，成功的检测出了案件样本中△9-四氢大麻酚成分，适合巧克力糖果等复杂食品基质中添加大麻成分的快速鉴定。