血清白细胞介素-8、环氧化酶-2、血管内皮生长因子-A水平变化与三阴性乳腺癌患者术后复发的关系及临床意义

张露文

(焦作市第二人民医院 甲状腺乳腺外科，河南 焦作 454100)

三阴性乳腺癌的免疫组织化学检查孕激素受体(progesterone receptor，PR)、雌激素受体(estrogen receptor，ER)、原癌基因HER-2均为阴性，远处转移风险较高，预后较其他类型的乳腺癌差。乳腺癌发病呈年轻化，严重危害女性的身心健康。临床多采用手术切除病灶治疗，但癌细胞易脱落、游离，随着血液、淋巴液扩散，形成远端转移。研究发现，乳腺癌细胞增殖、凋亡与某些细胞因子密切关系，其中白细胞介素-8(interleukin-8，IL-8)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)、血管内皮生长因子-A(vascular endothelial growth factor-A，VEGF-A)在乳腺癌发生、发展过程中起重要作用[1-3]。本研究分析血清IL-8、COX-2、VEGF-A水平变化与三阴性乳腺癌患者术后复发的关系及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料将2017年3月至2018年9月焦作市第二人民医院收治的67例三阴性乳腺癌患者纳入乳腺癌组，将64例乳腺良性肿块患者纳入对照组。患者及家属均签署知情同意书。对照组：年龄22～46岁，平均(33.93±4.90)岁；体质量45～68 kg，平均(56.31±4.61)kg；良性肿块病程1.0～5.5 a，平均(3.24±1.11)a。乳腺癌组：年龄22～48岁，平均(34.81±5.19)岁；体质量45～67 kg，平均(55.82±5.07)kg；乳腺癌病程1.5～6.0 a，平均(3.51±0.99)a；国际抗癌联盟TNM分期Ⅰ期14例，Ⅱ期31例，Ⅲ期22例。两组年龄、体质量、病程比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经焦作市第二人民医院医学伦理委员会审批通过。

1.2 选取标准(1)纳入标准：①经病理学检查、免疫组织化学检查确诊为三阴性乳腺癌；②临床资料完整；③无手术与麻醉禁忌证，有手术治疗指征，能耐受手术者；④能正常交流者。(2)排除标准：①合并其他恶性肿瘤者；②严重心肺功能不全者；③合并其他免疫系统、血液系统疾病者；④严重精神、心理疾病致认知、语言功能障碍者；⑤妊娠期、哺乳期妇女；⑥有乳腺手术史或既往有乳腺肿块史者。

1.3 手术方法和病理检测两组术前均进行常规检查，均未发现转移灶。根据三阴性乳腺癌的临床分期，对乳腺癌组患者采取改良根治术、保乳术治疗。对照组患者接受微创手术切除肿块。术后由病理科对患者肿瘤大小、性质、淋巴结状态行病理检查。使用中性甲醛固定患者病理标本，石蜡包埋，然后连续切片4 μm厚，使用免疫组织化学染色SP法检测，严格按照说明书进行操作。以PBS代替一抗作阴性对照，已知阳性切片为表达阳性对照。IL-8阳性：连续选取20个高倍视野，光镜下细胞质见棕黄颗粒，阳性细胞数占比>25%。COX-2阳性：细胞质内或核膜有棕黄色颗粒，阳性细胞数占比(5个高倍视野)>5%。VEGF-A阳性：细胞质呈现棕黄色颗粒，选取4个视野，阳性细胞>10%。

1.4 观察指标分别于术前、术后3 d清晨抽取患者空腹静脉血5 mL，以3 000 r·min-1离心5～10 min，取上清液，-20 ℃保存，采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测COX-2、IL-8、VEGF-A水平。所用酶标仪来自美国MD公司，试剂盒来自上海依科赛生物制品有限公司，严格按照操作标准检测。统计乳腺癌组1 a内复发情况，并于1 a后再次检测乳腺癌组患者的血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平。

2 结果

2.1 血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平术前，乳腺癌组血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平高于对照组(P<0.05)；术后3 d，乳腺癌组血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；术后3 d，乳腺癌组血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平低于术前(P<0.05)；术后3 d，对照组血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平与术前比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组手术前后血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平比较

2.2 复发者与未复发者血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平术后1 a，乳腺癌组复发4例，未复发63例。术后3 d、术后1 a，复发者血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平高于未复发者(P<0.05)；复发者术后1 a血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平高于术后3 d(P<0.05)。见表2。

表2 复发者与未复发者术后3 d、术后1 a血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平比较

3 讨论

乳腺癌属于常见的恶性肿瘤，三阴性乳腺癌为其中一种分型。与其他类型的乳腺癌相比，三阴性乳腺癌远处转移率较高，主要表现为晚期阶段易出现肝转移、肺转移，影响患者的生存质量。三阴性乳腺癌的发生、进展受各种因素的影响，如细胞增殖、凋亡过程紊乱，或肿瘤周围微血管的形成。肿瘤细胞增殖、凋亡与机体某些细胞因子有重要联系。

三阴性乳腺癌浸润、转移的先决条件为血管新生。本研究结果显示，术前乳腺癌组血清COX-2、IL-8水平高于对照组，术后3 d乳腺癌组血清COX-2、IL-8水平低于术前。这表明三阴性乳腺癌患者体内血清COX-2、IL-8呈高表达状态，而手术切除癌组织后机体血清COX-2、IL-8水平降低，提示血清COX-2、IL-8可反映手术治疗效果。COX-2可刺激癌细胞增殖和血管生成，抑制宿主免疫功能，为肿瘤生长提供优势条件，增强癌细胞的侵袭力[4-5]。IL-8可与细胞表面趋化因子受体1(CXC-chemokine receptor-1，CXCR1)、趋化因子受体2(CXC-chemokine receptor-2，CXCR2)结合发挥生物学效应，而CXCR1、CXCR2存在于癌细胞和新生血管内皮细胞中，IL-8与CXCR1、CXCR2结合后能促进癌细胞增殖及血管生长[6]。除免疫抑制外，乳腺癌发生发展的另一关键为血管、淋巴管新生。VEGF-A为血管内皮细胞特异性有丝分裂原，可作用于血管内皮细胞，促进癌细胞增殖；提高血管通透性，导致血浆蛋白渗漏到血管外，形成纤维蛋白凝块，以此作为新生血管支持物。因此，VEGF-A反映了癌组织血管生成能力，是目前特异性最高、作用最强的血管调控因子。本研究结果显示，术前乳腺癌组血清VEGF-A水平高于对照组，术后3 d乳腺癌组血清VEGF-A水平低于术前。这表明VEGF-A参与三阴性乳腺癌的发生和进展过程。肿瘤的生长必须有新生血管形成为肿瘤细胞提供足够营养。随着癌细胞的分化，VEGF-A会呈现高表达，说明VEGF-A水平可提示患者预后情况[7-9]。本研究结果表明，三阴性乳腺癌术后复发者血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平可升高且处于持续升高状态，提示定期监测血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平有助于了解手术预后与肿瘤进展情况，预测复发风险。

三阴性乳腺癌患者手术前后血清COX-2、IL-8、VEGF-A变化显著，可据此判断手术效果。监测三阴性乳腺癌患者术后血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平有助于了解预后，预测复发风险。