不同类型病原体呼吸道感染患儿外周血淋巴细胞亚群水平的对比研究

沈琳

呼吸道感染作为临床中的多发病及常见病，容易反复发作，以小儿较为常见，合并症较多，对患儿的生活质量造成了较大的影响。据调查资料显示，呼吸道感染的发生发展与微量元素、维生素缺乏、病原微生物感染、胃食管反流等诸多因素相关，加之呼吸道感染的发生发展本身与病原体具有密切的相关性，且不同的病原体在感染呼吸道之后非常容易导致机体向不同免疫方向所发展[1-2]。因此，面对不同类型病原体呼吸道感染时，采取有针对性的方法进行治疗至关重要。本研究对不同类型病原体呼吸道感染患儿外周血淋巴细胞亚群水平进行了研究，旨在进一步提高临床疗效，结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析南京医科大学附属苏州医院2018年4月-2021年4月收治的117例呼吸道感染患儿的临床资料，按照细菌感染及病毒感染分组，其中细菌感染组56例，病毒感染组61例，选择同期在本院进行健康体检的60例儿童作为对照组。（1）纳入标准：①呼吸道感染患儿符合文献[3]《诸福棠实用儿科学》关于呼吸道感染的诊断标准；②对照组儿童体检结果均正常。（2）排除标准：①合并器官及系统感染；②在进入研究前3个月内使用过任何免疫调节方法治疗；③因先天性肺、气管、心脏畸形、胃食管反流、营养不良、佝偻病等引起的呼吸道感染者；④依从性较差；⑤临床资料缺失。细菌感染组中男30例，女26例；年龄1～12岁，平均（6.25±1.22）岁；上呼吸道感染15例，下呼吸道感染41例；金黄色葡萄球菌感染21例，链球菌感染20例，嗜血流感杆菌感染15例。病毒感染组中男34例，女27例；年龄2～13岁，平均（6.30±1.28）岁；上呼吸道感染18例，下呼吸道感染43例；呼吸道合胞病毒感染20例，腺病毒感染22例，人副流感病毒感染19例。对照组中男33例，女27例；年龄2～13岁，平均（6.29±1.20）岁。三组性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 呼吸道病原体核酸检测 （1）细菌类型检测：在患儿入院当日或者次日采集其咽拭子、痰液等标本，将其接种在血平板及嗜血杆菌选择性培养基上，接种、分离及培养的操作均按照文献[4]《全国临床检验操作规程》进行，细菌类型包括金黄色葡萄球菌、链球菌、嗜血流感杆菌。（2）病毒类型检测：采取同样的方法收集到标本后，使用聚合酶链反应试剂盒对病毒类型进行检测，包括呼吸道合胞病毒、腺病毒及人副流感病毒。

1.2.2 外周血淋巴细胞亚群检测 按照文献[5]《WS/T 360-2011流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》中相关标准进行，抽取患者的空腹静脉血2 ml，将采集到的血液放置在抗凝真空管内，采用贝克曼流式细胞仪对外周血淋巴细胞亚群检测，检测指标包括CD3+、CD4+、CD8+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、CD3+CD4-CD8-、CD4+/CD8+。

1.3 观察指标

对比细菌感染组、病毒感染组及对照组外周血淋巴细胞亚群水平，不同类型细菌感染组外周血淋巴细胞亚群水平，不同类型病毒感染组外周血淋巴细胞亚群水平。

1.4 统计学处理

采用SPSS 18.0统计学软件对本次研究数据进行分析。计量资料以（±s）表示，组间两两比较采用t检验，多组比较采用F检验；计数资料以率（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组外周血淋巴细胞亚群水平对比

细菌感染组、病毒感染组CD3+、CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD4-CD8-、CD4+/CD8+水平低于对照组，CD8+、CD3+CD4+水平高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。细菌感染组、病毒感染组组间 CD3+、CD4+、CD8+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、CD3+CD4-CD8-、CD4+/CD8+相比，差异无统计学意义（P＞0.05），见表 1。

表1 三组外周血淋巴细胞亚群水平对比（±s）

表1 三组外周血淋巴细胞亚群水平对比（±s）

*与对照组比较，P＜0.05；#与病毒感染组比较，P＞0.05。

组别 CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD3+CD8+（%） CD3+CD4+（%） CD3+CD4-CD8-（%） CD4+/CD8+细菌感染组（n=56） 61.98±7.89*# 25.99±1.67*# 26.98±1.34*# 24.61±9.51*# 36.14±7.13*# 2.91±0.88*# 0.96±0.23*#病毒感染组（n=61） 62.33±8.12* 26.33±1.45* 26.39±1.79* 23.66±9.25* 36.77±8.25* 2.78±1.32* 1.00±0.55*对照组（n=60） 68.12±8.25 39.33±1.61 20.21±1.25 30.51±8.12 30.20±6.52 4.89±2.11 1.94±0.45 F值 4.225 5.174 6.278 5.587 8.572 9.887 12.250 P 值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 不同类型细菌感染外周血淋巴细胞亚群水平对比

链球菌、嗜血流感杆菌感染患儿外周血CD3+、CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD4-CD8-、CD4+/CD8+水平高于金黄色葡萄球菌感染患儿，CD8+、CD3+CD4+水平低于金黄色葡萄球菌感染患儿，差异均有统计学意义（P＜0.05）。链球菌感染患儿外周血CD8+、CD3+CD4-CD8-水平高于嗜血流感杆菌感染患儿，差异均有统计学意义（P＜0.05）；两组CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 不同类型细菌感染外周血淋巴细胞亚群水平对比（±s）

