气相色谱-质谱联用分析石菖蒲麸炒前后挥发性成分*

陈志琳，杜洪志，万宛若，李 玮

(贵州中医药大学，贵州 贵阳 550025)

石菖蒲来源于天南星科植物石菖蒲AcorustatarinowiiSchott 的干燥根茎。其味辛、苦，性温；归心、胃经；具有开窍豁痰、醒神益智、化湿开胃之功。用于治疗神昏癫痫、健忘失眠、耳鸣耳聋、脘痞不饥、禁口下痢等症[1]。石菖蒲主含挥发性成分及苯甲酸类、多糖等[2]。其挥发性成分主要为单贴、倍半萜、苯丙素等。其挥发性成分具有镇静、抗惊厥[3]，兴奋抗抑郁[4]，抗癫痫[5]，引药入脑[6]等药理作用。在传统中医临床中，石菖蒲是芳香宁神、涤痰开窍之要药，临床上多生用。

2005年版《贵州省中药饮片炮制规范》收载的石菖蒲的炮制方法为麸炒，麸炒之后能增强化湿开胃的作用[7]。中医理论认为，气味芳香的药物能化湿辟浊，振奋脾胃，石菖蒲挥发油具有特殊芳香之气，其挥发性成分可能为化湿开胃的主要药效成分，而麸炒石菖蒲炮制前后其挥发油成分如何发生变化，目前未见相关研究报道。为了探明石菖蒲麸炒前后挥发油成分的变化，本实验采用GC-MS联用技术，对石菖蒲麸炒前后挥发油成分进行分析，研究相关成分的量变和质变规律，拟为进一步优化炮制工艺，制定饮片质量标准，阐明麸炒炮制“增强化湿开胃”的作用机理奠定良好的研究基础。

1 仪器与材料

1.1 仪器

HP6890-5975C气相色谱质谱联用仪(美国安捷伦公司)；挥发油提取器；电子天平(型号：ML4002E，梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；电热鼓风干燥箱(型号：GZX-9140MBE，上海博讯实业有限公司医疗设备厂)等。

1.2 材料

实验用石菖蒲采自贵阳市百花湖，经贵州中医药大学孙庆文教授鉴定为天南星科植物石菖蒲 Acortw tatarinowii Schott 的干燥根茎。麸炒品为实验室自制。

2 方法

2.1 样品制备

2.1.1 生品饮片的制备

取石菖蒲适量除去杂质，洗净，润透，切厚片，于烘箱中40 ℃烘干，即得。

2.1.2 麸炒品的制备

取适量蜜麸于预热适中的炒制容器内，待麸下烟起，迅速投入石菖蒲片，文火翻炒至药物表面呈黄色，具焦香气，立即取出，筛去麦麸，摊开晾凉。每100 kg石菖蒲片，用蜜麸12.5 kg[7]。

2.2 石菖蒲挥发油的提取

分别称取石菖蒲生品、麸炒品粗粉(过二号筛)50 g，参照《中国药典》2015版四部通则挥发油测定法甲法提取。所得挥发油用无水硫酸钠脱水后备用。挥发油生品和麸炒品均为淡黄色透明油状物，麸炒品颜色略深，具有特殊香气。

2.3 GC-MS分析条件

2.3.1 气相色谱条件

色谱柱为HP-5MS(60 m×0.25 mm×0.25 μm)弹性石英毛细管柱，初始温度52 ℃(保留2 min)，以3 ℃/min升温至124 ℃，以2 ℃/min升温至190 ℃，再以10 ℃/min升温至260 ℃，汽化室温度250 ℃；载气为高纯He(99.999%)，载气流量1.0 mL/min；运行时间：66 min；溶剂延迟时间：6.0 min；柱前压16.88 psi，分流比50∶1。

2.3.2 质谱条件

离子源为EI源；离子源温度230 ℃；发射电流34.6 μA；四极杆温度150 ℃；倍增器电压1953 V；电子能量70 eV；接口温度280 ℃；质量范围29～500 amu。

2.4 数据处理

对总离子流图中的各峰经质谱计算机数据系统检索及核对Nist17和Wiley275标准质谱图，采用峰面积归一化法对各组分进行成分检测和相对百分含量分析。

3 结果与讨论

根据2.3项“GC-MS分析条件”，对石菖蒲生品和麸炒炮制品的挥发油进行GC-MS分析，得生品和炮制品的总离子流图，结果见图1，麸炒前后挥发油中相对百分含量，结果见表1。

图1 石菖蒲生品及炮制品总离子流图

表1 石菖蒲麸炒前后挥发油的化学成分分析

通过GC-MS分析，从石菖蒲生品的挥发油中检出74个色谱峰，鉴定了71种成分，从麸炒石菖蒲的挥发油中检测出74个色谱峰，鉴定了71种成分。

石菖蒲经过麸炒后挥发油成分发生了质和量的变化，挥发油中的β-细辛醚等20个成分的相对含量有所增加，棕榈酸等44个成分的相对含量降低，生成了肉桂醛(Cinnamaldehyde)、γ-细辛醚(γ-Asarone)、二十五(碳)烷(Pentacosane)3个新成分。α-萜品油烯(α-Terpinolene)、α-芳樟醇(Linalool)、4(14)，11-桉叶二烯[E-dudesma-4(14)，11-diene]这3种成分消失。Tatriene、β-金合欢烯(β-Farnesene)、香柏酮(N-ootkatone)、δ-榄香稀(δ-EIemene)、十五烷酸(Pentadecanoicacid)这5个成分炮制前后含量无变化。分析认为，造成麸炒前后石菖蒲挥发油成分和含量的差异，除了与挥发油的挥发性及易氧化性有关外，可能与辅料、炮制温度等因素加快了挥发油中某些成分转化的速度有关。

β-细辛醚、α-细辛醚、反式甲基异丁香酚为石菖蒲主要挥发性成分物质，经麸炒后含量增加，分析认为石菖蒲麸炒后化湿开胃作用增强可能与主要挥发性成分含量增加相关，但其作用机制如何，尚待进一步结合现代药效学研究。

炮制可达到增效、减毒、改变药性、增加新成分、扩大药用范围的目的，以满足临床所需。通过对石菖蒲麸炒前后挥发油成分的分析，不仅为石菖蒲饮片质量标准研究及优化炮制工艺奠定良好的研究基础，同时，也为后期结合药效学研究，进一步明确石菖蒲麸炒前后药效物质基础及阐明炮制机理提供重要参考依据。为更好开发利用石菖蒲植物资源，充分发挥临床应用，提供一定的科学依据。