生鲜乳中抗生素检测技术要点分析

◎ 常 虹，叶盛恒，沈国聪，张爱荣，张 健，宋国标

（1.海南省食品检验检测中心（海南省实验动物中心），海南 海口 570100；2.广州市白云区动物卫生监督所，广东 广州 510000）

目前，生鲜乳中存在最为严重的问题就是药物残留，也是对人体健康影响最严重的因素。根据相关调查研究发现，在饲养奶牛过程中，为了提升奶牛的生产量，部分养殖户会使用大量的抗生素和其他药物，最终导致流入市场的牛奶制品中含有大量药物残留，必然会威胁消费者的身体健康甚至生命安全。从生鲜乳中抗生素的来源分析，奶牛养殖场在针对奶牛泌乳期乳牛的疾病往往选择采用抗生素进行治疗，这些药物在进入奶牛体内之后，会逐渐转移到乳腺，并在乳腺中残留。为了提高奶牛的养殖效益，提高奶牛的生产质量，保证奶牛的健康成长，在喂养过程中，部分养殖户会使用抗生素，然后残留在牛奶中的抗生素就会进入到人体内，这也是牛奶中含有抗生素的主要的因素之一[1]。此外，养殖场的管理工作不到位，所采取的养殖措施不够规范，养殖措施不够完善，导致整体养殖标准性不高，导致部分不良操作的发生，比如没有严格按照相关的卫生标准来进行养殖。因此，相关市场监督机构应加强监督管理，引进更高水平的检测技术，提高抗生素的检测水平，进一步保证生鲜乳的质量。监督部门要切实发挥好自身的监督作用，做好市场行为的监管工作，维护市场秩序，促进乳品行业健康有序发展。

1 生鲜乳中抗生素检测技术要点

1.1 检测材料准备要点

①技术人员要做好采样工作，要严格按照相关要求做好采样工作。在采样时，必须保证整个采样过程的无菌性。采样完成后，技术人员需要对样品进行筛选，然后科学保存并运输至实验室，保证整个样品质量检测工作的顺利进行。②生鲜乳样品送至实验室之后，要按照要求做好样品的培养，准备好相关的设备和材料，比如要准备好MC培养基。此外，在进行对照实验中，要准备好对照组生鲜乳样品，一般是从当地的质检部门获取。③试验人员需要准备好检测试验所需的检测仪器。准备好材料仪器是生鲜乳抗生素检测技术顺利应用的基础，也是试验前的必要准备环节，相关技术人员应引起足够重视，确保材料和仪器齐全，且符合检测试验实际需求。

1.2 掌握检测方法原理

检测技术人员使用国标TTC检测法，在进行检测之前，检测技术人员应该先明确检测方法的应用原理，在准备好的生鲜乳样品中放入菌种，并采用科学的手段培养菌种，然后放入TTC指示剂，并认真观察好样品的颜色变化，结合颜色的变化判断当前样品中抗生素的残留情况[2]。

1.3 采样技术应用要点

一般而言，生鲜乳的样品规格为500 mL，在实验之前需要对样品进行消毒，然后再进行密封处理。在正式检测之前，需要先取出少量样品进行备用检测，一般取出25 mL，然后再将少量的检测样品放入到装有生理盐水的锥形瓶中，通过摇晃促使样品和生理盐水之间的混合，之后准备好离心机，将备检样品放入离心机中离心10 min。上述步骤完成后，样品的脂肪会被分离出来，此时技术人员将上层的脂肪取出，并将剩下的样品放入其他的容器中进行存放。

1.4 掌握菌种使用要点

在使用菌种的过程中，要保证检测的准确性，检测人员必须要掌握好相关的要点，要保证操作的规范性，保证检测结果的准确性。比如，在进行菌种移种时，必须要按照相关的规范和标准开展工作，要准备相关的设备材料，控制好整个环境的温度，如环境温度要控制在36 ℃。在完成灭菌后，检测人员还需要对培养基进行稀释，然后再进行安全储存保管。

1.5 试验指示剂操作要点

要保证生鲜乳抗生素检测结果的准确性，检测人员要掌握好试验指示剂的操作要点，严格按照标准来做好标品的称量。称好标品后需要将其倒入操作瓶中，检测人员要选择棕色瓶来进行操作，并且将标品放入到冰箱中进行保存。此外，检测技术人员在应用指示剂进行检测试验时，要先进行稀释，才能保证检测的准确性。在检测过程中，检测人员要及时观察溶液的变化情况，一旦发现溶液出现淡褐色的现象，就不能进行检测，需要对瓶中的指示剂进行更换。

1.6 规范检测试验操作步骤

在生鲜乳抗生素检测中，需要先对样品进行加热，一般情况，可以采用水浴的方式。在加热过程中，检测人员要控制好加热的时间和温度，然后再对试管进行冷却处理。完成加热操作后，检测人员需要进行接种处理。检测技术人员向水浴内放入活性菌液1 mL左右，水浴温度约为36 ℃，并控制好培养时间，约为2 h左右。然后检测人员需要稀释指示剂，将4%浓度的TTC指示剂按照1∶5比例进行稀释，从其中取出0.3 mL，之后将其放入到水浴内，控制好培养时间约30 min，观察水浴内的颜色变化。最后，进行复检阶段处理。检测技术人员需要准备好一式两份检测样品，当第一次检测处理结构呈阳性时，需要进行第二次检测，同时检测技术人员需要做好对照组分析，将TTC、菌液以及抗生素加入8 mL的无抗生素生鲜乳样品中，作为阳性对照组，将TTC、菌液加入9 mL的无抗生素生鲜乳样品中，作为阴性对照组，这些对照组都可作为复检操作的重要参考[3]。