表2 不同类型细菌感染外周血淋巴细胞亚群水平对比（±s）

*与金黄色葡萄球菌组比较，P＜0.05；#与嗜血流感杆菌组比较，P＜0.05。

组别 CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD3+CD8+（%）CD3+CD4+（%）CD3+CD4-CD8-（%） CD4+/CD8+金黄色葡萄球菌组（n=21） 58.21±11.65 20.25±2.85 32.91±1.39 21.60±6.52 38.21±10.21 1.02±0.58 0.62±0.25链球菌组（n=20） 61.56±10.24* 25.69±2.77*# 26.84±1.65*# 25.32±7.81* 32.25±9.28* 6.28±3.22*# 0.95±0.36*嗜血流感杆菌组（n=15） 63.69±9.85* 29.10±2.84* 22.98±1.76* 26.20±12.20* 31.64±9.15* 1.14±0.19* 1.26±0.60*F值 8.277 10.147 11.658 9.841 10.874 12.587 7.297 P 值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 不同病毒感染外周血淋巴细胞亚群水平对比

呼吸道合胞病毒、腺病毒感染患儿外周血中CD8+、CD3+CD4-CD8-水平低于人副流感病毒感染患儿，CD4+/CD8+水平高于人副流感病毒感染患儿，差异均有统计学意义（P＜0.05）。三组CD3+、CD4+、CD3+CD4+、CD3+CD8+水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表 3。

表3 不同病毒感染外周血淋巴细胞亚群水平对比（±s）

表3 不同病毒感染外周血淋巴细胞亚群水平对比（±s）

*与人副流感病毒组比较，P＜0.05。

组别 CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD3+CD8+（%） CD3+CD4+（%）CD3+CD4-CD8-（%）CD4+/CD8+呼吸道合胞病毒组（n=20） 61.25±10.25 26.48±1.51 22.67±1.75* 23.84±9.33 37.25±8.14 1.63±0.86* 1.17±0.65*腺病毒组（n=22） 61.98±5.60 27.10±1.47 23.10±1.84* 23.01±8.99 37.11±9.24 2.74±2.35* 1.17±0.52*人副流感病毒组（n=19） 62.77±6.87 26.10±1.28 30.39±1.84 23.96±9.50 34.52±6.25 3.65±1.99 0.86±0.51 F值 0.874 1.025 8.474 0.957 1.369 10.287 11.339 P 值 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05

3 讨论

结合既往报道发现，呼吸道感染的发生发展容易受到多种因素的影响，且诱发因素也较多，在目前的临床工作中，认为无论何种病原体所引起的呼吸道感染多会诱发并加重机体的免疫功能异常及免疫疲惫的情况，甚至容易导致患儿出现“感染-免疫紊乱、免疫疲惫-感染”的恶性循环状态[6]。同时，也有临床资料显示，机体免疫系统在人体内可因各类免疫应答的产生来对抗病原体的侵袭，且不同的免疫应答途径多导致外周血淋巴细胞水平表现出不同程度的变化[7]。因此，对呼吸道感染的免疫状态及功能展开相关研究具有重要临床意义。T淋巴细胞作为人体中一类具有细胞免疫的效应细胞，同时也被当作是比较重要的免疫调节细胞[8]。CD3+代表成熟的T淋巴细胞，多用于反映及评价人体的细胞免疫功能状态。CD4+可用于辅助诱导性T细胞亚群，可在与抗原协同的作用下，对B细胞产生较强的刺激作用而分泌大量的浆细胞。有资料显示，当CD细胞减少时也可表明B细胞产生免疫球蛋白的功能及细胞免疫功能的降低[9]。CD8+是抑制性细胞及细胞毒性细胞亚群，以此用于代表机体的免疫抑制状态[10]。而CD4+/CD8+多被用于评价及判断人体Th与Ts之间所处在的功能平衡状态，同时也被认为是体现人体免疫系统内环境稳定性的重要指标[11]。为此，在发生病原体呼吸道感染之后，抗原提呈细胞则会将外源性的抗原肽呈递给T淋巴细胞并对其产生刺激激活的作用。本研究结果显示，不论是细菌感染或者是病毒感染，均会引起CD3+、CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD4-CD8-、CD4+/CD8+水平降低，CD8+、CD3+CD4+水平升高（P＜0.05）。分析原因可能是一旦发生呼吸道感染，无论何种感染类型均会导致儿童的免疫功能出现明显失调的现象，机体的免疫力及对抗病原的杀伤力也会明显降低，无法更好地将体内病原体清除[12-13]。同时，在对不同病原体及病毒感染患儿外周血淋巴细胞亚群水平进行对比时发现，链球菌、嗜血流感杆菌感染患儿外周血 CD3+、CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD4-CD8-、CD4+/CD8+水平高于金黄色葡萄球菌感染患儿，CD8+、CD3+CD4+水平低于金黄色葡萄球菌感染患儿（P＜0.05）。推测可能与链球菌自带的细胞壁荚膜多糖功能所引起的免疫功能状态异常改变相关，但具体作用机制仍然需要进一步的分析及研究[14]。另外，呼吸道合胞病毒、腺病毒感染患儿外周血中CD8+、CD3+CD4-CD8-水平低于人副流感病毒感染患儿，CD4+/CD8+水平高于人副流感病毒感染患儿（P＜0.05），与文献[15]报道基本一致，可用于临床诊断及治疗。

综上所述，不同病原体呼吸道感染患儿外周血淋巴细胞亚群水平之间存在明显的差异性，通过对外周血淋巴细胞亚群水平进行监测可有助于反映及评价患儿的免疫状态，对疾病的诊断及治疗具有一定的应用价值。