1.7 试验判断处理要点

在完成上述检测流程之后，检测人员要及时观察实验中颜色的变化，做好检测结果的判断，整个判断过程需要迅速完成，且需要做避光处理。若生鲜乳样品中存在抗生素残留情况，通过融入菌液培养，培养液的菌种不会增殖，根据TTC指示剂的使用原理，其中不会出现显色反应，即指示剂不会被还原，培养瓶中无明显颜色变化。如果生鲜乳样品中没有抗生素，则培养液中的菌种会发生增殖情况，放入其中的TTC指示剂会被还原，则出现显色反应，培养瓶中的溶液会出现明显的红色。因此，判定试验结果时，发生颜色变化即呈现为红色的，判定为阴性，而未发生明显颜色变化即为原色的，判定为阳性。

2 生鲜乳中抗生素残留主要原因分析

近年来，生鲜乳食品健康安全事件频发，生鲜乳中大量抗生素残留威胁着消费者的健康。导致生鲜乳质量问题，不仅是因为奶牛养殖不够规范，而且对于生鲜乳行业的监督力度不高，缺乏有效的市场监督。因此，结合当前生鲜乳食品安全问题，相关监督机构要切实做好市场监管工作，特别是要做好生鲜乳抗生素残留的检测，避免质量不合格的产品流入到市场，进而威胁消费者的健康。为保证生鲜乳的生产质量，提高质量检测水平至关重要，相关部门要注重提高抗生素的检测技术水平，全面提升生鲜乳食品监管水平[4]。

2.1 养殖户不合理使用抗生素

就当前部分养殖场管理现状而言，由于其饲养管理水平较低，因此容易发生疫病，而且在发生疫病时混合用药用于奶牛治疗，这是抗生素不合理使用的重要原因之一，由于养殖场的工作人员多为农民，因此对于动物疫病防疫等了解不全，对于各种药物使用也缺乏正确认知，因此在养殖过程中如果奶牛出现疾病，经常会出现不合理用药的情况，致使产生的牛奶中含有大量抗生素残留。

2.2 动物疫病的多样化

当前，随着我国养殖业不断发展进步，这也进一步导致了动物疫病发生的概率以及疾病的多样化。在发生疾病时，由于养殖场人员并不了解动物疫病的具体情况，仍然按照原先的方法用药，出现随意混合用药的情况，这些都导致奶牛体内含有大量抗生素，产生的牛奶中则存在大量抗生素残留。此外，部分养殖户没有严格按照规定执行休药期，也容易导致畜禽产品中含有大量抗生素残留。

2.3 在奶牛饲料中添加抗生素药物

部分奶牛养殖户在进行饲养管理过程中，会进行疾病的预防管理，养殖户会通过喂养抗生素的方式来保证奶牛的健康成长，避免奶牛发生疾病。但奶牛在成长中，如果长期喂养抗生素，不仅体内会残留大量的药品，也会影响奶牛的抵抗力，从而导致各种疾病的产生，因此过量喂养奶牛抗生素，会进入反复的恶性循环，最终只会导致抗生素在奶牛中的过量残留，进而威胁牛奶的质量安全。

3 生鲜乳中抗生素残留问题解决措施

3.1 提升生鲜乳中抗生素检测技术水平

对于生鲜乳中抗生素检测而言，在试验过程中存在诸多影响因素会对检测的结果产生影响，例如试验环境、设备以及人为操作失误等因素。对于实验室管理环境而言，相关管理人员需要严格按照相关标准和规定对内部环境以及实验平台等进行消毒处理，同时实验室内的各种仪器仪表需要按照检测需求进行校正和检定，以确保试验结果的准确性。

3.2 加强养殖场监督管理力度

①各个养殖场在进行疫病防治时，要加强对养殖场内部的疾病检测和诊断工作，并综合该地区周边的疾病情况，根据监测数据以及常见的动物疫病类型，切实做好动物的防疫工作，确保各种动物疾病的防治效果。养殖户需要适当控制抗生素用量，待查明疾病情况后再严格按照要求进行治疗与防控。②应加强养殖场饲养管理工作，在奶牛饲养阶段，饲养人员需要分阶段、分标准科学合理搭配饲养材料，并按照季节性特征以及奶牛的生长特点合理配比，同时加强饲养管理，保证奶牛的健康成长。养殖场在使用抗生素之前，需要做好药敏试验工作，不能出现盲目使用或者过度使用的现象。③应加强对奶牛养殖环境的控制工作，养殖人员需要严格按照相关监管部门制定的奶牛养殖环境标准，对圈舍、设施等进行优化管理，确保养殖场的各个环境都能满足养殖要求，避免环境因素对于奶牛养殖的二次污染。

4 结语

随着我国对于食品安全的重视程度不断加深，生鲜乳中的抗生素残留问题也逐渐受到了广泛关注。为解决生鲜乳中抗生素残留的问题，需要针对生鲜乳中抗生素残留检测技术进行优化，相关检测技术人员需要掌握生鲜乳中抗生素残留检测试验流程和要点，严格按照相关检测执行标准进行操作试验，确保检测试验结果的准确性[5]。除了加强生鲜乳检测技术的应用之外，还应加强对养殖场的饲养管理工作，监管部门也应加大监管力度，实现对生鲜乳抗生素残留的全面把控，保障生鲜乳食品安全。